專利名稱:干燥保存液體樣品的方法和裝置的制作方法
技術領域:
本發(fā)明涉及一種以多孔材料為基礎的液體樣品的干燥保存方法,特別是生物樣品的干燥保存方法。本發(fā)明還涉及用于液體樣品干燥、保存的裝置。
背景技術:
科學研究中的生物樣品采集、保存、運輸、重組、回收是進行各種實驗科學研究、醫(yī)學臨床各種指標檢測的先決條件。液體生物樣品是生命科學研究中最為廣泛采用的生物樣品形式,如何使用最為簡便經(jīng)濟有效的方法保持原樣品內(nèi)容物的有效活性(包括結合活性和生物活性)、完整性(如細胞和其它有形成分)、樣品重組回收后其濃度的準確性以及生物樣品處理全過程中的安全性是生物學、醫(yī)學、醫(yī)藥、生物技術領域需要解決的基本問題之一。多年來,科學工作者們?yōu)榇俗鞒隽瞬恍傅氐呐Α?br>
目前,液體樣品的保存方法主要分為液態(tài)低溫保存(攝氏2-8度);冷凍保存(攝氏-20~-200度);冷凍(攝氏-60度以下)干燥保存;低溫干燥保存(攝氏2-8度);和常溫干燥保存(攝氏10~30度或環(huán)境溫度)。
現(xiàn)存的上述方法各自存在不同的缺點例如常溫環(huán)境中容易導致生物液體樣品所含成分在短期內(nèi)迅速降解或細菌霉菌繁殖等造成原始液體樣品性質的改變;低溫環(huán)境中液體樣品不宜作長期保存;冷凍液體樣品保存需低溫冰箱持續(xù)使溫度保持在攝氏0溫以下,給樣品運輸帶來不便;冷凍干燥液體樣品雖然可獲得滿意的樣品回收效率,但其造價過高而不適于單個或小批量液體樣品的處理;目前的常溫干燥樣品保存方法雖然解決了液體樣品的干燥保存運輸問題,但在樣品液體回收、重組和后續(xù)分析處理時存在很多缺陷。
Robert Guthrie于1963年首次利用Schleicher & Schuell Bioscience公司(S&S公司)的903濾膜(后稱Guthrie Card)收集新生兒血樣進行PKU篩查以來,該濾膜已廣泛應用生物液體樣品的干燥保存。但由于該樣品吸收基質為纖維素構成,當吸收液體樣品如血液經(jīng)干燥后行成一種纖維/樣品實體結構,給液體樣品的重組和回收造成很大困難,使其應用范圍受到很大限制。綜合起來,這種以纖維素膜作為液體樣品吸收基質的主要缺點是樣品重組費時,一般至少需30分鐘至數(shù)小時,并需加熱處理以促進樣品復溶;回收效率低,由于干燥后形成的樣品纖維素膜基質為-無間隙實質結構,故極難以再次使干燥樣品水化;且纖維素膜對樣品成分的吸收和吸附作用造成低回收率,其最佳回收率在短時間內(nèi)低于50%。
另外,對干燥后生物血液中的細胞成分回收是進行細胞學研究的必要前提。Joseph(USA;Pat.No.5432,097)于1993年描述了利用酶學消化纖維素膜(Guthrie Card)方法進行干燥血液的白細胞回收。但該方法程序需要用用纖維素酶降解纖維素膜,因此費時、成本高。
因此,本領域需要一種簡便、快速、而且樣品回收率高的液體樣品干燥保存方法。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種液體樣品的干燥保存方法,其包括將所述液體樣品與一種平均孔徑為0.01mm到5mm的多孔固體載體相接觸;和從吸收了液體樣品的固體載體中除去液體成分;其中干燥后固體載體的孔隙率為固體載體原孔隙率的至少20%。
根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案,所述多孔固體載體是由選自下組的一種或多種材料構成的聚合物材料、經(jīng)化學處理或未處理的生物來源的材料、金屬材料和無機非金屬材料。
根據(jù)本發(fā)明的另一實施方案,所述液體樣品是生物體液、人工配制的生物液體樣品或液體生物試劑。
本發(fā)明還提供一種用于干燥保存液體樣品的裝置,其包括一種平均孔徑為0.01mm到5mm的、載樣并干燥后仍保留原孔隙率至少20%的多孔固體載體。
按照本發(fā)明的方法和裝置,可以實現(xiàn)液體樣品的快速、簡便的干燥保存,而且與現(xiàn)有技術方法相比可以快速、高效地回收樣品。
下面結合附圖和具體實施例詳細描述本發(fā)明。
圖1是顯示利用本發(fā)明的方法進行血液樣品干燥、保存和回收、重構過程的示意圖。圖1A-D分別表示未加樣之前的多孔固體載體、吸收液體樣品(全血)后的多孔固體載體、脫水后的載樣固體載體和血液樣品的重構。
圖2是從按本發(fā)明方法保存的血樣所回收基因組DNA的電泳圖。圖中,M為分子量標志;“1-4”分別為從4份干燥保存在本發(fā)明固體載體上的血樣提取的DNA。每個樣品的上樣量為1微克(DNA)。
具體實施例方式
本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過廣泛的研究,發(fā)現(xiàn)利用大孔的多孔固體載體不僅可以快速吸收、干燥液體樣品,而且干燥的樣品容易從載體上用水或其他溶劑洗脫下來,從而快速、高效地回收、重構樣品。
因此,本發(fā)明提供一種液體樣品的干燥保存方法,其包括將所述液體樣品與一種平均孔徑為約0.01mm到約5mm大孔的多孔固體載體相接觸;和從吸收了液體樣品的固體載體中除去液體成分;其中干燥后固體載體的孔隙率為固體載體原孔隙率的至少20%。
本發(fā)明方法中,所用多孔固體載體的平均孔徑優(yōu)選為約0.05mm到約1mm之間,更優(yōu)選在約0.1mm到約0.5mm之間。
在本發(fā)明的方法中,所述多孔固體載體在加樣并干燥后的孔隙率優(yōu)選保持原孔隙率的至少約30%,更優(yōu)選至少約40%,最優(yōu)選至少約50%。
本發(fā)明中的多孔固體載體可以是任何材料制成的,例如選自下組的一種或多種材料聚合物材料、經(jīng)化學處理或未處理的生物來源的材料的材料、金屬材料和無機非金屬材料。在一個優(yōu)選的實施方案中,本發(fā)明的多孔固體材料是聚合物材料。
本發(fā)明的多孔固體載體可以是單一的整體材料。該材料經(jīng)過其制備工藝形成多個表面開孔,或者該材料天然具有多個表面開孔。
本發(fā)明的多孔固體載體也可以是由各種形狀的多個單元通過物理或化學方法固定排列形成的具有多個表面開孔的固體材料。構成這種固體材料的單元本身可以具有多孔結構或沒有多孔結構。固定排列這種單元的方法是本領域技術人員已知的,例如機械連接、粘合、編織等。
本發(fā)明的多孔固體載體具有一定的硬度,以避免承載液體后,由于液體重力作用或干燥過程使多孔結構發(fā)生塌陷,導致干燥后載樣固體載體的孔隙率低于載體原孔隙率的20%,不利于樣品的重構。
本發(fā)明的聚合物材料可以是非生物相容性和/或生物可降解性的,也可以是生物相容性和/或生物可降解的。處于環(huán)保的考慮和對于活細胞、微生物樣品的保存,優(yōu)選本發(fā)明的聚合物材料是生物相容性和/或生物可降解的。
生物相容性和/或生物可降解性聚合物材料的例子有羥基羧酸酯,如聚(3-羥基丁酸酯)(PHB)、3-羥基丁酸酯與3-羥基己酸酯共聚物(PHB-HH)、聚乳酸(PLA)、乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、聚己內(nèi)酯;聚原酸酯、聚酸酐等。對于血液相容性而言,具有優(yōu)良抗凝血性的聚合物材料例如有親水性材料如聚甲基丙烯酸β-羥乙酯、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酰胺和聚乙烯基吡咯烷酮;疏水性材料如硅橡膠;具有微相分離結構表面的高分子材料如聚醚氨酯;和帶負電荷表面的材料如表面蒸鍍平滑碳膜的滌綸和泡沫狀聚四氟乙烯。
非生物可降解性材料的例子有聚醋酸乙烯酯、聚乙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚氨酯、聚碳酸酯等。
所述多孔聚合物材料可以按現(xiàn)有技術方法方便地獲得,例如通過聚合物發(fā)泡等方法。所述多孔聚合物材料的孔徑也可以按常規(guī)方法來控制,從而獲得適于具體應用的多孔材料。
本領域技術人員已知,幾乎所有的熱固性和熱塑性樹脂都能制成泡沫聚合物,即多孔聚合物材料。經(jīng)常用于制備多孔聚合物材料的聚合物有聚苯乙烯、聚氨酯、聚氯乙烯、聚乙烯、脲甲醛樹脂、酚醛樹脂等。
用于使聚合物產(chǎn)生多孔結構的發(fā)泡方法包括機械發(fā)泡、物理發(fā)泡、化學發(fā)泡等。
機械發(fā)泡是借機械攪拌方法使氣體混入液體聚合物原料中,然后經(jīng)過定型過程形成泡孔。機械發(fā)泡方法可以用于脲甲醛樹脂、聚乙烯醇縮甲醛、聚乙酸乙烯、聚氯乙烯溶膠等。
物理發(fā)泡法是利用發(fā)泡劑的物理狀態(tài)變化在聚合物材料中產(chǎn)生氣孔。物理發(fā)泡劑包括壓縮氣體、揮發(fā)性液體以及可溶性固體。壓縮性氣體如氮氣、二氧化碳等在壓力降低時體積膨脹產(chǎn)生氣孔。揮發(fā)性液體經(jīng)汽化產(chǎn)生氣孔,例如低沸的脂肪烴、鹵代脂肪烴和低沸點的醇、醚、酮和芳香烴等??扇苄怨腆w通過溶解被除去后在聚合物制品中產(chǎn)生氣孔,例如水溶性的無機鹽、水溶性的聚合物以及淀粉等。例如一氯甲烷和二氯甲烷常用于制造泡沫聚苯乙烯,而氟代烴用來制造多種泡沫塑料,例如泡沫聚乙烯、泡沫聚苯乙烯、軟質和硬質聚氨酯泡沫、脲醛泡沫和酚醛泡沫等。
化學發(fā)泡法是加入聚合物溶體的化學發(fā)泡劑因發(fā)生化學變化或在一定溫度下熱分解而產(chǎn)生一種或多種氣體,從而在聚合物制品中產(chǎn)生氣孔?;瘜W發(fā)泡劑包括無機發(fā)泡劑和有機發(fā)泡劑兩類。無機發(fā)泡劑主要包括碳酸銨、碳酸氫銨和碳酸氫鈉等。有機發(fā)泡劑主要包括亞硝基化合物、偶氮化合物、磺酰肼類和尿素衍生物等。
例如CN 1117587C號中國專利中公開了一種利用無機鹽物理發(fā)泡劑制備多孔聚合物材料的方法。該方法包括將聚乳酸等聚合物溶于溶劑如氯仿或二噁烷中,然后將粒徑相當于預定孔徑的發(fā)泡劑如氯化鈉、氯化鉀等加入聚合物溶液中。再將混合物加入到模具中,經(jīng)干燥、脫膜,將制品浸入去離子水中一段時間。將浸泡后的制品干燥獲得多孔聚合物材料。根據(jù)該文獻的描述,可以制得孔徑為50-500微米的多孔材料。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中,構成多孔固體載體的聚合物材料是通過發(fā)泡法制得的開孔聚合物泡沫,包括海綿樣聚合物材料。
本發(fā)明中的多孔固體載體優(yōu)選具有30%以上的孔隙率,更優(yōu)選40%、50%、60%、70%、甚至80%以上的孔隙率。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中,所述多孔固體載體是一種吸水性泡沫聚合物。吸水性泡沫聚合物可以按常規(guī)方法使用高親水性的多元醇制得。例如按以下配方可制得一種聚酯型快速吸水泡沫塑料己二酸二乙二醇酯100份(重量,下同)、TDI-80 46份、乙氧基單油酸酯6份、胺催化劑1.1份、泡沫穩(wěn)定劑0.5份和水3.5份。
本發(fā)明的多孔金屬材料包括粉末冶金多孔材料、燒結金屬纖維多孔材料、燒結金屬絲網(wǎng)多孔材料和泡沫金屬材料等。制造泡沫金屬的金屬選自Al、Cu、Ni、Fe、Mg、Zn、Pb、Sn、Ag、Cr、Mo、Co等及其合金。
粉末冶金多孔材料是以金屬粉末為原料,經(jīng)過成形、燒結等過程制成的多孔材料。制造粉末冶金多孔材料的金屬粉末可以用不規(guī)則形狀的粉末,也可以用近似球形的粉末。
燒結金屬纖維多孔材料是用金屬纖維經(jīng)過成形、燒結等工藝制成的多孔材料。
燒結金屬絲網(wǎng)多孔材料是用單層或多層金屬絲網(wǎng)通過軋制、燒結(真空或氣氛)或熱壓等工藝方法制備出的整體多孔材料。金屬絲網(wǎng)可以編織成平紋方孔網(wǎng)(Plain Weave)、斜紋方孔網(wǎng)(Twill Weave)、平紋席型網(wǎng)(Plain Dutch Weave)、斜紋席型網(wǎng)(Dutch Twill Weave)等。
泡沫金屬指孔隙率較高、孔徑較大、孔隙間相互連通的輕質多孔金屬。泡沫金屬的結構有骨架狀結構、薄膜組成的蜂窩狀結構等。制造泡沫金屬的常用方法有熔融金屬發(fā)泡法、金屬粉漿發(fā)泡法、浸滲粉漿燒結法和電鑄法等。
本發(fā)明的無機非金屬材料包括由陶瓷、玻璃、水泥和耐火材料等通過本領域的常規(guī)方法制成的多孔材料,其中無機非金屬材料的化學組成包括硅酸鹽、其它含氧酸鹽、氧化物、氮化物、碳與碳化物、硼化物、氟化物、硫系化合物、硅、鍺、III-V和II-VI族化合物等。
例如,多孔陶瓷是經(jīng)高溫燒成、體內(nèi)具有大量彼此相通并與材料表面也貫通的孔道結構的陶瓷材料。由陶瓷材料形成多孔陶瓷的方法包括通過骨料顆粒的堆積、粘結形成多孔陶瓷;利用某些外加劑在高溫下燃盡或揮發(fā)而在陶瓷體中留下孔隙;利用材料的熱分解、相變、離析形成孔隙;利用可燃盡的多孔載體吸附陶瓷料漿,之后,在高溫下燃盡載體材料而形成孔隙結構。
本發(fā)明多孔固體載體的孔隙率可以按本領域的常規(guī)方法測定。例如,間接測量孔隙率的方法是測量密度的方法,通過公式ϵ=(1-ρbρs)×100%]]>來表示,ε為材料的孔隙率,ρb為多孔材料總體積的平均密度,ρs為材料中固體部分的密度。
本發(fā)明的多孔固體載體可以不經(jīng)任何處理,直接使用。但為了防止污染樣品,優(yōu)選用水、清潔劑水溶液清洗,或用酸或堿溶液浸泡。例如所用酸性溶液的PH在5.0以下,而堿性溶液的PH在8.0以上。用酸或堿處理后的固體載體可用水繼續(xù)清洗,以去除殘余的酸或堿成分。也可以視情況,在用酸或堿處理后不清洗,使固體載體仍然保持在酸或堿環(huán)境中直至脫水干燥。
根據(jù)具體應用目的的不同,本發(fā)明的多孔固體載體可以是經(jīng)過下列一種或多種方法特殊處理的。
對多孔固體載體進行加熱處理;高壓滅菌處理;紫外線照射;放射性照射;防腐劑類處理;抗菌素類處理;抗霉菌素類處理;有機溶劑類處理,有機溶劑的例子有乙醇、異丙醇、丙酮、氯仿、酚類、醚類等;去垢劑類處理,去垢劑的例子有吐溫(Tween-20、Tween-100)、十二烷基硫酸鈉(SDS)等;抗凝血劑類處理,抗凝血劑的例子有肝素、枸櫞酸鈉(鹽)、乙二胺四乙酸(EDTA)等。
例如可以用含蛋白的液體封閉多孔固體載體內(nèi)外表面的蛋白結合位點,防止樣品中蛋白分子的吸附導致樣品回收效率的下降。
再例如,可以通過化學方法在多孔固體載體的內(nèi)外表面上聯(lián)結各種化學基團以利于吸附液體樣品中的內(nèi)含物,例如氨基、羧基、羥基、烷基或其它化學基團。
還可能通過物理或化學方法在載體上包被或聯(lián)結適當?shù)姆肿尤绺鞣N蛋白分子、核酸分子、酸酸底物等,借以特異性或非特異性地捕獲樣品中所含的相應成分。
本發(fā)明中的液體樣品定義為任何以液體狀態(tài)存在的在水性或非水性溶劑中含有待保存物質的混合物。所述樣品混合物可以是溶液、懸浮液、乳液或其他任何液體形式。
例如本發(fā)明的液體樣品可以是生理或病理性生物體液血液、汗液、尿液、腦脊液、脊髓液、關節(jié)腔液、陰道分泌液體、精液、血漿、血清、羊水、乳汁、胸腔液、腹腔液、骨髓液、唾液、膽汁、淚液等其他生物體在正常生理狀態(tài)和疾病狀態(tài)下所產(chǎn)生的任何液體。
本發(fā)明的液體樣品也可以是經(jīng)人工配制而成的液體樣品,例如含細菌、霉菌、真菌、寄生蟲等的液體,各種生物組織的液態(tài)提取物如生物各種細胞或/和組織提取物(心、肝、脾、肺、腎等的液體提取物)和各種植物細胞的液體提取物等。
本發(fā)明的液體樣品還可以是含有固體溶質的液體試劑,如各種緩沖液以及由其配制的液體。由所述液體試劑配制的液體例如為含蛋白質、核酸、細胞、血小板、細菌、質粒、病毒顆粒、寄生蟲、精液、陰道分泌物等的液體。
在利用本發(fā)明的方法進行液體樣品干燥保存的過程中,可以加入能夠提高生物活性物質耐受干燥和提高保存能力的保護劑。這樣的保護劑是本領域技術人員已知的。例如多元醇,如葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、木酮糖、核糖、甘露糖、果糖、棉子糖、海藻糖等糖類;山梨糖醇等糖衍生物;合成聚合物,如聚乙二醇、羥乙基淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺;多聚糖如聚蔗糖和葡聚糖;蛋白質;以及上述物質的組合。
對于血小板的保存,例如可以加入的保護劑的例子有血清蛋白、酪蛋白水解物、聚乙烯基吡咯烷酮和羥乙基淀粉。
對于核酸如RNA、DNA、寡核苷酸等的保存,可以加入SDS、胍、Tween等。
在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施方案中,所述液體樣品是人或動物的全血樣品或血液成分的樣品。
液體樣品加入固體載體后的脫水干燥可在自然室溫蒸發(fā)條件下進行,也可加熱(如在攝氏37度的烘箱內(nèi))、熱風(如吹風機)、減壓條件下加速液體樣品的液體成分的去除形成干燥樣品。
如上所述,本發(fā)明還提供一種用于干燥保存液體樣品的裝置,其包括一種大孔的多孔固體載體。上述關于本發(fā)明方法的描述和優(yōu)選條件同樣適用于本發(fā)明的裝置。
在本發(fā)明的裝置中,多孔固體載體可以呈與其支持部件相適應的任何形狀,例如片狀、圓柱形、立方體形、球形等。
按照本發(fā)明吸收干燥的樣品易于通過洗滌、離心等常規(guī)操作從固體載體中回收,并重構液體樣品。重構的液體樣品可用于樣品內(nèi)含物的檢測、提純等后續(xù)操作和應用,例如各種蛋白、離子、維生素、抗原、抗體、細胞、核酸等的檢測和純化。
按照本發(fā)明方法,樣品內(nèi)含物的回收快,回收率高。例如樣品的回收操作可以在數(shù)秒到數(shù)分鐘的時間內(nèi)完成。按照本發(fā)明干燥保存的樣品,回收率可以達到至少約70%,優(yōu)選至少80%,更優(yōu)選至少90%,最優(yōu)選至少95%。
本發(fā)明的方法和裝置優(yōu)選地可應用于各種生物細胞的干燥保存。例如血液中的紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、血小板等的干燥保存。在吸收細胞樣前優(yōu)選對固體載體預先進行處理,如用含蛋白液體包被封閉、使用一定濃度的細胞固定劑如福爾馬林、醛類、醚類、醇類等有機溶劑處理。當樣品中的細胞成分與上述防腐劑或固定劑接觸時可使細胞成分得到固定并隨后脫水干燥,形成固定化的脫水干燥的細胞樣品。該樣品在加入適當溶劑后,細胞可再次得以水化,重新恢復原有的結構形式,可進一步應用于細胞的組織化學染色、免疫組化染色、免疫熒光染色、細胞表面分子的檢測、特定細胞的分選或純化,如用磁珠或利用流式細胞儀分選細胞或分類檢測等。
本發(fā)明的方法和裝置優(yōu)選結合適當?shù)姆€(wěn)定劑應用于各種蛋白質分子、尤其是各種抗原、抗體、各種酶的脫水干燥或玻璃化保存。本發(fā)明方法的優(yōu)點在于當上述分子處在脫水干燥狀態(tài)或玻璃化狀態(tài)時可長期穩(wěn)定地保持其結合活性和/或酶活性。當加入溶劑時上述成分可在短時間內(nèi)(通常5分鐘內(nèi))迅速水化、均勻分布在液相中,從而能與相應的配體或底物進行有效反應。
本發(fā)明的方法和裝置還優(yōu)選地應用于血液樣品的采集、干燥和保存。在血液樣品采集前可對固體載體進行抗凝劑處理或直接混入抗凝劑,例如肝素、EDTA二鈉。血樣采集直接采取手指穿刺采血或腳底穿刺(嬰兒)采血方法。讓血滴直接滴入多孔固體載體,然后脫水干燥形成抗凝干血微粒和固體載體的混合物。也可以通過常規(guī)靜脈穿刺采血,使用加樣器將血液定量轉移到上述多孔載體上。當樣品重構時,例如加入約相當于原血樣容積的溶劑(通常為純水或蒸餾水)可迅速獲得與原樣品接近的重構血樣,可用于進一步檢測分析等后續(xù)處理。根據(jù)應用目的不同,也可不使用抗凝劑直接將血滴入未用抗凝劑處理的固體載體中制成干血樣品。
實施例實施例1多孔固體材料的制備基本按照CN 1117587C中實施例1的方法操作。即,稱取2.0克聚3-羥基丁酸酯,導入20毫升氯仿。在65℃下水浴加熱30分鐘,使聚合物完全溶解。向該溶液中加入60克孔徑范圍在0.2-0.4毫米的氯化鈉顆粒,充分攪拌使混合均勻。將上述混合物倒入模具中,在0.2MPa的壓力下合模。在室溫下干燥48小時。然后脫模,并將成型的制品放入真空烘箱中0.01MPa下干燥48小時。然后將制品浸泡在200毫升去例子水中,每8小時用新鮮的去離子水更換。72小時后取出制品。在將制品置于真空烘箱中在0.01MPa下干燥48小時,獲得最終產(chǎn)品。
實施例2利用實施例1多孔固體材料干燥保存血樣從按實施例1獲得的聚乳酸多孔材料取厚度為0.6厘米、直徑為1.1厘米的圓柱體。將所述圓柱形多孔材料固定于離心管蓋子的內(nèi)表面。將0.5毫升加有肝素的全血樣品均勻加載在上述多孔材料上。將上述加載了血液樣品的多孔材料置于通風處室溫干燥,直到血樣中含水量低于2%。將載有干燥樣品的蓋子與離心管密合,直到使用時。
與此平行,另外一份同樣來源的0.5毫升血樣用于測定血紅蛋白含量。
實施例3干燥血樣的回收將按實施例2獲得的帶有干燥樣品的離心管打開,在離心管中加入約0.6毫升去離子水。蓋好蓋子,將離心管顛倒,使水與多孔材料接觸約5分鐘。然后,蓋子朝上將離心管甩動幾次或稍微離心,即獲得重構的血液樣品。
通過測定樣品的血紅蛋白含量,并與實施例的對照血紅蛋白含量比較,計算得出血樣的回收率為約96%。
實施例4利用海綿樣聚合物材料干燥保存血樣按照與實施例2同樣的方法操作,但用從市場上購買的聚合物海綿(孔徑范圍為0.2-2.0mm)代替聚乳酸多孔材料。按照實施例3的同樣方法操作,回收血樣。以血紅蛋白的量計,血樣的回收率為約93%。
實施例5從干燥血樣中提取基因組DNA將0.25毫升血樣按照實施例4的方法干燥并保存。在帶有載血樣多孔載體的1.5毫升離心管中加入1毫升血紅細胞溶解液,使其與載樣固體載體接觸5分鐘。振搖試管,在Eppendrof離心機上以最大速度離心15秒。吸棄上清液。再加入1毫升血紅細胞溶解液,振搖試管后離心,吸棄上清。
在試管中加入0.3毫升DNA釋放液,與白細胞沉淀混勻并靜置5分鐘。然后,加入0.1毫升蛋白沉淀液,混勻,離心5分鐘。
將含有基因組DNA的上清液轉移到一試管中,測定DNA濃度。按常規(guī)方法進行電泳,鑒定DNA的質量(結果見圖2)。
以相同來源的0.25毫升新鮮血樣作為平行對照。
結果4次實驗的平均DNA回收量為35微克,而從新鮮血液的平均回收量為36微克。
實施例6血清T3、T4和TSH的回收將0.2毫升血清加入與實施例4同樣的多孔載體中,室溫下干燥3小時。密封后在室溫下保存1個月。
將上述帶有干燥血清樣品的固體載體與0.2毫升蒸餾水接觸10分鐘。離心后取出上清。以化學發(fā)光法分別測定T3、T4和TSH的濃度。同時對凍存的相同來源的血清樣品進行同樣的測定。
結果發(fā)現(xiàn),上述各因子的三次實驗的平均回收率(相對于凍存樣品)均接近98%。
權利要求
1.一種液體樣品的干燥保存方法,其包括將所述液體樣品與一種平均孔徑為0.01mm到5mm的多孔固體載體相接觸;和從吸收了液體樣品的固體載體中除去液體成分;其中干燥后固體載體的孔隙率為固體載體原孔隙率的至少20%。
2.根據(jù)權利要求1的方法,其中所述多孔固體載體的平均孔徑為0.05mm到1mm。
3.根據(jù)權利要求2的方法,其中所述多孔固體載體的平均孔徑為0.1mm到0.5mm。
4.根據(jù)權利要求1的方法,其中干燥后載樣固體載體的孔隙率為載體原孔隙率的至少30%。
5.根據(jù)權利要求1的方法,其中干燥后載樣固體載體的孔隙率為載體原孔隙率的至少40%。
6.根據(jù)權利要求1的方法,其中干燥后載樣固體載體的孔隙率為載體原孔隙率的至少50%。
7.根據(jù)權利要求1的方法,其中所述多孔固體載體是由選自下組的一種或多種材料構成的聚合物材料、經(jīng)化學處理或未經(jīng)處理的生物來源的材料、金屬材料和無機非金屬材料。
8.根據(jù)權利要求7的方法,其中所述聚合物材料是通過交聯(lián)法、發(fā)泡法、纖維非編織成型法或纖維編織獲得的。
9.根據(jù)權利要求8的方法,其中所述聚合物材料是通過發(fā)泡法制得的開孔聚合物泡沫。
10.根據(jù)權利要求7的方法,其中所述金屬材料是泡沫金屬材料、粉末冶金多孔材料、燒結金屬纖維多孔材料或燒結金屬絲網(wǎng)多孔材料。
11.根據(jù)權利要求10的方法,其中所述泡沫金屬是通過熔融金屬發(fā)泡法、金屬粉漿發(fā)泡法、浸滲粉漿燒結法或電鑄法制成的。
12.根據(jù)權利要求7的方法,其中所述無機非金屬材料是由陶瓷、玻璃、水泥或耐火材料制成的多孔材料。
13.根據(jù)權利要求1的方法,其中所述從固體載體中除去液體成分是通過風干進行的。
14.根據(jù)權利要求1的方法,其中所述從固體載體中除去液體成分是在減壓下進行的。
15.根據(jù)權利要求1的方法,其中所述液體樣品是生物體液、人工配制的生物液體樣品或液體生物試劑。
16.根據(jù)權利要求15的方法,其中所述生物體液是血液或其成分。
17.一種用于干燥保存液體樣品的裝置,其包括一種大孔的多孔固體載體。
全文摘要
本發(fā)明提供一種液體樣品的干燥保存方法,其包括將所述液體樣品與一種平均孔徑為0.01到5毫米的多孔固體載體相接觸,并從吸收了液體樣品的固體載體中除去液體成分;其中干燥后固體載體的孔隙率為固體載體原孔隙率的至少20%。本發(fā)明還提供一種用于本發(fā)明方法的裝置。
文檔編號B01J20/00GK1657899SQ20041000438
公開日2005年8月24日 申請日期2004年2月17日 優(yōu)先權日2004年2月17日
發(fā)明者陳格 申請人:陳格