R產(chǎn)物 DNA片段被容納在該P(yáng)CR室32里。
[0052] 然后將少量的PCR產(chǎn)物DNA片段裝載到該分離通道42內(nèi)的聚環(huán)氧乙烷凝膠52上。 為了實(shí)現(xiàn)這個目的，通過對插入該第一孔24，第二孔26，第三孔28和第四孔30中的電極48 施加合適的電壓，將該P(yáng)CR反應(yīng)產(chǎn)生的這些DNA片段電泳地迀移到該樣品傳送通道40和該 分離通道42的交叉點(diǎn)43處。
[0053] 例如，對該第二孔26可以施加一個持續(xù)15秒鐘的1000伏的正電壓同時該第一孔 24,第三孔28和第四孔30孔維持恒定0伏。
[0054] 然后將這些DNA片段在該分離通道42內(nèi)的聚環(huán)氧乙烷凝膠52中進(jìn)行電泳分離。 為了實(shí)現(xiàn)這個目的，對該第四孔30施加一個持續(xù)25分鐘的8500伏的正電壓同時該第三孔 28維持0伏，該第二孔26維持500伏并且該第一孔24維持1000伏。
[0055] 這些DNA片段從該交叉點(diǎn)43向該第四孔30移動。這些DNA片段可以通過已知方 法檢測，例如當(dāng)它們經(jīng)過該樣品分離通道42中的一個預(yù)定點(diǎn)時使用熒光測定法或者比色 法。例如，如圖3所示，當(dāng)這些DNA片段經(jīng)過一個分析區(qū)域56時可以對其進(jìn)行檢測，該分析 區(qū)域56被提供朝向相鄰于該第四孔30的該分離通道42的一個末端。
[0056] 上面描述的方法能以一種自動化方式容易地進(jìn)行，例如使用如圖3所示的檢測儀 器58。該檢測儀器58包含合適的電子設(shè)備（沒有顯示）用于以一種已知的方法向這些電 極48施加所需電壓（如上所述）。該檢測儀器58還包含一個微型控制器（沒有顯示）用 于以一種已知的方式控制向這些電極48施加所需電壓的時機(jī)。此外，該檢測儀器58還包 含檢測裝置，比如一個熒光計或者一個色度計，當(dāng)這些DNA片段經(jīng)過該微流體裝置10的分 析區(qū)域56時，該檢測裝置用于對這些DNA片段進(jìn)行檢測（如果適用的話結(jié)合至染料）。
[0057] 如圖3所示，該檢測儀器58具有一個上表面60,在該上表面60上放置該微流體裝 置10的下表面22。
[0058] 此外，該檢測儀器58具有第一固定標(biāo)粧62,第二固定標(biāo)粧63,第三固定標(biāo)粧64和 第四固定標(biāo)粧65,以及第一可移動標(biāo)粧66和第二可移動標(biāo)粧68。該第一可移動標(biāo)粧66可 以朝向或遠(yuǎn)離該第一固定標(biāo)粧62和第二固定標(biāo)粧63進(jìn)行移動，并且該第二可移動標(biāo)粧68 可以朝向或遠(yuǎn)離該第三固定標(biāo)粧64和第四固定標(biāo)粧65進(jìn)行移動。該第一可移動標(biāo)粧66在 該第一固定標(biāo)粧62和第二固定標(biāo)粧63方向上是彈簧負(fù)載的。該第二可移動標(biāo)粧68在該 第三固定標(biāo)粧64和第四固定標(biāo)粧65方向上是彈簧負(fù)載的。這些標(biāo)粧62,63,64,65,66和 68是被隔開的以便該微流體裝置10可以定位在如圖3所示的標(biāo)粧之間。該第一可移動標(biāo) 粧66將該微流體裝置10向該第一固定標(biāo)粧62和第二固定標(biāo)粧63推近。該第二可移動標(biāo) 粧68將該微流體裝置10向該第三固定標(biāo)粧64和第四固定標(biāo)粧65推近。
[0059] 以此方式，該微流體裝置10被精確的夾持在該檢測儀器58的上表面60上的一個 預(yù)定位置。該微流體裝置10僅會發(fā)生一個非常小的程度的位置變化。
[0060] 該檢測裝置（沒有顯示）是放置在該檢測儀器58上，以便當(dāng)該微流體裝置10像 如上所述被定位在標(biāo)粧62,63,64,65,66,68之間時能與其分析區(qū)域56對齊。
[0061] 為了檢測這些DNA片段，該檢測裝置發(fā)射出一種穿過該分析區(qū)域56的光束（或者 其他的電磁輻射）。該光束比該分離通道42的寬度要大。以此方式，當(dāng)該微流體裝置10被 定位在標(biāo)粧62,63,64,65,66,68之間時，其非常小的程度的位置變化不會影響通過該分析 區(qū)域56的DNA片段的檢測。
[0062] 許多優(yōu)勢會隨著如上所述的微流體裝置10和擴(kuò)增方法而產(chǎn)生。
[0063] 首先，該微流體裝置10和該操作方法不需要在該P(yáng)CR室32內(nèi)擴(kuò)增DNA前將核酸與 其他細(xì)胞成分分離（盡管如果該P(yáng)CR凝膠54的基質(zhì)濾出了較大的細(xì)胞碎片可以可任選地 進(jìn)行一些分離）。已知的不同的用于DNA擴(kuò)增的微流體裝置都使用單獨(dú)的DNA分離步驟來 將DNA與其他細(xì)胞成分分離開。除去這樣的一個分離步驟不僅簡化了微流體裝置的設(shè)計， 還簡化了擴(kuò)增方法，使得這種方法更適合于那些不熟練的操作員進(jìn)行自動化使用。
[0064] 第二，在上面所描述的微流體裝置10里，這些電極48是浸在一種導(dǎo)電緩沖液中， 該導(dǎo)電緩沖液轉(zhuǎn)而與該樣品傳送通道40中的凝膠50和樣品分離通道42中的凝膠52接觸。 這與直接將電極插入到這些凝膠本身中相比是有利的一因?yàn)樗倪M(jìn)了導(dǎo)電連接。當(dāng)一個電 極被插入到一種凝膠中時，該電極就會部分地與該凝膠本身（它通常是不導(dǎo)電的）接觸并 且部分地與該凝膠的基質(zhì)中的一種導(dǎo)電液體接觸。如此一種安排的總導(dǎo)電連接可能是不夠 的。
[0065] 應(yīng)當(dāng)理解的是，可以對上面給出的實(shí)例進(jìn)行很多的改變，而不偏離如權(quán)力要求所 定義的本發(fā)明的范圍。
[0066] 首先，不是像如上所述向該樣品收集孔34中添加一種裂解液，該P(yáng)CR凝膠54可以 包含一種裂解試劑。在這種情況下，全細(xì)胞進(jìn)入到該P(yáng)CR凝膠54里并且在該凝膠54里裂 解。
[0067] 該樣品不一定是一種口腔棉簽樣品。例如，該樣品可以是一種血液樣品。
[0068] 該微流體裝置10的幾何形狀和/或其結(jié)構(gòu)不一定如上所述。如所要求的那樣能 進(jìn)行本發(fā)明的任何微流體裝置都可以被使用。
[0069] 任何合適的PCR試劑可以被使用。
[0070] 在如上所述實(shí)例中，該P(yáng)CR反應(yīng)的所有必需試劑都被包含在該P(yáng)CR凝膠54的基質(zhì) 里。然而，情況并不一定如此。例如，該P(yáng)CR反應(yīng)的一些必需試劑可以結(jié)合在該P(yáng)CR凝膠54 中而其他的必需試劑可以在使用時添加。有待添加的任何試劑都可以被添加到一種裂解液 或者一種洗液中，該洗液用于將細(xì)胞洗進(jìn)該P(yáng)CR凝膠54里。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種系統(tǒng)，包括檢測儀器和一個微流體裝置，該檢測儀器具有檢測裝置并且該微流 體裝置具有一個分析區(qū)域，該檢測儀器具有至少一個固定的定位器以及對抗一種彈性偏置 力可移動的至少一個定位器，該微流體裝置是由該檢測儀器可夾持的，這是通過使這些定 位器與該微流體裝置相接觸并且使該至少一個被偏置的定位器將該微流體裝置推在該至 少一個固定的定位器上以便將該微流體裝置定位在相對于該檢測儀器的一個預(yù)定的位置 中，并且其中當(dāng)微流體裝置被如此夾持時，該檢測裝置以及該分析區(qū)域被相互定位成用于 在該分析區(qū)域上該檢測裝置的操作。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中該微流體裝置具有一個基底表面并且該檢測儀器 具有一個支持表面，當(dāng)該微流體裝置被如此夾持時該基底表面置于該支持表面上。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的系統(tǒng)，其中該微流體裝置具有安排在一個矩形 中的四個側(cè)邊緣，該檢測儀器具有至少兩個所述固定的定位器以及至少兩個所述彈性偏置 的定位器，并且其中當(dāng)該微流體裝置被如此夾持時，該至少兩個固定的定位器與這些側(cè)邊 緣中相鄰的兩個相接觸，而該至少兩個彈性偏置的定位器與這四個側(cè)邊緣的不同的相鄰的 兩個相接觸。4. 根據(jù)權(quán)利要求1到3中任一項(xiàng)所述的系統(tǒng)，其中該分析區(qū)域包括一個通道，在該通道 中使用由該檢測裝置發(fā)射的一個光束檢測一種分析物，該光束的寬度大于該通道的寬度， 其中當(dāng)該微流體裝置被該檢測儀器如此夾持時，該微流體裝置相對于該檢測儀器的位置變 化相對于該光束以及該通道的相對寬度是足夠的小，這樣使得所述位置變化不影響在所述 通道中對所述分析物的檢測。
【專利摘要】本發(fā)明涉及包括檢測儀器和微流體裝置的系統(tǒng)。提供了一種系統(tǒng)，包括檢測儀器和一個微流體裝置，該檢測儀器具有檢測裝置并且該微流體裝置具有一個分析區(qū)域，該檢測儀器具有至少一個固定的定位器以及對抗一種彈性偏置力可移動的至少一個定位器，該微流體裝置是由該檢測儀器可夾持的，這是通過使這些定位器與該微流體裝置相接觸并且使該至少一個被偏置的定位器將該微流體裝置推在該至少一個固定的定位器上以便將該微流體裝置定位在相對于該檢測儀器的一個預(yù)定的位置中，并且其中當(dāng)微流體裝置被如此夾持時，該檢測裝置以及該分析區(qū)域被相互定位成用于在該分析區(qū)域上該檢測裝置的操作。
【IPC分類】B01L3/00
【公開號】CN105080626
【申請?zhí)枴緾N201510454963
【發(fā)明人】斯蒂芬·約翰·哈斯韋爾, 科斯蒂·簡·肖, 彼得·多克爾
【申請人】赫爾大學(xué)
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2011年9月21日
【公告號】CA2811810A1, CN103189525A, EP2619323A1, US20130248366, WO2012038462A1