本發(fā)明屬于材料及藥物分析領(lǐng)域，具體涉及一種新型磁性納米材料及其在安奈格列汀藥物檢測(cè)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

由于生物體內(nèi)的藥物濃度，尤其是血清中的藥物濃度直接與藥效相關(guān)。因此，從臨床應(yīng)用和藥物安全性評(píng)價(jià)方面來(lái)說(shuō)，有必要建立一種簡(jiǎn)單、靈敏、準(zhǔn)確的檢測(cè)生物體液及藥物中安奈格列汀含量的分析方法。目前運(yùn)用廣泛的藥物分析方法有高效液相色譜法、薄層色譜法、離子交換色譜法等。目前很少有關(guān)于安奈格列汀含量測(cè)定方法的文獻(xiàn)報(bào)道，而用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定安奈格列汀含量的報(bào)道尚無(wú)。

在藥物分析中，對(duì)于樣品的分離富集即樣品的前處理起著關(guān)鍵性的作用。分離富集是使得待分析物從其基體中分離、萃取出來(lái)，同時(shí)達(dá)到濃縮藥物的目的，從而能夠?qū)崿F(xiàn)提高準(zhǔn)確度、靈敏度的效果。隨著時(shí)代的發(fā)展與進(jìn)步，目前分離富集技術(shù)得到了很大的發(fā)展。常用的分離富集方法有萃取，包括液液萃取(lle)、固相萃取(spe)、固相微萃取技術(shù)(spme)、液相微萃取技術(shù)(lpme)、分散液液微萃取技術(shù)(dllme)等等。在對(duì)生物體液進(jìn)行測(cè)定時(shí)，因?yàn)轶w液中成分復(fù)雜，不易分離形成干擾，且待測(cè)定的藥物含量一般都很低，所以樣品的分離富集顯得格外重要。采取合理高效的分離富集技術(shù)將低含量的待測(cè)藥物從復(fù)雜的生物基體中分離提取出來(lái)，用于快速、準(zhǔn)確的進(jìn)行定量分析，是體內(nèi)藥物分析的重要內(nèi)容。鑒于各種分離技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)，目前對(duì)于固相萃取技術(shù)有著很大改善，例如磁性固相萃取技術(shù)。最早發(fā)展起來(lái)的固相萃取法(spe)又叫液固萃取法，是從20世紀(jì)70年代初發(fā)展起來(lái)的一種樣品分離富集技術(shù)。而磁性固相萃取是以spe為基礎(chǔ)而發(fā)展起來(lái)的一種新型、環(huán)境友好的樣品前處理分析技術(shù)，利用磁性納米材料的吸附作用更高效地萃取分析物。磁性納米材料因結(jié)合了磁響應(yīng)性和納米粒子的雙重特點(diǎn)，故而可作為磁性固相萃取的吸附劑。與傳統(tǒng)的樣品預(yù)處理技術(shù)如固相萃取法、溶劑萃取法、超聲提取法等相比，磁性固相萃取法的運(yùn)用在極大程度上簡(jiǎn)化了樣品前處理的過(guò)程，并極易實(shí)現(xiàn)相的分離。

磁性載體技術(shù)(mct)首先由robinson等人報(bào)道。在1973年，微(或納米)磁性載體的合成已經(jīng)引起了廣泛的興趣。mct的獨(dú)特而引人注目的特性是磁性納米顆?？梢酝ㄟ^(guò)施加外部磁場(chǎng)容易地從樣品溶液中分離出來(lái)。這些顆粒是超順磁性的，這意味著它們可以容易地被磁體吸引，但是在場(chǎng)被去除后不能保持磁性。該特性使得它們特別適用于樣品制備，因?yàn)榕c非磁性吸附劑相比，在萃取后不需要離心或過(guò)濾樣品。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4)，其特征在于其制備方法包括如下步驟：

(1)取適量的蒸餾水，加入c70富勒烯、七水合硫酸亞鐵、無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)饣驓鍤鈹嚢?5-20分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；

(2)將步驟(1)得到的黑色固體用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12-24h得到黑色固體粉末，即為磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4)。

步驟(1)中蒸餾水、c70富勒烯、七水合硫酸亞鐵、無(wú)水氯化鐵、氨水的用量為每100ml蒸餾水中加入0.1mmolc70富勒烯、0.2mmol七水合硫酸亞鐵、0.4mmol無(wú)水氯化鐵、3-5ml氨水；所述蒸餾水優(yōu)選經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

本發(fā)明提供上述磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4)的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)取適量的蒸餾水，加入c70富勒烯、七水合硫酸亞鐵、無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)饣驓鍤鈹嚢?5-20分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；

(2)將步驟(1)得到的黑色固體用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12-24h得到黑色固體粉末，即為磁性c70富勒烯納米材料。

步驟(1)中蒸餾水、c70富勒烯、七水合硫酸亞鐵、無(wú)水氯化鐵、氨水的用量為每100ml蒸餾水中加入0.1mmolc70富勒烯、0.2mmol七水合硫酸亞鐵、0.4mmol無(wú)水氯化鐵、3-5ml氨水；所述蒸餾水優(yōu)選經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

本發(fā)明的另一實(shí)施方案中上述磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4)在安奈格列汀藥物檢測(cè)中的應(yīng)用。c70-fe3o4作為固相萃取吸附劑發(fā)揮作用。

磁性c70富勒烯納米材料c70-fe3o4在檢測(cè)樣品中安奈格列汀藥物濃度中用途，其特征在于包括如下步驟：

(1)萃?。涸?0.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、適量的待測(cè)樣品溶液、10-20mgc70-fe3o4，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離c70-fe3o4，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)；

(2)洗脫：將步驟(1)用磁鐵吸附分離得到的c70-fe3o4置于離心管中，加入無(wú)水乙醇，定容，搖勻，在室溫下，振蕩20-30min，靜置后，用磁鐵吸附分離使c70-fe3o4沉降，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)。

本發(fā)明的另一實(shí)施方案提供上述磁性c70富勒烯納米材料c70-fe3o4在制備固相萃取吸附劑中的應(yīng)用，尤其是在制備用于檢測(cè)安奈格列汀藥物的固相萃取吸附劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明所述的定容是指加溶劑(無(wú)水乙醇)至刻度(離心管)。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：①首次制備磁性c70富勒烯納米材料c70-fe3o4作為固相萃取吸附劑用于安奈格列汀藥物的檢測(cè)，c70-fe3o4較一般磁性固相萃取吸附劑，具有對(duì)安奈格列汀吸附性強(qiáng)，且易洗脫的特點(diǎn)；②本發(fā)明制備得到的c70-fe3o4粒徑在5-8nm，利用c70的籠狀結(jié)構(gòu)可以與安奈格列汀藥物充分接觸，形成π-π共軛體系、氫鍵等。

附圖說(shuō)明

圖1實(shí)施例1制備的磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4)的tem圖

圖2安奈格列汀濃度與吸光度的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

具體實(shí)施方式

為了便于對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，下面提供的實(shí)施例對(duì)其做了更詳細(xì)的說(shuō)明。但是這些實(shí)施例僅供更好的理解發(fā)明而并非用來(lái)限定本發(fā)明的范圍或?qū)嵤┰瓌t，本發(fā)明的實(shí)施方式不限于以下內(nèi)容。

實(shí)施例1

取200ml蒸餾水，加入0.2mmolc70富勒烯，0.4mmol七水合硫酸亞鐵，0.8mmol無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)鈹嚢?5分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水(6ml)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12h得到黑色固體粉末，即為磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4，圖1，以下簡(jiǎn)稱(chēng)產(chǎn)品a)；本實(shí)施例中使用的蒸餾水為經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

實(shí)施例2

取100ml蒸餾水，加入0.1mmolc70富勒烯，0.2mmol七水合硫酸亞鐵，0.4mmol無(wú)水氯化鐵，通入氬氣攪拌20分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水(5ml)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥24h得到黑色固體粉末，即為磁性c70富勒烯納米材料(簡(jiǎn)寫(xiě)為c70-fe3o4，sem圖與圖1一致，以下簡(jiǎn)稱(chēng)產(chǎn)品b)；本實(shí)施例中使用的蒸餾水為經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

實(shí)施例3

取200ml蒸餾水，加入0.2mmol石墨烯，0.4mmol七水合硫酸亞鐵，0.8mmol無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)鈹嚢?5分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水(6ml)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12h得到黑色固體粉末，即為磁性石墨烯材料(以下簡(jiǎn)稱(chēng)產(chǎn)品c)；本實(shí)施例中使用的蒸餾水為經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

實(shí)施例4

取200ml蒸餾水，加入0.4mmol七水合硫酸亞鐵，0.8mmol無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)鈹嚢?5分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水(6ml)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12h得到黑色固體粉末，即為磁性fe3o4材料(以下簡(jiǎn)稱(chēng)產(chǎn)品d)；本實(shí)施例中使用的蒸餾水為經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

實(shí)施例5

取200ml蒸餾水，加入0.4mmolc70富勒烯，0.4mmol七水合硫酸亞鐵，0.8mmol無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)鈹嚢?5分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水(6ml)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12h得到黑色固體粉末，即為磁性c70富勒烯納米材料(以下簡(jiǎn)稱(chēng)產(chǎn)品e)；本實(shí)施例中使用的蒸餾水為經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

實(shí)施例6

取200ml蒸餾水，加入0.1mmolc70富勒烯，0.4mmol七水合硫酸亞鐵，0.8mmol無(wú)水氯化鐵，通入氮?dú)鈹嚢?5分鐘后，加熱至回流溫度，保持回流20-30分鐘后，降溫至85-90℃，維持該溫度(85-90℃)滴加氨水(6ml)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)1-1.5h，反應(yīng)液呈黑色渾濁狀態(tài)，自然降至室溫，靜置0.5h后，用磁鐵吸附分離，得到黑色固體；用蒸餾水洗3-5次后，于60℃真空干燥12h得到黑色固體粉末，即為磁性c70富勒烯納米材料(以下簡(jiǎn)稱(chēng)產(chǎn)品f)；本實(shí)施例中使用的蒸餾水為經(jīng)過(guò)超聲后的蒸餾水。

實(shí)施例7標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

試劑

安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)品(含量＞99.7％)和藥片(規(guī)格：100mg/片)由江蘇聯(lián)環(huán)藥業(yè)股份有限公司提供；甲醇、乙醇、氨水、三水合乙酸鈉、冰醋酸購(gòu)買(mǎi)于國(guó)藥集團(tuán)。實(shí)驗(yàn)中所有水為高純水，試劑均為分析純。

安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)：用分析天平準(zhǔn)確稱(chēng)取0.010g安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)品，用蒸餾水溶解定容至100ml，置于涼暗處保存。

ph3.0緩沖溶液：稱(chēng)取0.80g三水合乙酸鈉，用水溶解，加入5.4ml冰醋酸，用水稀釋到500ml，于酸度計(jì)上調(diào)節(jié)ph為3.0。

儀器

shimadzuuv-1780分光光度計(jì)(uv-visspectrophotometer)(島津儀器蘇州有限公司)，離心機(jī)tdl80-2b(上海安亭科學(xué)儀器廠)；數(shù)顯恒溫水浴鍋(國(guó)華電器有限公司)；真空干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司)；dgg-9030b型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；phs-25型ph計(jì)(上海精科雷磁)；五方kq-50e超聲波清洗器。

樣品制備

安奈格列汀藥片樣的制備：取安奈格列汀藥片研磨成粉末，準(zhǔn)確稱(chēng)重相當(dāng)于1片藥物的粉末，加入到100ml容量瓶中，加入50ml蒸餾水超聲溶解，使得藥片全部溶解后均勻分散成渾濁液，然后用蒸餾水定容至100ml，用0.45μm濾膜過(guò)濾，取濾液于一干燥潔凈燒杯中，用移液管量取5ml濾液于另一50ml容量瓶中，用蒸餾水定容后振蕩搖勻。

人血清樣的制備：取健康自愿者的血清，加入適量安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液后，按1:4的比例加入甲醇去除血清中的蛋白，4000r/min離心分離15min，取上清液分析。

標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

以吸光度數(shù)值對(duì)相應(yīng)的安奈格列汀濃度繪制曲線(圖2)，所測(cè)定的分析性能參數(shù)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知，線性范圍為0.10-2.5μg/ml，檢測(cè)限為0.0926μg/ml。

表1分析方法的線性參數(shù)和檢測(cè)限

實(shí)施例8

例1

(1)萃?。涸?0.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、20μl安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)、10mg實(shí)施例1制備的產(chǎn)品a，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離萃取吸附劑c70-fe3o4，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果低于工作曲線的檢測(cè)下限，即安奈格列汀幾乎全被c70-fe3o4吸附。

(2)洗脫：將步驟(1)用磁鐵吸附分離得到的萃取吸附劑c70-fe3o4置于5ml離心管中，加入無(wú)水乙醇，定容，搖勻，在室溫下，振蕩20-30min，靜置后，用磁鐵吸附分離使c70-fe3o4沉降，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果換算為0.3931μg/ml(理論值為0.40μg/ml)。

例2

(1)萃取：在10.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、20μl安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)、20mg實(shí)施例2制備的產(chǎn)品b，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離萃取吸附劑c70-fe3o4，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果低于工作曲線的檢測(cè)下限，即安奈格列汀幾乎全被c70-fe3o4吸附。

(2)洗脫：將步驟(1)用磁鐵吸附分離得到的萃取吸附劑c70-fe3o4置于5ml離心管中，加入無(wú)水乙醇，定容，搖勻，在室溫下，振蕩20-30min，靜置后，用磁鐵吸附分離使c70-fe3o4沉降，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果換算為0.3929μg/ml(理論值為0.40μg/ml)。

例3

萃?。涸?0.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、20μl安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)、10mg實(shí)施例3制備的產(chǎn)品c，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離萃取吸附劑，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果換算為0.1654μg/ml，說(shuō)明產(chǎn)品c對(duì)安奈格列汀的吸附效果一般，不適合用于安奈格列汀藥物檢測(cè)中的固相萃取吸附劑。

例4

萃?。涸?0.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、20μl安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)、10mg實(shí)施例4制備的產(chǎn)品d，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離萃取吸附劑，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果換算為0.2218μg/ml，說(shuō)明產(chǎn)品d對(duì)安奈格列汀的吸附效果一般，不適合用于安奈格列汀藥物檢測(cè)中的固相萃取吸附劑。

例5

(1)萃?。涸?0.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、20μl安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)、10mg實(shí)施例5制備的產(chǎn)品e，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離萃取吸附劑c70-fe3o4，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果低于工作曲線的檢測(cè)下限，即安奈格列汀幾乎全被c70-fe3o4吸附。

(2)洗脫：將步驟(1)用磁鐵吸附分離得到的萃取吸附劑c70-fe3o4置于5ml容量瓶中，加入無(wú)水乙醇，定容，搖勻，在室溫下，振蕩20-30min，靜置后，用磁鐵吸附分離使c70-fe3o4沉降，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果換算為0.3288μg/ml(理論值為0.40μg/ml)。說(shuō)明產(chǎn)品e吸附效果較好，但其洗脫解吸附效果不理想，不適合用于安奈格列汀藥物檢測(cè)中的固相萃取吸附劑。

例6

(1)萃取：在10.0ml離心管中，分別加入1.0mlph3.0醋酸-醋酸鈉(hac-naac)緩沖溶液、20μl安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.10mg/ml)、10mg實(shí)施例6制備的產(chǎn)品f，用蒸餾水稀釋至10ml，搖勻，在室溫下振蕩10-15min，靜置后，用磁鐵吸附分離萃取吸附劑c70-fe3o4，待上層溶液澄清透明后，取上清液用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果換算為0.1258μg/ml，說(shuō)明產(chǎn)品f對(duì)安奈格列汀的吸附效果不理想，不適合用于安奈格列汀藥物檢測(cè)中的固相萃取吸附劑。

實(shí)施例9

本發(fā)明利用實(shí)施例7制作的安奈格列汀濃度與吸光度的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)樣品中安奈格列汀濃度的精密度與重現(xiàn)性、準(zhǔn)確度與回收率的考察。

精密度與重現(xiàn)性

分別配制濃度為0.40、0.80μg/ml兩種濃度的安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液，日內(nèi)精密度是同一天對(duì)同一濃度的樣品連續(xù)分析5次，計(jì)算精密度，結(jié)果顯示rsd為0.07％～0.21％，表示方法的重現(xiàn)性較好，該方法可用于日常分析。

在本實(shí)驗(yàn)中，用工作曲線法對(duì)安奈格列汀藥片進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果為101.5mg/片，與標(biāo)示量100mg/片無(wú)顯著性差異。

準(zhǔn)確度與回收率

本實(shí)驗(yàn)中利用加標(biāo)實(shí)驗(yàn)的方法測(cè)定回收率，并評(píng)價(jià)了方法的準(zhǔn)確度。相對(duì)回收率計(jì)算如下：

式中creal、cadded、cfound分別是實(shí)際樣品中測(cè)定出的安奈格列汀濃度、加入到樣品中安奈格列汀標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度、加了標(biāo)準(zhǔn)品后測(cè)定出的樣品中安奈格列汀濃度。實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果如表2所示。藥品中回收率為96.8％～102.3％，人血清中回收率為96.8％～100.9％，說(shuō)明方法的準(zhǔn)確性較好，可用于藥品中安奈格列汀含量的測(cè)定。

表2回收率實(shí)驗(yàn)

可見(jiàn)，本發(fā)明利用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)樣品中安奈格列汀濃度的方法，精密度高、重現(xiàn)性好，實(shí)施例8中檢測(cè)結(jié)果可信。