本發(fā)明涉及土壤酸化修復(fù)技術(shù)和重金屬污染治理
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體而言，涉及一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：土壤酸化退化是指長期大量施用化肥、化學(xué)農(nóng)藥和其他化學(xué)農(nóng)資產(chǎn)品造成的土壤退化現(xiàn)象，包括土壤板結(jié)、土壤酸值增大和作物病害加劇。近十年來，這種土壤現(xiàn)象已由點發(fā)展到面、由北向南、由平原向高海拔土壤快速發(fā)展，造成農(nóng)業(yè)作物欠收或絕收。土壤酸化退化的本質(zhì)是土壤微生物體系發(fā)生了徹底改變。這種土壤微生物體系的改變，造成了作物病害微生物增多且易于存活在土壤中，產(chǎn)生大量的有機酸，疊加了土壤pH降低。農(nóng)業(yè)部制定了“土壤調(diào)理劑”產(chǎn)品標準，旨在改變土壤物理性質(zhì)；也曾經(jīng)有人利用氯化苦進行化學(xué)修復(fù)，均見效甚微。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的之一在于提供熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于位于中國武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，分類命名為PseudomonasfluorescensH4，保藏號為CCTCCNO:M2017052。熒光假單胞菌H4能破壞作物致病微生物平衡、分解出作物生長所需的礦物質(zhì)和生物質(zhì)，改變土壤中的微生物體系，起到修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的作用，并且不對土壤造成二次污染。本發(fā)明的目的之二在于提供上述熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用。將熒光假單胞菌H4應(yīng)用于生物土壤修復(fù)劑的制備中，使制備得到的生物土壤修復(fù)劑保持熒光假單胞菌H4修復(fù)土壤的作用，同時加入有協(xié)同作用的土壤團粒成分，可制備治理土壤板結(jié)的生物土壤修復(fù)劑。本發(fā)明的目的之三在于提供一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法。該方法制備的生物土壤修復(fù)劑菌體活性高，易于在水稻、煙葉、茶葉、魔芋、蔬菜、中藥材、小麥和水果種植土壤中培養(yǎng)，存活時間長，對上述田塊中的致病微生物進行撲食或拮抗，具有效果明顯，適用區(qū)域廣，使用方便和適用作物品種諸多特點。本發(fā)明的目的之四在于提供一種生物土壤修復(fù)劑，其由上述生物土壤修復(fù)劑的制備方法制備而成。該生物土壤修復(fù)劑中土壤團粒材料與菌體混合在一起，形成穩(wěn)定的微循環(huán)體系，更好地發(fā)揮修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的作用。本發(fā)明采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)。熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，該熒光假單胞菌H4于2017年2月20日保藏于位于中國武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，分類命名為PseudomonasfluorescensH4，保藏號為CCTCCNO:M2017052。上述熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用。一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法，其包括：將上述熒光假單胞菌H4進行發(fā)酵，得到發(fā)酵液。用發(fā)酵液與土壤團粒材料以及腐熟牦牛糞混合，得到生物土壤修復(fù)劑。本發(fā)明實施例的一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用的有益效果是：(1)本發(fā)明提供的熒光假單胞菌H4通過破壞作物致病微生物平衡、供應(yīng)有機物質(zhì)改善土壤的理化性質(zhì)、改善土壤生態(tài)系統(tǒng)的循環(huán)從而達到修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的目的，不對土壤造成二次污染，是一種修復(fù)土壤的主要微生物。(2)本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑的制備方法，通過該方法得到含有土壤團粒材料和提供微生物養(yǎng)分天然培養(yǎng)基的生物土壤修復(fù)劑。(3)本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑包括土壤團粒材料，這種材料與熒光假單胞菌H4能夠混合，形成穩(wěn)定的體系，促進作物增產(chǎn)和提高作物品質(zhì)。具體實施方式為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行操作。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。下面對本發(fā)明實施例的一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法及熒光假單胞菌H4的應(yīng)用進行具體說明。熒光假單胞菌H4在修復(fù)耕地土壤中的應(yīng)用，該熒光假單胞菌H4于2017年2月20日在位于湖北省武漢市武昌區(qū)八一路299號武漢大學(xué)校內(nèi)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號為CCTCCNO:M2017052，分類命名為PseudomonasfluorescensH4。優(yōu)選地，上述耕地土壤為水稻種植土壤、煙葉種植土壤、茶葉種植土壤、魔芋種植土壤，蔬菜種植土壤、中藥材、小麥種植土壤或水果種植土壤中的任意一種。熒光假單胞菌H4為革蘭陰性菌，細胞呈桿狀。熒光假單胞菌H4通過破壞作物致病微生物平衡、供應(yīng)有機物質(zhì)改善土壤的理化性質(zhì)、土壤生態(tài)系統(tǒng)的循環(huán)，從而達到修復(fù)土壤的作用，不對土壤造成二次污染。并且其具有分解出水稻、煙葉、茶葉、魔芋、蔬菜、中藥材、小麥和水果等作物生長所需礦物質(zhì)和生物質(zhì)的功能，能夠提高上述作物產(chǎn)量和改善品質(zhì)。上述熒光假單胞菌H4在制備生物土壤修復(fù)劑中的應(yīng)用。將熒光假單胞菌H4應(yīng)用于生物土壤修復(fù)劑的制備中，使制備得到的生物土壤修復(fù)劑既保持熒光假單胞菌H4修復(fù)土壤的作用，同時加入有協(xié)同作用的土壤團粒材料和培養(yǎng)微生物的天然培養(yǎng)基材料，得到效果明顯的生物土壤修復(fù)劑。一種生物土壤修復(fù)劑的制備方法，其包括：將上述熒光假單胞菌H4進行發(fā)酵，得到發(fā)酵液。用發(fā)酵液與土壤團粒材料及腐熟牦牛糞混合，得到生物土壤修復(fù)劑。優(yōu)選地，上述發(fā)酵液的OD600值為1.0-2.0，并且發(fā)酵液采用四級培養(yǎng)得到。四級培養(yǎng)分別為活化培養(yǎng)、一級發(fā)酵、二級發(fā)酵和三級發(fā)酵。通過該方式培養(yǎng)得到活菌體，既大量擴繁了菌體，又使得菌體保持旺盛的生長活力。優(yōu)選地，上述土壤團粒材料為聚丙烯酰胺，并且聚丙烯酰胺的聚合度為1100-1300。優(yōu)選地，聚丙烯酰胺為無菌狀態(tài)，并且混合過程在無菌環(huán)境下進行。聚丙烯酰胺采用授權(quán)公告號為CN204208070U的實用新型專利提供的一種有機肥原料消毒機處理，以保持無菌狀態(tài)。優(yōu)選地，聚丙烯酰胺與發(fā)酵液的質(zhì)量之比為0.1-0.5:1。聚丙烯酰胺(PAM)由丙烯酰胺/丙烯酸鹽交聯(lián)共聚而成。聚丙烯酰胺可分為陰離子、陽離子和非離子等類型。陽離子網(wǎng)狀聚丙烯酰胺是一種高吸水性樹脂，可用做農(nóng)田保水劑。陰離子線型聚丙烯酰胺因其分子鏈長等特征，用作土壤改良劑，在控制土壤侵蝕、防止水土流失方面起到了重要的作用。聚丙烯酰胺可有效的改善土壤結(jié)構(gòu)、將板結(jié)土壤形成團粒結(jié)構(gòu)，增加土壤的透氣性和持水量、降低土壤容重、提高滲透率、提高土壤抗蝕能力，進而提高作物產(chǎn)量。概括說來，聚丙烯酰胺具有保土、保水、保肥和增產(chǎn)的四大效應(yīng)。優(yōu)選地，對酸性土壤施用含陽離子型聚丙烯酰胺的生物土壤修復(fù)劑，對堿性土壤施用含陰離子型聚丙烯酰胺的生物土壤修復(fù)劑。優(yōu)選地，腐熟牦牛糞與發(fā)酵液的質(zhì)量之比為10-20:1。優(yōu)選地，生物土壤修復(fù)劑中水的質(zhì)量百分數(shù)為35％-40％。優(yōu)選地，上述腐熟牦牛糞為無菌腐熟牦牛糞，并且整個混合過程在無菌環(huán)境下進行。腐熟牦牛糞為熒光假單胞菌的長期存活提供條件。無菌腐熟牦牛糞以及在無菌環(huán)境下進行混合均是為了保證熒光假單胞菌H4的活力。優(yōu)選地，上述無菌腐熟牦牛糞同過以下方法制備而成：將牦牛糞干餅破碎成2mm以下粉體，然后噴灑水分至牦牛糞粉體中水分的質(zhì)量百分數(shù)為50-80％，常溫條件下自然發(fā)酵10-15天即得到腐熟牦牛糞。腐熟牦牛糞采用授權(quán)公告號為CN204208070U的實用新型專利提供的一種有機肥原料消毒機處理，得到的無菌腐熟牦牛糞備用。牦牛糞腐熟過程中，牦牛糞成分轉(zhuǎn)化成作物生長需要小分子糖、多肽或氨基酸以及能夠被作物吸收的生物碳類物質(zhì)。腐熟牦牛糞呈黑褐色，手抓成團，落地成沙，帶有清新泥土味，營養(yǎng)成分豐富。熒光假單胞菌H4附著在腐熟牦牛糞上，腐熟牦牛糞以培養(yǎng)基形式存在。生物土壤修復(fù)劑中菌體兩年內(nèi)保持含有20億個菌/克左右。熒光假單胞菌H4與腐熟牦牛糞共同作用，將腐熟牦牛糞中的有效活性成分分解出，為作物生長提供所需的礦物質(zhì)、生物質(zhì)和有益菌，提高了作物的產(chǎn)量，并且無污染。一種生物土壤修復(fù)劑，其由上述的生物土壤修復(fù)劑的制備方法制備而成。本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑包括熒光假單胞菌H4和聚丙烯酰胺，所以其兼具二者修復(fù)土壤的功能。不僅如此，熒光假單胞菌H4和聚丙烯酰胺之間形成穩(wěn)定的微循環(huán)體系，防止了菌體的流失，保持菌體集中生長，達到更優(yōu)異的協(xié)同配合效果，更好地發(fā)揮修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)和提高品質(zhì)的作用。以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例1本實施例中提供一種生物土壤修復(fù)劑及其制備方法。其包括：1.1按以下各成分的質(zhì)量百分數(shù)配置培養(yǎng)基：葡萄糖0.7％，蛋白胨0.6％，酵母膏0.3％，氯化鈉0.2％，蒸餾水98.2％。培養(yǎng)基中的各試劑采用生化級標準。配制完成后，在121℃滅菌30分鐘后備用。1.2熒光假單胞菌H4的發(fā)酵液采用以下方法制備：1.2.1活化培養(yǎng)在50mL三角瓶中，裝入上述培養(yǎng)基進行滅菌，按照菌種與培養(yǎng)基的體積比為1:48的比例接入菌種，并在26℃，170r/min的搖床中培養(yǎng)至菌液OD600值為0.2-0.4，得到活化培養(yǎng)液。1.2.2一級發(fā)酵在10L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入一級種子罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.0，按照活化培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:18的比例接入活化培養(yǎng)液，28℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD600值為0.6-0.8，得到一級培養(yǎng)液。1.2.3二級發(fā)酵在50L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入二級種子罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.0，按照一級培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:18的比例接入一級培養(yǎng)液，26℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD600值為1.0-1.4，得到二級培養(yǎng)液。1.2.4三級發(fā)酵在1000L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入發(fā)酵罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.0，按照二級培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:18的比例接入二級培養(yǎng)液，26℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD值為1.6-2.0，得到發(fā)酵液。根據(jù)實際操作情況，在三級發(fā)酵過程中添加消泡劑和片堿，使最終得到的發(fā)酵液的pH為6.8。1.3按按重量份數(shù)計，取各原料混合均勻，得到生物土壤修復(fù)劑：發(fā)酵液1份，聚丙烯酰胺0.5份，腐熟牦牛糞20份。將牦牛糞干餅破碎至1-2mm粉體，然后噴灑水分至牦牛糞粉體上水分的質(zhì)量百分數(shù)為50％，常溫條件下自然發(fā)酵10天即得到腐熟牦牛糞。將腐熟牦牛糞和土壤團粒材料采用授權(quán)公告號為CN204208070U的實用新型專利提供的一種有機肥原料消毒機殺毒滅菌，備用。在無菌條件下，將殺毒滅菌后的聚丙烯酰胺、發(fā)酵液和滅菌后的腐熟牦牛糞在容器中混合均勻，并裝袋封口。生物土壤修復(fù)劑中水的質(zhì)量百分數(shù)為35％。實施例22.1按以下各成分的質(zhì)量百分數(shù)配置培養(yǎng)基：葡萄糖0.8％，蛋白胨0.7％，酵母膏0.4％，氯化鈉0.3％，KH2PO40.1％，蒸餾水97.7％。培養(yǎng)基中的各試劑采用生化級標準。配制完成后，在121℃滅菌30分鐘后備用。2.2熒光假單胞菌H4的發(fā)酵液采用以下方法制備：2.2.1活化培養(yǎng)在50mL三角瓶中，裝入上述培養(yǎng)基進行滅菌，按照菌種與培養(yǎng)基的體積比為1:50的比例接入菌種，并在28℃，180r/min的搖床中培養(yǎng)至菌液OD600值為0.2-0.4，得到活化培養(yǎng)液。2.2.2一級發(fā)酵在10L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入一級種子罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.2，按照活化培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:20的比例接入活化培養(yǎng)液，28℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD600值為0.6-0.8，得到一級培養(yǎng)液。2.2.3二級發(fā)酵在50L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入二級種子罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.2，按照一級培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:20的比例接入一級培養(yǎng)液，28℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD600值為1.0-1.4，得到二級培養(yǎng)液。2.2.4三級發(fā)酵在1000L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入發(fā)酵罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.2，按照二級培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:10的比例接入二級培養(yǎng)液，28℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD600值為1.6-2.0，得到發(fā)酵液。根據(jù)實際操作情況，在三級發(fā)酵過程中添加消泡劑和片堿，使最終得到的發(fā)酵液的pH為6.7。2.3按按重量份數(shù)計，取各原料混合均勻，得到生物土壤修復(fù)劑：發(fā)酵液2份，聚丙烯酰胺0.6份，腐熟牦牛糞20份。將牦牛糞干餅破碎至1-2mm粉體，然后噴灑水分至牦牛糞粉體上水分的質(zhì)量百分數(shù)為65％，常溫條件下自然發(fā)酵13天即得到腐熟牦牛糞。將腐熟牦牛糞和土壤團粒材料采用授權(quán)公告號為CN204208070U的實用新型專利提供的一種有機肥原料消毒機殺毒滅菌，備用。在無菌條件下，將殺毒滅菌后的聚丙烯酰胺、發(fā)酵液和滅菌后的腐熟牦牛糞在容器中混合均勻，并裝袋封口。生物土壤修復(fù)劑中水的質(zhì)量百分數(shù)為40％。實施例33.1按以下各成分的質(zhì)量百分數(shù)配置培養(yǎng)基：葡萄糖1.0％，蛋白胨0.8％，酵母膏0.5％，氯化鈉0.4％，KH2PO40.2％，蒸餾水97.1％。培養(yǎng)基中的各試劑采用生化級標準。配制完成后，在121℃滅菌30分鐘后備用。3.2熒光假單胞菌H4的發(fā)酵液采用以下方法制備：3.2.1活化培養(yǎng)在50mL三角瓶中，裝入上述培養(yǎng)基進行滅菌，按照菌種與培養(yǎng)基的體積比為1:52的比例接入菌種，并在30℃，200r/min的搖床中培養(yǎng)至菌液OD值為0.2-0.4，得到活化培養(yǎng)液。3.2.2一級發(fā)酵在10L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入一級種子罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.3，按照活化培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:22的比例接入活化培養(yǎng)液，30℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD值為0.6-0.8，得到一級培養(yǎng)液。3.2.3二級發(fā)酵在50L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入二級種子罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.3，按照一級培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:22的比例接入一級培養(yǎng)液，30℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD值為1.0-1.4，得到二級培養(yǎng)液。3.2.4三級發(fā)酵在1000L發(fā)酵罐中，將上述培養(yǎng)基放入發(fā)酵罐后滅菌，調(diào)節(jié)pH至7.3，按照二級培養(yǎng)液與培養(yǎng)基的體積之比為1:12的比例接入二級培養(yǎng)液，30℃下，調(diào)節(jié)攪拌速度以及通氣量，保持溶氧量大于25％，培養(yǎng)至菌液OD值為1.6-2.0，得到發(fā)酵液。根據(jù)實際操作情況，在三級發(fā)酵過程中添加消泡劑和片堿，使最終得到的發(fā)酵液的pH為6.6。3.3按按重量份數(shù)計，取各原料混合均勻，得到生物土壤修復(fù)劑：發(fā)酵液1份，聚丙烯酰胺0.1份，腐熟牦牛糞15份。將牦牛糞干餅破碎至1-2mm粉體，然后噴灑水分至牦牛糞粉體上水分的質(zhì)量百分數(shù)為80％，常溫條件下自然發(fā)酵15天即得到腐熟牦牛糞。將腐熟牦牛糞和土壤團粒材料采用授權(quán)公告號為CN204208070U的實用新型專利提供的一種有機肥原料消毒機殺毒滅菌，備用。在無菌條件下，將殺毒滅菌后的聚丙烯酰胺、發(fā)酵液和滅菌后的腐熟牦牛糞在容器中混合均勻，并裝袋封口。生物土壤修復(fù)劑中水的質(zhì)量百分數(shù)為38％。實施例4本實施例提供對實施例2中制備的生物土壤修復(fù)劑的應(yīng)用。具體地，通過施用生物土壤修復(fù)劑，考察生物土壤修復(fù)劑對煙葉種植土壤的改善作用以及對煙葉的增產(chǎn)作用，客觀評價生物土壤修復(fù)劑在煙葉栽培中的實用價值，為生物土壤修復(fù)劑在修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供依據(jù)。試驗分別在湖北省恩施市城郊煙田(以下簡稱第一試驗田)以及湖北省宣恩縣羅川村煙田(以下簡稱第二試驗田)進行。2014年第一試驗田以及第二試驗田均因青枯病導(dǎo)致煙葉絕收。2015年-2016年，對第一試驗田以及第二試驗田施用實施例2提供的生物土壤修復(fù)劑。施用方法為：按照煙草施肥標準化操作，在移栽時將生物土壤修復(fù)劑溶解在煙苗定根水，通過定根水灌根將生物土壤修復(fù)劑帶入煙田土壤，施用量為2kg/畝，每年施用一次。2014年-2016年三年中，第一試驗田以及第二試驗田的土壤檢測數(shù)據(jù)如表1所示：表1生物土壤修復(fù)劑對煙葉種植土壤的改善作用由表1可知，對第一試驗田以及第二試驗田施用本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑后，酸化的土壤明顯得到修復(fù)，其具體表現(xiàn)為土壤pH值明顯正?；?，土壤中菌落數(shù)明顯升高。2014年-2016年三年中，第一試驗田以及第二試驗田的煙葉產(chǎn)量及恢復(fù)度數(shù)據(jù)如表2所示：表2生物土壤修復(fù)劑對煙葉的增產(chǎn)作用表2中，恢復(fù)度以全市(縣)的煙葉的平均畝產(chǎn)量為標準計算。具體地，第一試驗田的恢復(fù)度＝第一試驗田的畝產(chǎn)量/當(dāng)年恩施市的平均畝產(chǎn)量；第二試驗田的恢復(fù)度＝第二試驗田的畝產(chǎn)量/當(dāng)年宣恩縣的平均畝產(chǎn)量。由表2可知，對第一試驗田以及第二試驗田施用本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑后，由于土壤明顯被改善，煙葉的產(chǎn)量逐漸恢復(fù)，并且均恢復(fù)至80％以上。實施例5本實施例提供對實施例2中制備的生物土壤修復(fù)劑的應(yīng)用。具體地，通過施用生物土壤修復(fù)劑，考察生物土壤修復(fù)劑對魔芋種植土壤的改善作用以及對魔芋的增產(chǎn)作用，客觀評價生物土壤修復(fù)劑在魔芋栽培中的實用價值，為生物土壤修復(fù)劑在修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供依據(jù)。在湖北省咸豐縣忠堡鎮(zhèn)魔芋示范田塊上開展生物土壤修復(fù)劑試驗。魔芋易感染細菌類軟腐病，一旦爆發(fā)將造成絕收，魔芋行業(yè)里稱其為“癌癥”。魔芋一般生長2-3年，由于軟腐病是土傳病害不能連作。本試驗在同一田塊上跟蹤兩年，2014年5月至2016年12月。在2畝試驗田進行小區(qū)對照試驗。試驗設(shè)計如下：對照組：畝施50kg復(fù)合肥；試驗組：畝施50kg復(fù)合肥+生物土壤修復(fù)劑(2kg/畝)。品種為當(dāng)?shù)鼗в笞延螅囼炗梅N為同一批次，種子處理方法相同，對照組和試驗組所選定的試驗田塊肥力和排水水平相當(dāng)，采用套種玉米遮陰。小區(qū)采用三次重復(fù)，每個小區(qū)留有保護行種植玉米。試驗調(diào)查期為兩年，包括軟腐病發(fā)病率、魔芋產(chǎn)量和土壤pH值。軟腐病發(fā)病率每年調(diào)查兩次，分別在發(fā)病初期6月中旬和發(fā)病高期，產(chǎn)量和土壤測定第二年挖芋時測定。發(fā)病率的調(diào)查方式為：隨機選取一行魔芋，調(diào)查病株數(shù)。發(fā)病率調(diào)查結(jié)果如表3所示：表3魔芋軟腐病發(fā)病率調(diào)查表時間對照組試驗組2014年6月5％1％2014年8月20.2％4.1％2015年6月8.1％1.2％2015年8月25.6％4.8％由表3可知，施用本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑后，軟腐病的發(fā)病率明顯降低。分別對對照組和試驗組田塊的魔芋產(chǎn)量和土壤pH進行考察，其中，產(chǎn)量的考察方式為：挖出兩個小區(qū)魔芋進行稱重，其結(jié)果如表4所示:表4魔芋產(chǎn)量和土壤pH測定參數(shù)對照組試驗組魔芋產(chǎn)量(kg/畝)1388.451609.68土壤pH值6.26.6由表4可知，施用本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑后，魔芋的單產(chǎn)量明顯提高，種植土壤的pH值明顯正?；?，充分說明本發(fā)明提供的生物土壤修復(fù)劑具有修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)的作用。這種現(xiàn)象也在云南省富源縣、四川省遂寧市射洪縣和貴州省六盤水市魔芋種植戶反映中得到證實。實施例6本實施例提供對實施例2中制備的生物土壤修復(fù)劑的應(yīng)用。具體地，通過施用生物土壤修復(fù)劑，考察生物土壤修復(fù)劑對水稻種植土壤的改善作用以及對水稻的增產(chǎn)作用，客觀評價生物土壤修復(fù)劑在水稻栽培中的實用價值，為生物土壤修復(fù)劑在修復(fù)土壤使作物增產(chǎn)中的推廣應(yīng)用提供依據(jù)。2014年發(fā)明人委托成都市農(nóng)林科學(xué)研究院水稻所在四川省成都市大邑縣王泗鎮(zhèn)豐都村水稻種植戶開展生物土壤修復(fù)劑試驗。試驗地前茬為小麥，畝產(chǎn)400kg，試驗地土壤肥力中等，地勢平坦，排灌條件良好，海拔500米。試驗設(shè)兩個處理：(1)空白試驗，(2)生物土壤修復(fù)劑(2kg/畝)試驗。試驗品種、播種、栽插、施肥和水分管理等其他條件與當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)管理方法一致。當(dāng)年水稻試驗結(jié)果如下：6.1生長勢：生物土壤修復(fù)劑處理株高為130.7cm，比對照高11.8cm；6.2生育期：生物土壤修復(fù)劑與對照之間沒有顯著差異，均為153天；6.3產(chǎn)量及主要經(jīng)濟性狀生物土壤修復(fù)劑處理的畝產(chǎn)為450.58kg，比對照增產(chǎn)113.1kg，增產(chǎn)25.1％。生物土壤修復(fù)劑的畝有效穗為16.39萬，比對照多0.69萬；穗長為29.5cm，比對照長0.9cm；穗粒數(shù)為131.2，比對照多35.1；結(jié)實率為73.9，比對照高17.5；千粒重30.2克，比對照高0.1克。6.4經(jīng)四川省糧油中心監(jiān)測站檢驗，生物土壤修復(fù)劑處理的樣品好于對照，可以提升0.5個大米等級。同樣，發(fā)明人2015年和2016年相繼委托湖北省恩施州農(nóng)科院水稻所、湖南省湘西州農(nóng)業(yè)局糧經(jīng)站和在江蘇省南通市海安縣南莫鎮(zhèn)水稻種植基地進行了試驗，試驗結(jié)果與成都市大邑縣的數(shù)據(jù)基本一致。以上所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。本發(fā)明的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實施例。基于本發(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3