專利名稱：板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中華人民共和國國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的藥物板藍(lán)清熱顆粒[WS-10001 (ZD-0001)-2005]的質(zhì)量檢測方法。
背景技術(shù)：
中華人民共和國國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的藥物板藍(lán)清熱顆粒，具有清熱解毒疏散風(fēng)熱，利咽消腫的作用。該復(fù)方制劑由中藥南板藍(lán)根1500g、薄荷腦lg組成，上述原料共制成1000g或500g(無糖型)。南板藍(lán)根為爵床科植物馬藍(lán)B即hicacanthuscusia(Nees)Bremek.的干燥根莖及根，具有清熱解毒，涼血之功效；薄荷腦為薄荷素油中得到的一種飽和的環(huán)狀醇，屬芳香藥、調(diào)味藥及驅(qū)風(fēng)藥，可用于皮膚或黏膜產(chǎn)生清涼感以減輕不適及疼痛。國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)[WS-10001 (ZD-0001)-2005]中，含量測定指標(biāo)為靛藍(lán)，靛藍(lán)屬脂溶性成分，在水中的提取轉(zhuǎn)移率較低，有文獻(xiàn)報(bào)道"有人對水提取液的靛藍(lán)、靛玉紅作了含量測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其提取率僅為1. 5% 3. 5% ，此外，濃縮過程中的損失率高達(dá)92. 4% "。因板藍(lán)清熱顆粒的制備工藝中南板藍(lán)根系采用加水煎煮提取，故其成品中靛藍(lán)含量很低，僅為百萬分之0. 3 0. 6%，且靛藍(lán)穩(wěn)定性較差，其作為含量測定指標(biāo)對質(zhì)量的控制意義較差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量檢測方法。
板藍(lán)清熱顆粒的配方南板藍(lán)根1500g，薄荷腦lg，蔗糖570g，糊精380或糊精450g，阿司帕坦4g。制法取南板藍(lán)根，加水煎煮二次，每次1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 36 1. 3S(6(TC )的稠膏，取稠膏，加入蔗糖粉、糊精及薄荷腦(用適量乙醇溶解后加入)，制成顆粒，低溫干燥，制成1000g ;或取稠膏，加入糊精和阿司帕坦及薄荷腦(用適量乙醇溶解后加入)，制成顆粒，低溫干燥，制成500g(無糖型)。
性狀本品為灰棕色至黑褐色的顆粒，味辛涼、甜，微苦；或淺棕色至棕褐色的顆粒，味苦、辛涼，微甜(無糖型)。
本發(fā)明的板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量檢測方法為 1、取板藍(lán)清熱顆粒(以下稱為"本品")2袋(每袋10克，無糖型每袋5克)研細(xì)，加氯仿一石油醚(30 60°C )(1:2)混合溶液50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液加無水硫酸鈉10g，攪拌2分鐘，取上清液蒸干，殘?jiān)勇确?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取靛玉紅對照品，加氯仿制成每lml含0. lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 20 ii 1、對照品溶液5 8 iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30 6(TC) —甲酸乙酯一甲酸(10 :5:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，立即檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。 2、薄荷腦的薄層色譜鑒別方法取本品2袋，研細(xì)，加石油醚(沸程30 60°C )40-60ml超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液小心揮至近干，殘?jiān)尤氪姿嵋阴?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取薄荷腦對照品，加無水乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 30iU、對照品溶液10 15iU，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯一甲酸(體積配比18-20 : 0.9-1.1 : 0.4-0.6)為展開劑，展開至10cm以上，取出，晾干，再噴以5% (g/ml)香草醛硫酸一乙醇(體積配比1. 5-2. 5 : 7. 5-8. 5)的混合溶液，在lOO-ll(TC加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3、醇浸出物的檢測方法取本品約10g(研細(xì))，加入無水乙醇50ml，照醇溶性浸出物測定法項(xiàng)下的熱浸法(中國藥典2005年版一部附錄X A)測定，即得；本品含醇浸出物不得少于1.5% (g/g，醇浸出物/板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量百分比)，無糖型不得少于0. 1% (g/g，醇浸出物/板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量百分比)。 4、腺苷的含量測定方法(照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定) 1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇一水(體積配比7 : 93)為流動(dòng)相；檢測波長為260士2nm(理論板數(shù)按腺苷峰計(jì)算應(yīng)不低于
2000); 2)對照品溶液的制備精密稱取腺苷對照品適量，加30% (g/ml)甲醇制成每lml含20 ii g的溶液，即得對照品溶液； 3)供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取6g(或3g無糖型)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入90% (g/ml)甲醇40-60ml，稱定重量，超聲處理(功率160W，頻率50kHz) 30-60min，放冷，再稱定重量，用90% (g/ml)甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20-30ml，蒸至近干，殘?jiān)?0% (g/ml)甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
4)測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 ii 1，注入液相色譜儀，測定以腺苷含量； 5)本品每袋含南板藍(lán)根以腺苷(C1QH13N504)計(jì)，不得少于0. lmg。 本發(fā)明對板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行改進(jìn)，改進(jìn)了薄荷腦的薄層色譜定性
鑒別方法，修訂了醇浸出物的限度，使其能夠更合理地控制其產(chǎn)品質(zhì)量，建立了制劑中腺苷
的含量測定檢測方法，腺苷系水溶性成分，具有抗炎作用，是南板藍(lán)根的有效成分之一，性
質(zhì)較為穩(wěn)定，選取其作為含量測定指標(biāo)能更準(zhǔn)確地控制成品的質(zhì)量，板藍(lán)清熱顆粒質(zhì)量控
制方法的改進(jìn)保證了復(fù)方制劑較高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例 板藍(lán)清熱顆粒藥物配方取南板藍(lán)根1500g，薄荷腦lg，蔗糖570g，糊精380或糊精450g，阿司帕坦4g。 制法取南板藍(lán)根，加水煎煮二次，每次1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 36 1. 3S(6(TC )的稠膏，取稠膏，加入蔗糖粉、糊精及薄荷腦(用適量乙醇溶解后加入)，制成顆粒，低溫干燥，制成1000g ;或取稠膏，加入糊精和阿司帕坦及薄荷腦(用
適量乙醇溶解后加入)，制成顆粒，低溫干燥，制成500g (無糖型)。 性狀本品為灰棕色至黑褐色的顆粒，味辛涼、甜，微苦；或淺棕色至棕褐色的顆粒，味苦、辛涼，微甜(無糖型)。 1、取板藍(lán)清熱顆粒(以下稱為"本品")2袋(每袋10克，無糖型每袋5克)研細(xì)，加氯仿一石油醚(30 60°C )(1:2)混合溶液50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液加無水硫酸鈉10g，攪拌2分鐘，取上清液蒸干，殘?jiān)勇确?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取靛玉紅對照品，加氯仿制成每lml含0. lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 20 ii 1、對照品溶液5 8 iU，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30 60°C )—甲
酸乙酯一甲酸(io :5:i)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，立即檢視。供試品色
譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。 2、該藥物的薄荷腦的薄層色譜定性鑒別方法為取本品2袋，研細(xì)，加石油醚(沸程30 60°C ) 50ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液小心揮至近干，殘?jiān)尤氪姿嵋阴?. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取薄荷腦對照品，加無水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 30iU、對照品溶液10 15iU，分別點(diǎn)于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯一甲酸(體積配比19 : 1 : 0.5)為展開齊U，展開至10cm以上，取出，晾干，再噴以5X (g/ml)香草醛硫酸一乙醇(體積配比2 : 8)的混合溶液，在105t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 3、該藥物的醇浸出物的檢測方法為取本品約10g(研細(xì))，加入無水乙醇50ml，照醇溶性浸出物測定法項(xiàng)下的熱浸法(中國藥典2005年版一部附錄X A)測定，即得；本品含醇浸出物不得少于1. 5% (g/g，醇浸出物/板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量百分比)，無糖型不得少于0. 1% (g/g，醇浸出物/板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量百分比)。 4、該藥物的腺苷的含量測定方法(照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定) 1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇一水(體積配比7 : 93)為流動(dòng)相；檢測波長為260nm(理論板數(shù)按腺苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000);
2)對照品溶液的制備精密稱取腺苷對照品適量，加30% (g/ml)甲醇制成每lml含20 ii g的溶液，即得對照品溶液； 3)供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取6g(或3g無糖型)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入90% (g/ml)甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率160W，頻率50kHz) 40min，放冷，再稱定重量，用90% (g/ml)甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸至近干，殘?jiān)?0X (g/ml)甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
4)測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 ii 1，注入液相色譜儀，測定以腺苷含量； 5)本品每袋含南板藍(lán)根以腺苷(C1QH13N504)計(jì)，不得少于0. lmg ;
其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶質(zhì)若干克。 以下是改進(jìn)后的板藍(lán)清熱顆粒藥物質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)為 板藍(lán)清熱顆粒 Banian Qingre Keli處方南根藍(lán)根1500g薄荷腦lg 蔗糖570g 糊精380g 或糊精450g 阿司帕坦4g _ 制成 lOOOg或500g (無糖型)制法取南板藍(lán)根，加水煎煮二次，每次1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1. 36 1. 38(60°C )的稠膏，取稠膏，加入蔗糖粉、糊精及薄荷腦(用適量乙醇溶解后加入)，制成顆粒，低溫干燥，制成1000g ;或取稠膏，加入糊精和阿司帕坦及薄荷腦(用適量乙醇溶解后加入)，制成顆粒，低溫干燥，制成500g(無糖型)，即得。
性狀本品為灰棕色至黑褐色的顆粒，味辛涼、甜，微苦；或淺棕色至棕褐色的顆粒，味苦、辛涼，微甜(無糖型)。鑒別(1)取本品2袋，研細(xì)，加氯仿一石油醚(30 60°C)(1 : 2)混合溶液50ml ，超聲處30分鐘，濾過，濾液加無水硫酸鈉10g，攪拌2分鐘，取上清液蒸干，殘?jiān)勇确?. 5ml使溶解，作為供試品溶液。另取靛玉紅對照品，加氯仿制成每lml含O. lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10 20 i！ 1、對照品溶液5 8 ii 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚(30 6(TC) —甲酸乙酯一甲酸(10 : 5 : 1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，立即檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
(2)取本品2袋，研細(xì)，加石油醚(30 60°C ) 50ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液小心揮至近干，殘?jiān)尤氪姿嵋阴?. 5ml使溶解，作為供試品溶液。另取薄荷腦對照品，加無水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液20 30 ii 1、對照品溶液10 15 ii 1，分別點(diǎn)于同一用1 %氫氧化鈉溶液制備的以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯_醋酸乙酯一甲酸(19 : 1 : 0.5)為展開齊U，展開至10cm以上，取出，晾干，再噴以5^香草醛硫
酸一乙醇(2 : 8)的混合溶液，在i05t:加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品
色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。檢查應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(中國藥典2005年版一部附錄IC)。
浸出物取本品約10g(研細(xì))，稱定重量，精密加入無水乙醇50ml，照醇溶性浸出物測定法項(xiàng)下的熱浸法(中國藥典2005年版一部附錄X A)測定，即得。本品含醇浸出物不得少于1.5%，無糖型不得少于0. 1%。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇一水
(7 : 93)為流動(dòng)相；檢測波長為260nm。理論板數(shù)按腺苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。 對照品溶液的制備精密稱取腺苷對照品適量，加30%甲醇制成每lml含20 y g的
溶液，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取6g或3g(無糖型)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入90%甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率160W，頻率50kHz) 40min，放冷，再稱定重量，用90 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸至近干，殘?jiān)?0X甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45um)濾過，取續(xù)濾液，即得。 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10iU，注入液相色譜儀，測定，即得。 本品每袋含南板藍(lán)根以腺苷(C1QH13N504)計(jì)，不得少于0. lmg。功能主治清熱解毒，疏散風(fēng)熱，利咽消腫。用于外感風(fēng)熱，熱毒壅盛所致感冒發(fā)
熱，頭痛，目赤，咽喉腫痛；流感，急性咽炎，扁桃腺炎，腮腺炎見上述證候者。用法用量開水沖服， 一次1袋， 一 日3次；重癥可加倍，小兒酌減。預(yù)防流感等病
毒感染可一日2袋，連服5日。禁忌風(fēng)寒感冒、脾胃虛寒者不宜服用。規(guī)格每袋裝(1) 10g (2) 5g (無糖型)。貯藏密封。有效期36個(gè)月。
權(quán)利要求
一種板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量控制方法，板藍(lán)清熱顆粒的藥物配方由南板藍(lán)根1500g，薄荷腦1g，蔗糖570g，糊精380或糊精450g，阿司帕坦4g組成；上述原料制成板藍(lán)清熱顆粒1000g或無糖型500g；其特征在于該藥物的質(zhì)量控制方法為1)取板藍(lán)清熱顆粒2袋，每袋10克，無糖型每袋5克，研細(xì)，加氯仿-石油醚在30～60℃下按1∶2混合的溶液50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液加無水硫酸鈉10g，攪拌2分鐘，取上清液蒸干，殘?jiān)勇确?.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取靛玉紅對照品，加氯仿制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液10～20μl、對照品溶液5～8μl，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸按10∶5∶1的上層溶液作為展開劑，展開，取出，晾干，立即檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；2)薄荷腦的薄層色譜鑒別方法取板藍(lán)清熱顆粒2袋，研細(xì)，加30～60℃石油醚40-60ml超聲處理20-40分鐘，濾過，濾液小心揮至近干，殘?jiān)尤氪姿嵋阴?.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取薄荷腦對照品，加無水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液20～30μl、對照品溶液10～15μl，分別點(diǎn)于同一用1％(g/ml)氫氧化鈉溶液制備的以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸按體積配比18-20∶0.9-1.1∶0.4-0.6作為展開劑，展開至10cm以上，取出，晾干，再噴以5％(g/ml)香草醛硫酸-乙醇按體積配比1.5-2.5∶7.5-8.5的混合溶液，在100-110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；3)醇浸出物的限度取板藍(lán)清熱顆粒10g研細(xì)，加入無水乙醇50ml，照醇溶性浸出物測定法項(xiàng)下的熱浸法測定，即得；板藍(lán)清熱顆粒含醇浸出物不得少于1.5％g/g，即醇浸出物/板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量百分比，無糖型不得少于0.1％g/g，即醇浸出物/板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量百分比；4)腺苷的含量測定檢測方法(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水體積配比7∶93為流動(dòng)相；檢測波長為260±2nm；(2)對照品溶液的制備精密稱取腺苷對照品適量，加30％(g/ml)甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得對照品溶液；(3)供試品溶液的制備取板藍(lán)清熱顆粒適量，研細(xì)，取6g或無糖型3g，置具塞錐形瓶中，加入90％(g/ml)甲醇40-60ml，稱定重量，超聲處理30-60min，放冷，再稱定重量，用90％(g/ml)甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液20-30ml，蒸至近干，殘?jiān)?0％(g/ml)甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；(4)測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定以腺苷含量；(5)每袋板藍(lán)清熱顆粒含南板藍(lán)根以腺苷(C10H13N5O4)計(jì)，不得少于0.1mg；其中，“％(g/ml)”表示溶液每100ml中含有溶質(zhì)若干克。
全文摘要
本發(fā)明涉及中華人民共和國國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的藥物板藍(lán)清熱顆粒[WS-10001(ZD-0001)-2005]的質(zhì)量檢測方法。包括靛玉紅的薄層色譜鑒別方法、薄荷腦的薄層色譜鑒別方法、醇浸出物的檢測方法、腺苷的含量測定方法。本發(fā)明板藍(lán)清熱顆粒的質(zhì)量檢測方法，改進(jìn)了薄荷腦的薄層色譜定性鑒別方法，修訂了醇浸出物的限度，使其能夠更合理地控制其產(chǎn)品質(zhì)量，建立了制劑中腺苷的含量測定檢測方法，腺苷系水溶性成分，具有抗炎作用，是南板藍(lán)根的有效成分之一，性質(zhì)較為穩(wěn)定，選取其作為含量測定指標(biāo)能更準(zhǔn)確地控制成品的質(zhì)量，板藍(lán)清熱顆粒質(zhì)量控制方法的改進(jìn)保證了復(fù)方制劑較高的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)水平。
文檔編號G01N30/02GK101732406SQ20101010215
公開日2010年6月16日 申請日期2010年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月28日
發(fā)明者孫蓉, 朱敏 申請人:昆明中藥廠有限公司