專利名稱：一種復(fù)合微生物制劑及其生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種復(fù)合微生物制劑及其生產(chǎn)エ藝。
背景技術(shù)：
隨著海水養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,海洋環(huán)境和海水養(yǎng)殖環(huán)境日益惡化。據(jù)資料表明，我國的主要養(yǎng)殖區(qū)，約有50%的池塘受到較嚴(yán)重的污染，30%的池塘受到中度污染，有20%的池塘受到輕度污染。主要表現(xiàn)在ー是在養(yǎng)殖過程投放的飼料不充分利用、動(dòng)物排泄物造成的產(chǎn)生大量的富營養(yǎng)養(yǎng)殖廢水。當(dāng)蝦池排放的污水物質(zhì)總量超出海洋區(qū)域內(nèi)環(huán)境容量的 時(shí)，造成海洋水質(zhì)污染和富營養(yǎng)化。ニ是在養(yǎng)殖過程中使用消毒剤、抗菌素對(duì)海洋和養(yǎng)殖環(huán)境造成較大的影響。富含消毒劑和抗菌素的養(yǎng)殖水大量排放后，對(duì)近岸水域微生物生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生了直接的影響。各類污染物質(zhì)進(jìn)入近岸水域生態(tài)環(huán)境后，其最終的降解和浄化都與微生物的活動(dòng)有夫。當(dāng)正常的微生物生態(tài)系統(tǒng)受到干擾或破壞之后，污染物質(zhì)的分解速率易受到影響，自浄能力明顯降低，這樣將會(huì)導(dǎo)致水質(zhì)的進(jìn)ー步惡化。三是養(yǎng)殖廢水排放造成自身污染。養(yǎng)殖水大量排放污染到近岸水域的同時(shí)，造成近岸水域污染后，海水中的氨氮和硫化物等有害物質(zhì)含量升高。當(dāng)這種受污染的海水再抽(放)使用，也造成了自身污染，危及養(yǎng)埴業(yè)的本身。隨著水質(zhì)惡化的日益加劇，全面改善水環(huán)境的微生物制劑已成為當(dāng)今消費(fèi)者追求的目標(biāo)。如何合理利用水資源，建立綠色無公害生態(tài)養(yǎng)殖模式是日前急待解決的問題。微生物制劑又稱“有益微生物”等，它是以直接從自然界中分離的有益菌為主體開發(fā)出來的新型產(chǎn)品，是指ー類有助于穩(wěn)定宿主固定菌群，對(duì)宿主能產(chǎn)生有益影響的活菌制齊U，微生物制劑對(duì)水產(chǎn)品無毒副作用，無殘留性和抗藥性，能有效凈化養(yǎng)殖廢水。微生物技術(shù)作為一項(xiàng)高效、節(jié)能的環(huán)保技木，已被國外廣泛用于治理水域環(huán)境。本發(fā)明研究開發(fā)復(fù)合微生物制劑產(chǎn)品，并應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，探討了其使用效果。證實(shí)了它在海水養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用前景廣、潛カ大，具有廣泛的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供ー種用于復(fù)合微生物制劑及其生產(chǎn)方法，采用高濃度光合菌、乳酸菌、放線菌、枯草芽孢桿菌、硫化細(xì)菌、硝化細(xì)菌、反硝化細(xì)菌等80多種微生物復(fù)合培養(yǎng)，開發(fā)出新型無毒微生物制劑。將其用于改善養(yǎng)殖環(huán)境，浄化養(yǎng)殖水質(zhì)，以提高養(yǎng)殖生物成活率，減少海洋環(huán)境污染。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)—種復(fù)合微生物制劑，其特征在于，該復(fù)合微生物制劑原料重量百分比包括以下組分濃縮光合菌劑45% 50%，多菌劑45% 50%，復(fù)合保護(hù)劑2% 3% ;所述的多菌劑包括酵母菌、枯草芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌其中的至少ー種或任意組合；所述的復(fù)合保護(hù)劑各組分重量百分比為甘油40% 50%，吐溫2020% 30%，硼酸鈉30% 40%。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，其中的光合菌劑采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基分為種子培養(yǎng)基和生產(chǎn)培養(yǎng)基，種子培養(yǎng)基配方為醋酸鈉2. 5g 3. 5g，氯化銨
0.6g 1. 4g,磷酸ニ氫鉀0. 5g 1. 5g,硫酸鎂0. 3g 0. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉0. 5g
1.5g,復(fù)合B族維生素溶液Iml 2ml，酵母膏0.1g 0. 5g,礦物質(zhì)水1000ml,PH6. 8 7. 0 ;其生產(chǎn)培養(yǎng)基配方為醋酸鈉2. 5g 3. 5g，氯化銨0. 6g 1. 4g，磷酸ニ氫鉀0. 5g 1. 5g，硫酸鎂0. 3g 0. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉0 . 5g 1. 5g,復(fù)合B族維生素Iml 2ml,亞硫酸鈉1. 5g，自來水1000ml, PH6. 8 7. O。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，多菌劑菌種采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)甘蔗廢糖蜜40g 60g,氯化銨4g 6g,豆柏45g 65g,磷酸ニ氫鉀2g 4g,硫酸鎂0. 3g 1.2g，酵母膏0. 3g，淀粉0. 5g 3g，碳酸鈣Ig,自來水1000ml, PH6. 8 7. O。同時(shí)，本發(fā)明還提供一種復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)エ藝，其特征在于，它包括以下步驟(I)制備濃縮光合菌劑(2)制備多菌劑，先培養(yǎng)多菌種，然后制得多菌劑；(3)混合，將制得的光合細(xì)菌高濃縮劑和多菌劑混合按體積1:1的比例混合，并加入復(fù)合保護(hù)劑；(4)灌裝；(5)成品。所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑之前，還有如下依次步驟光合細(xì)菌富集、光合細(xì)菌分離、光合細(xì)菌純化、光合細(xì)菌鑒定，篩選光合菌劑發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)光合菌劑；所述步驟(2)制備多菌劑之前,還有如下依次步驟多種菌菌種馴化，篩選多菌種發(fā)酵培養(yǎng)基。所述步驟⑴制備濃縮光合菌劑是先用IOOOml熱水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性殼聚糖80g，共煮lOmin，待冷卻后補(bǔ)足冷開水到IOOOg即得到菌劑濃縮劑，使用時(shí)將Ikg加入IOOOkg的光合細(xì)菌菌液中，混勻，靜置24小時(shí)后移去60%上清液，即得下層高濃縮光和菌劑。所述的光合細(xì)菌富集，其富集培養(yǎng)基為富集培養(yǎng)基醋酸鈉3. 2g，氯化銨1.1g,磷酸ニ氫鉀1. 2g，硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, pH 6. 8 7. O ;所述的光合細(xì)菌分離，其分離培養(yǎng)基為醋酸鈉3.2g，氯化銨1. lg，磷酸ニ氫鉀1. 2g,硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, pH 6. 8 7. O，1. 8%瓊脂粉；所述的光合細(xì)菌純化是將待分離樣品加到富集培養(yǎng)液中，膠塞密封后厭氧光照培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)液呈紅棕色時(shí)，再轉(zhuǎn)接到新鮮培養(yǎng)液二次富集，用平板傾注法厭氧分離。傾注法厭氧分離是將分離平板置于干燥鍋內(nèi)，在鍋底添加焦性沒食子酸與碳酸鈉的混合物，用真空泵抽取鍋內(nèi)空氣，充入氮?dú)?，以此操?次后，于光照下培養(yǎng)7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培養(yǎng)。所述培養(yǎng)光合菌劑是先將培養(yǎng)基組份按5L量配成10 : 1，既濃縮母液為500ml，然后煮沸消毒，冷卻后接到新洗凈的5L塑料桶中，按8%接種量接入400mL新鮮菌液，直接用自來水補(bǔ)足到5L，同上連續(xù)接種培養(yǎng)30批，檢測(cè)每?jī)膳幕罹倲?shù)及雜菌率，同時(shí)用富集培養(yǎng)基做比較，與第0批相比計(jì)算第30批的活菌保持率。所述步驟(2)制備多菌劑是用20L發(fā)酵罐連續(xù)發(fā)酵30批，每批發(fā)酵液作為下批的菌種液，發(fā)酵溫度30°C，搖床轉(zhuǎn)數(shù)為200rpm，通氣比為1: 0. 5，接種量8%，發(fā)酵25h，每?jī)膳l(fā)酵液檢測(cè)一次其活菌總數(shù)和雜菌率。所述的復(fù)合B族維生素包括維生素BJOOmg，維生素B260mg，維生素B690mg，煙酰胺300mg,泛酸I丐30mg,蒸懼水1000mL。本發(fā)明的有益效果為明顯提高了水體中的溶氧量，提高鱸魚苗、蝦苗和蟹苗等水產(chǎn)產(chǎn)品品的成活率，降低了水體COD和氨氮含量。本發(fā)明產(chǎn)品生產(chǎn)過程很少產(chǎn)生廢氣、廢渣和廢水污染，在濃縮光合細(xì)菌過程中產(chǎn)生的廢棄液可以用于蔬菜種植，而且該廢棄液可以提高蔬菜產(chǎn)量和品質(zhì)。因此，該套生產(chǎn)エ藝的產(chǎn)品和副產(chǎn)品均能充分利用，達(dá)到無危害、無污染，屬于節(jié)能減排生產(chǎn)?！?br>

圖1為本發(fā)明所述的ー種復(fù)合微生物制劑及其生產(chǎn)エ藝的流程圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)ー步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不局限于實(shí)施例表示的范圍。實(shí)施例1一種復(fù)合微生物制劑，其特征在于，該復(fù)合微生物制劑原料重量百分比包括以下組分濃縮光合菌劑48 %，多菌劑49 %，復(fù)合保護(hù)劑3 % ；所述的多菌劑包括酵母菌、枯草芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌其中的至少ー種或任意組合；所述的復(fù)合保護(hù)劑各組分重量百分比為甘油40%，吐溫2025%，硼酸鈉35%。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，其中的光合菌劑采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基分為種子培養(yǎng)基和生產(chǎn)培養(yǎng)基，種子培養(yǎng)基配方為醋酸鈉2. 5g,氯化銨Ig,磷酸ニ氫鉀lg，硫酸鎂0. 5g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉Ig,復(fù)合B族維生素溶液1. 5ml,酵母膏Ig,礦物質(zhì)水1000ml，PH6. 8 7. 0 ;其生產(chǎn)培養(yǎng)基配方為醋酸鈉2. 5g，氯化銨lg，磷酸ニ氫鉀lg，硫酸鎂0. 5g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉Ig,復(fù)合B族維生素1. 5ml,亞硫酸鈉1. 5g,自來水1000ml, PH6. 8 7. O。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，多菌劑菌種采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)甘蔗廢糖蜜40g,氯化銨4. 5g,豆柏50g,磷酸ニ氫鉀2. 5g,硫酸鎂0. 5g,酵母膏0. 3g,淀粉1. 5g,碳酸鈣 Ig,自來水 1000ml, PH6. 8 7. O。同時(shí)，本發(fā)明還提供一種復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)エ藝，其特征在于，它包括以下步驟(I)制備濃縮光合菌劑(2)制備多菌劑，先培養(yǎng)多菌種，然后制得多菌劑；(3)混合，將制得的光合細(xì)菌高濃縮劑和多菌劑混合按體積1:1的比例混合，并加入復(fù)合保護(hù)劑；
(4)灌裝；(5)成品。所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑之前，還有如下依次步驟光合細(xì)菌富集、光合細(xì)菌分離、光合細(xì)菌純化、光合細(xì)菌鑒定，篩選光合菌劑發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)光合菌劑；所述步驟(2)制備多菌劑之前,還有如下依次步驟多種菌菌種馴化,篩選多菌種發(fā)酵培養(yǎng)基。所述步驟⑴制備濃縮光合菌劑是先用IOOOml熱水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性殼聚糖80g，共煮lOmin，待冷卻后補(bǔ)足冷開水到IOOOg即得到菌劑濃縮劑，使用時(shí)將Ikg加入IOOOkg的光合細(xì)菌菌液中，混勻，靜置24小時(shí)后移去60%上清液，即得下層高濃縮光和菌劑。 所述的光合細(xì)菌富集，其富集培養(yǎng)基為富集培養(yǎng)基醋酸鈉3. 2g，氯化銨1.1g,磷酸ニ氫鉀1. 2g，硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, pH 6. 8 7. O ;所述的光合細(xì)菌分離，其分離培養(yǎng)基為醋酸鈉3.2g，氯化銨1. lg，磷酸ニ氫鉀1. 2g,硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, pH 6. 8 7. O，1. 8%瓊脂粉；所述的光合細(xì)菌純化是將待分離樣品加到富集培養(yǎng)液中，膠塞密封后厭氧光照培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)液呈紅棕色時(shí)，再轉(zhuǎn)接到新鮮培養(yǎng)液二次富集，用平板傾注法厭氧分離。傾注法厭氧分離是將分離平板置于干燥鍋內(nèi)，在鍋底添加焦性沒食子酸與碳酸鈉的混合物，用真空泵抽取鍋內(nèi)空氣，充入氮?dú)?，以此操?次后，于光照下培養(yǎng)7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培養(yǎng)。所述培養(yǎng)光合菌劑是先將培養(yǎng)基組份按5L量配成10 : 1，既濃縮母液為500ml，然后煮沸消毒，冷卻后接到新洗凈的5L塑料桶中，按8%接種量接入400mL新鮮菌液，直接用自來水補(bǔ)足到5L，同上連續(xù)接種培養(yǎng)30批，檢測(cè)每?jī)膳幕罹倲?shù)及雜菌率，同時(shí)用富集培養(yǎng)基做比較，與第O批相比計(jì)算第30批的活菌保持率。所述步驟(2)制備多菌劑是用20L發(fā)酵罐連續(xù)發(fā)酵30批，每批發(fā)酵液作為下批的菌種液，發(fā)酵溫度30°C，搖床轉(zhuǎn)數(shù)為200rpm，通氣比為1: 0. 5，接種量8%，發(fā)酵25h，每?jī)膳l(fā)酵液檢測(cè)一次其活菌總數(shù)和雜菌率。所述的復(fù)合B族維生素包括維生素BJOOmg，維生素B260mg，維生素B690mg，煙酰胺300mg,泛酸I丐30mg,蒸懼水lOOOmL。實(shí)施例2一種復(fù)合微生物制劑，其特征在于，該復(fù)合微生物制劑原料重量百分比包括以下組分濃縮光合菌劑49 %，多菌劑49 %，復(fù)合保護(hù)劑2 % ；所述的多菌劑包括酵母菌、枯草芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌其中的至少ー種或任意組合；所述的復(fù)合保護(hù)劑各組分重量百分比為甘油42%，吐溫2025%，硼酸鈉33%。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，其中的光合菌劑采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基分為種子培養(yǎng)基和生產(chǎn)培養(yǎng)基，種子培養(yǎng)基配方為醋酸鈉3g,氯化銨Ig,磷酸ニ氫鉀lg，硫酸鎂0. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉0. 5gg,復(fù)合B族維生素溶液2ml,酵母膏0.1g,礦物質(zhì)水1000ml，PH6. 8 7. 0 ;其生產(chǎn)培養(yǎng)基配方為醋酸鈉3g，氯化銨lg，磷酸ニ氫鉀lg，硫酸鎂o. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉0. 5gg,復(fù)合B族維生素2ml,亞硫酸鈉1. 5g,自來水1000ml, PH6. 8 7. O。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，多菌劑菌種采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)甘蔗廢糖蜜50g，氯化銨5. 5g，豆柏50g，磷酸ニ氫鉀2g，硫酸鎂0. 7g，酵母膏0. 3g，淀粉3g，碳酸鈣Ig,自來水 1000ml, PH6. 8 7. O。同時(shí)，本發(fā)明還提供一種復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)エ藝，其特征在于，它包括以下步驟(I)制備濃縮光合菌劑(2)制備多菌劑，先培養(yǎng)多菌種，然后制得多菌劑；
(3)混合，將制得的光合細(xì)菌高濃縮劑和多菌劑混合按體積1:1的比例混合，并加入復(fù)合保護(hù)劑；(4)灌裝；(5)成品。所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑之前，還有如下依次步驟光合細(xì)菌富集、光合細(xì)菌分離、光合細(xì)菌純化、光合細(xì)菌鑒定，篩選光合菌劑發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)光合菌劑；所述步驟(2)制備多菌劑之前,還有如下依次步驟多種菌菌種馴化，篩選多菌種發(fā)酵培養(yǎng)基。所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑是先用IOOOml熱水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性殼聚糖80g，共煮lOmin，待冷卻后補(bǔ)足冷開水到IOOOg即得到菌劑濃縮劑，使用時(shí)將Ikg加入IOOOkg的光合細(xì)菌菌液中，混勻，靜置24小時(shí)后移去60%上清液，即得下層高濃縮光和菌劑。所述的光合細(xì)菌富集，其富集培養(yǎng)基為富集培養(yǎng)基醋酸鈉3. 2g，氯化銨1.1g,磷酸ニ氫鉀1. 2g，硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, pH 6. 8 7. O ;所述的光合細(xì)菌分離，其分離培養(yǎng)基為醋酸鈉3.2g，氯化銨1. lg，磷酸ニ氫鉀1. 2g,硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, pH 6. 8 7. O，1. 8%瓊脂粉；所述的光合細(xì)菌純化是將待分離樣品加到富集培養(yǎng)液中，膠塞密封后厭氧光照培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)液呈紅棕色時(shí)，再轉(zhuǎn)接到新鮮培養(yǎng)液二次富集，用平板傾注法厭氧分離。傾注法厭氧分離是將分離平板置于干燥鍋內(nèi)，在鍋底添加焦性沒食子酸與碳酸鈉的混合物，用真空泵抽取鍋內(nèi)空氣，充入氮?dú)猓源瞬僮?次后，于光照下培養(yǎng)7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培養(yǎng)。所述培養(yǎng)光合菌劑是先將培養(yǎng)基組份按5L量配成10 : 1，既濃縮母液為500ml，然后煮沸消毒，冷卻后接到新洗凈的5L塑料桶中，按8%接種量接入400mL新鮮菌液，直接用自來水補(bǔ)足到5L，同上連續(xù)接種培養(yǎng)30批，檢測(cè)每?jī)膳幕罹倲?shù)及雜菌率，同時(shí)用富集培養(yǎng)基做比較，與第O批相比計(jì)算第30批的活菌保持率。所述步驟(2)制備多菌劑是用20L發(fā)酵罐連續(xù)發(fā)酵30批，每批發(fā)酵液作為下批的菌種液，發(fā)酵溫度30°C，搖床轉(zhuǎn)數(shù)為200rpm，通氣比為1: 0. 5，接種量8%，發(fā)酵25h，每?jī)膳l(fā)酵液檢測(cè)一次其活菌總數(shù)和雜菌率。所述的復(fù)合B族維生素包括維生素BJOOmg，維生素B260mg，維生素B690mg，煙酰胺300mg,泛酸I丐30mg,蒸懼水lOOOmL。實(shí)施例3一種復(fù)合微生物制劑，其特征在于，該復(fù)合微生物制劑原料重量百分比包括以下組分濃縮光合菌劑50%，多菌劑48%，復(fù)合保護(hù)劑2% ；所述的多菌劑包括酵母菌、枯草芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌其中的至少ー種或任意組合；所述的復(fù)合保護(hù)劑各組分重量百分比為甘油48%，吐溫2020%，硼酸鈉32%。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，其中的光合菌劑采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基分為種子培養(yǎng)基和生產(chǎn)培養(yǎng)基，種子培養(yǎng)基配方為醋酸鈉3. 5g，氯化銨1.4g，磷酸ニ氫鉀0. 5g，硫酸鎂0. Sg,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉lg，復(fù)合B族維生素溶液1. 5ml，酵母膏
0.lg，礦物質(zhì)水1000ml, PH6. 8 7. 0 ;其生產(chǎn)培養(yǎng)基配方為醋酸鈉3. 5g，氯化銨1. 4g，磷酸ニ氫鉀0. 5gg,硫酸鎂0. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉Ig,復(fù)合B族維生素1. 5ml,亞硫酸鈉
1.5g,自來水 1000ml, PH6. 8 7. O。所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，多菌劑菌種采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)甘蔗廢糖蜜60g,氯化銨4. 5g,豆柏55g,磷酸ニ氫鉀2g,硫酸鎂1. 2g,酵母膏0. 3g,淀粉2. 5g,碳酸鈣 Ig,自來水 1000ml, PH6. 8 7. O。同時(shí)，本發(fā)明還提供一種復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)エ藝，其特征在于，它包括以下步驟(I)制備濃縮光合菌劑(2)制備多菌劑，先培養(yǎng)多菌種，然后制得多菌劑；(3)混合，將制得的光合細(xì)菌高濃縮劑和多菌劑混合按體積1:1的比例混合，并 加入復(fù)合保護(hù)劑；(4)灌裝；(5)成品。所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑之前，還有如下依次步驟光合細(xì)菌富集、光合細(xì)菌分離、光合細(xì)菌純化、光合細(xì)菌鑒定，篩選光合菌劑發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)光合菌劑；所述步驟
(2)制備多菌劑之前,還有如下依次步驟多種菌菌種馴化，篩選多菌種發(fā)酵培養(yǎng)基。所述步驟⑴制備濃縮光合菌劑是先用IOOOml熱水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性殼聚糖80g，共煮lOmin，待冷卻后補(bǔ)足冷開水到IOOOg即得到菌劑濃縮劑，使用時(shí)將Ikg加入IOOOkg的光合細(xì)菌菌液中，混勻，靜置24小時(shí)后移去60%上清液，即得下層高濃縮光和菌劑。所述的光合細(xì)菌富集，其富集培養(yǎng)基為富集培養(yǎng)基醋酸鈉3. 2g，氯化銨1.1g,磷酸ニ氫鉀1. 2g，硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 lOOOmL, pH 6. 8 7. 0 ;所述的光合細(xì)菌分離，其分離培養(yǎng)基為醋酸鈉3.2g，氯化銨1. lg，磷酸ニ氫鉀1. 2g,硫酸鎂0. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏0.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1.5mL,純化水 lOOOmL, pH 6. 8 7. 0，1. 8%瓊脂粉；所述的光合細(xì)菌純化是將待分離樣品加到富集培養(yǎng)液中，膠塞密封后厭氧光照培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)液呈紅棕色時(shí)，再轉(zhuǎn)接到新鮮培養(yǎng)液二次富集，用平板傾注法厭氧分離。傾注法厭氧分離是將分離平板置于干燥鍋內(nèi)，在鍋底添加焦性沒食子酸與碳酸鈉的混合物，用真空泵抽取鍋內(nèi)空氣，充入氮?dú)猓源瞬僮?次后，于光照下培養(yǎng)7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培養(yǎng)。所述培養(yǎng)光合菌劑是先將培養(yǎng)基組份按5L量配成10 : 1，既濃縮母液為500ml，然后煮沸消毒，冷卻后接到新洗凈的5L塑料桶中，按8%接種量接入400mL新鮮菌液，直接用自來水補(bǔ)足到5L，同上連續(xù)接種培養(yǎng)30批，檢測(cè)每?jī)膳幕罹倲?shù)及雜菌率，同時(shí)用富集培養(yǎng)基做比較，與第0批相比計(jì)算第30批的活菌保持率。所述步驟(2)制備多菌劑是用20L發(fā)酵罐連續(xù)發(fā)酵30批，每批發(fā)酵液作為下批的菌種液，發(fā)酵溫度30°C，搖床轉(zhuǎn)數(shù)為200rpm，通氣比為1: 0. 5，接種量8%，發(fā)酵25h，每?jī)膳l(fā)酵液檢測(cè)一次其活菌總數(shù)和雜菌率。所述的復(fù)合B族維生素包括維生素BJOOmg，維生素B260mg，維生素B690mg，煙酰胺300mg,泛酸I丐30mg,蒸懼水lOOOmL。產(chǎn)品有效期試驗(yàn) 含有光合細(xì)菌、枯草芽胞菌、假絲酵母菌、硝化細(xì)菌等多菌種的產(chǎn)品中加入保護(hù)劑后，保存6個(gè)月后，產(chǎn)品中有效活菌數(shù)繼續(xù)達(dá)到68億/mL，保存12個(gè)月后有效活菌數(shù)維持在57億/mL (詳見表I)。表I保質(zhì)期試驗(yàn)結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種復(fù)合微生物制劑，其特征在于，該復(fù)合微生物制劑原料重量百分比包括以下組分濃縮光合菌劑45% 50%，多菌劑45% 50%，復(fù)合保護(hù)劑2% 3% ; 所述的多菌劑包括酵母菌、枯草芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌其中的至少一種或任意組合； 所述的復(fù)合保護(hù)劑各組分重量百分比為甘油40% 50%，吐溫20 20% 30%，硼酸鈉 30% 40%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，其中的光合菌劑采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)培養(yǎng)基分為種子培養(yǎng)基和生產(chǎn)培養(yǎng)基，種子培養(yǎng)基配方為醋酸鈉2. 5g 3.5g,氯化銨O. 6g 1. 4g,磷酸二氫鉀O. 5g 1. 5g,硫酸鎂O. 3g O. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉O. 5g 1. 5g,復(fù)合B族維生素溶液Iml 2ml,酵母膏O.1g O. 5g,礦物質(zhì)水1000ml,PH6. 8 7. O ;其生產(chǎn)培養(yǎng)基配方為醋酸鈉2. 5g 3. 5g，氯化銨O. 6g 1. 4g，磷酸二氫鉀O. 5g L 5g,硫酸鎂O. 3g O. 8g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉O. 5g L 5g,復(fù)合B族維生素Iml 2ml,亞硫酸鈉1. 5g,自來水1000ml, PH6. 8 7. O。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物制劑，其特征在于，多菌劑菌種采用如下配方發(fā)酵培養(yǎng)甘鹿廢糖蜜40g 60g,氯化銨4g 6g,豆柏45g 65g,磷酸二氫鉀2g 4g,硫酸鎂O. 3g 1.2g，酵母膏O. 3g，淀粉O. 5g 3g，碳酸鈣Ig,自來水1000ml，PH6. 8 7. O。
4.一種復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)工藝，其特征在于，它包括以下步驟 (1)制備濃縮光合菌劑 (2)制備多菌劑，先培養(yǎng)多菌種，然后制得多菌劑； (3)混合，將制得的光合細(xì)菌高濃縮劑和多菌劑混合按體積1:1的比例混合，并加入復(fù)合保護(hù)劑； (4)灌裝； (5)成品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)工藝，其特征在于，在所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑之前，還有如下依次步驟光合細(xì)菌富集、光合細(xì)菌分離、光合細(xì)菌純化、光合細(xì)菌鑒定，篩選光合菌劑發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)光合菌劑；所述步驟(2)制備多菌劑之前,還有如下依次步驟多種菌菌種馴化，篩選多菌種發(fā)酵培養(yǎng)基。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述步驟(I)制備濃縮光合菌劑是先用IOOOml熱水煮20g淀粉，淀粉糊化后加入羧甲基水溶性殼聚糖80g，共煮lOmin，待冷卻后補(bǔ)足冷開水到IOOOg即得到菌劑濃縮劑，使用時(shí)將Ikg加入IOOOkg的光合細(xì)菌菌液中，混勻，靜置24小時(shí)后移去60%上清液，即得下層高濃縮光和菌劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的光合細(xì)菌富集，其富集培養(yǎng)基為富集培養(yǎng)基醋酸鈉3. 2g，氯化銨1. lg，磷酸二氫鉀1. 2g硫酸鎂O. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏O.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水IOOOmL, ρΗ6· 8 7. O ; 所述的光合細(xì)菌分離，其分離培養(yǎng)基為醋酸鈉3. 2g，氯化銨1. lg，磷酸二氫鉀1. 2g，硫酸鎂O. 50g,氯化鈉2. Og,碳酸氫鈉1. Og,酵母膏O.1Og,復(fù)合B族維生素溶液1. 5mL,純化水 IOOOmL, ρΗ6· 8 7. 0，1. 8%瓊脂粉； 所述的光合細(xì)菌純化是將待分離樣品加到富集培養(yǎng)液中，膠塞密封后厭氧光照培養(yǎng)，當(dāng)培養(yǎng)液呈紅棕色時(shí)，再轉(zhuǎn)接到新鮮培養(yǎng)液二次富集，用平板傾注法厭氧分離。傾注法厭氧分離是將分離平板置于干燥鍋內(nèi)，在鍋底添加焦性沒食子酸與碳酸鈉的混合物，用真空泵抽取鍋內(nèi)空氣，充入氮?dú)猓源瞬僮?次后，于光照下培養(yǎng)7天，挑取平板上不同特征的菌落斜面培養(yǎng)。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述培養(yǎng)光合菌劑是先將培養(yǎng)基組份按5L量配成10 1，既濃縮母液為500ml，然后煮沸消毒，冷卻后接到新洗凈的5L塑料桶中，按8%接種量接入400mL新鮮菌液，直接用自來水補(bǔ)足到5L，同上連續(xù)接種培養(yǎng)30批，檢測(cè)每?jī)膳幕罹倲?shù)及雜菌率，同時(shí)用富集培養(yǎng)基做比較，與第O批相比計(jì)算第30批的活菌保持率。
9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的復(fù)合微生物制劑的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述步驟(2)制備多菌劑是用20L發(fā)酵罐連續(xù)發(fā)酵30批，每批發(fā)酵液作為下批的菌種液，發(fā)酵溫度30°C，搖床轉(zhuǎn)數(shù)為200rpm，通氣比為1: O. 5，接種量8%，發(fā)酵25h，每?jī)膳l(fā)酵液檢測(cè)一次其活菌總數(shù)和雜菌率。
10.根據(jù)權(quán)利要求2或7所述的復(fù)合微生物制劑及其生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的復(fù)合B族維生素包括維生素BJOOmg，維生素B260mg，維生素B690mg，煙酰胺300mg，泛酸鈣30mg,蒸懼水 1000mL。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種復(fù)合微生物制劑及其生產(chǎn)工藝，該復(fù)合微生物制劑原料重量百分比包括以下組分濃縮光合菌劑45％～50％，多菌劑45％～50％，復(fù)合保護(hù)劑2％～3％；所述的多菌劑包括酵母菌、枯草芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、乳酸菌其中的至少一種或任意組合；所述的復(fù)合保護(hù)劑各組分重量百分比為甘油40％～50％，吐溫2020％～30％，硼酸鈉30％～40％。本發(fā)明的復(fù)合微生物制劑明顯提高了水體中的溶氧量，提高鱸魚苗、蝦苗和蟹苗等水產(chǎn)產(chǎn)品品的成活率，降低了水體COD和氨氮含量。且生產(chǎn)過程很少產(chǎn)生廢氣、廢渣和廢水污染。因此，該套生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品和副產(chǎn)品均能充分利用，達(dá)到無危害、無污染，屬于節(jié)能減排生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C02F3/34GK103013855SQ20121043667
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月6日
發(fā)明者蘇興 申請(qǐng)人:防城港市金沙海洋科技有限責(zé)任公司