具有抗腫瘤活性的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP?sch3的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明篩選到一種來(lái)源于真菌的免疫調(diào)節(jié)蛋白，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)對(duì)肺癌細(xì)胞具有明顯的抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡和阻止遷移作用，且該蛋白與已發(fā)現(xiàn)的多數(shù)真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白同源性低，可作為一種新的免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤生物制劑。本發(fā)明還提供并合成了編碼上述蛋白的基因及重組工程菌株。
【專利說(shuō)明】
具有抗腫瘤活性的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FI P-sch3
技術(shù)領(lǐng)域：
[0001] 本發(fā)明涉及一種具有免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤活性的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-SCh3及其 基因。
【背景技術(shù)】：
[0002] 真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白（Fungal immunomodulatory proteins，以下簡(jiǎn)稱為FIPs)最初 是從一些高等擔(dān)子菌(食用菌類(lèi))子實(shí)體中提取的，與植物凝集素和免疫球蛋白結(jié)構(gòu)和功能 相似的一類(lèi)小分子蛋白質(zhì)的統(tǒng)稱。不同的FIPs分別具有增強(qiáng)免疫力、抗過(guò)敏、抗腫瘤、抗病 毒、抗真菌、降低膽固醇、抑制免疫排斥和促進(jìn)骨骼再生等多種重要的生理功能。
[0003] 不同的FIPs活性和穩(wěn)定性差異極為顯著。因此，篩選活性好、穩(wěn)定性高的FIPs蛋白 成為了人們關(guān)注的焦點(diǎn)。目前世界上報(bào)道的FIPs只有十幾種，主要通過(guò)分離提取和同源克 隆的方法得到。從食用菌中提取FIPs蛋白工藝復(fù)雜、周期長(zhǎng)、成本高、得率低，因而嚴(yán)重影響 和限制了新的FIPs的發(fā)現(xiàn)及其大量制備。而通過(guò)同源克隆的方法又很難得到新特性的FIPs 蛋白。
[0004] 因此，通過(guò)基因工程方法從已完成基因組測(cè)序的真菌中獲得可開(kāi)發(fā)利用的FIPs蛋 白，既能豐富FIPs家族的種類(lèi)，更能為人類(lèi)健康的保健和治療提供新的免疫調(diào)節(jié)劑。

【發(fā)明內(nèi)容】
：
[0005] 本發(fā)明的目的是篩選到一種來(lái)源于真菌的免疫調(diào)節(jié)蛋白。
[0006] 本發(fā)明人通過(guò)生物信息學(xué)方法篩選到一種來(lái)源于真菌Stachybotrys chartarum IBT 7711的免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3,發(fā)現(xiàn)其具有免疫調(diào)節(jié)和抑制腫瘤作用。
[0007] 所述真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3，全長(zhǎng)112個(gè)氨基酸，理論分子量為12.568kDa，其 氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。
[0008] FIP_sch3蛋白是一種新型的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白。本發(fā)明人通過(guò)將其氨基酸序列在 GenBank中進(jìn)行BLAST比對(duì)發(fā)現(xiàn):FIP-sch3蛋白與小孢靈芝、赤靈芝、紫靈芝和金針菇真菌免 疫調(diào)節(jié)蛋白610、？1?^_ &、1^-8和？1?-巧6的序列同源性較低，僅分別為58.6%、51.4%、 53.2%和52.7%。說(shuō)明？1?-8(*3是一種新的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白。
[0009] 本發(fā)明還提供并合成了編碼上述真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3的基因：通過(guò)一對(duì)引 *FIP-sch3-F(EcoRI) :5，-CCCGAATTCTCCGCTCAGAC-3mFIP-sch3-R(XhoI):5，-AAA AAC TCG AGC TTC CAT TGG ACT AG-3'，用基因合成的方法克隆了這一真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白 FIP-sch3的基因，DNA全序列分析結(jié)果表明，fip-sch3全長(zhǎng)339bp，其DNA序列如SEQ ID N0.2 所示。
[0010] 本發(fā)明還提供了包含蛋白FIP-sch3基因的重組表達(dá)載體。方法是將本發(fā)明的真菌 免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3基因插入到表達(dá)載體合適的限制性酶切位點(diǎn)之間，使其核苷酸序列 可操作的與表達(dá)調(diào)控序列相連接。優(yōu)選的表述載體是PGEX-6T-1。
[0011] 作為本發(fā)明的一個(gè)最優(yōu)選的實(shí)施方案，所述表達(dá)載體合適的限制性酶切位點(diǎn)之間 是PGEX-6T-1上的EcoRI和Xhol限制性酶切位點(diǎn)之間，得到重組大腸表達(dá)載體pGEX-fip-sch3〇
[0012] 將上述重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞大腸桿菌。所述宿主細(xì)胞優(yōu)選為大腸桿菌 Rosetta，得到重組菌株Rosetta(pGEX-f ip_sch3)。
[0013] 本發(fā)明還提供了包含真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3基因的重組菌株，優(yōu)選為重組菌 株Rosetta(pGEX-fip_sch3)。
[0014] 本發(fā)明還提供了制備真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3的方法，包括以下步驟：
[0015] 1)將含F(xiàn)IP_sch3基因的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，得重組菌株；
[0016] 2)培養(yǎng)重組菌株，誘導(dǎo)重組真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3的表達(dá)；以及
[0017] 3)回收并純化所表達(dá)的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3。
[0018] 通過(guò)如下實(shí)驗(yàn)證明了本發(fā)明的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-SCh3的功能：
[0019] 1、CCK法測(cè)定所述蛋白的體外抗腫瘤活性
[0020] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:FIP-sch3對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞具有毒性作用，半致死計(jì)量IC5Q為10.80yg/ mL(圖2);8μg/ml的不同來(lái)源的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白比較實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，F(xiàn)IP-sch3對(duì)A549的毒 性作用略弱于靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白LZ-8,顯著高于金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋白FlP-fve。
[0021]結(jié)論:FIP_sch3對(duì)腫瘤細(xì)胞具有極強(qiáng)的高毒性作用(實(shí)施例3)。
[0022] 2、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡分析
[0023] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:FIPs對(duì)A549細(xì)胞具有凋亡作用，8μg/ml的FIP-sch3、LZ-8和FIP-fve處 理A549細(xì)胞24h后，凋亡率分別為45.69 %、38.82 %、10.88 % (圖3)。
[0024] 結(jié)論:FIP-sch3對(duì)腫瘤細(xì)胞A549具有凋亡作用，且其誘導(dǎo)凋亡作用顯著高于LZ-8 和FlP-fve，是極具潛力的抗腫瘤藥物(實(shí)施例4)。
[0025] 3、抑制腫瘤細(xì)胞迀移檢測(cè)
[0026] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：繼續(xù)培養(yǎng)24h后，未處理細(xì)胞(NC)劃出傷口明顯愈合，8μg/ml的FIP-sch3和LZ-8處理后，傷口愈合現(xiàn)象不明顯；而8μg/ml的FIP-f ve處理A549細(xì)胞24h后，傷口愈 合情況極為顯著，與陰性對(duì)照極為相似(圖4)。
[0027] 結(jié)論:FIP-sch3可以抑制腫瘤細(xì)胞A549迀移，F(xiàn)IP-sch3對(duì)腫瘤細(xì)胞A549的迀移抑 制作用與LZ-8相似，卻顯著強(qiáng)于FlP-fve，是極具潛力的抗腫瘤藥物(實(shí)施例5)。
[0028]本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)和有益效果：
[0029] 1、可以提供相當(dāng)數(shù)量的免疫調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)FIP_sch3純品，完全能滿足臨床與醫(yī)藥應(yīng) 用需求。
[0030] FIP-sch3在該大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中實(shí)現(xiàn)高效表達(dá)，表達(dá)量為27mg/L(實(shí)施例2);經(jīng) 柱純化后，蛋白質(zhì)的含量達(dá)到電泳純（圖1)。而目前通常從幾千克食用菌中只能提取毫克級(jí) 蛋白。
[0031] 2、FIP-SCh3具有抗腫瘤活性，具有治療應(yīng)用潛力。
[0032]抗腫瘤效應(yīng)檢測(cè)結(jié)果表明，F(xiàn)IP-sch3對(duì)A549具有毒性作用（實(shí)施例3)，可以誘導(dǎo) A549凋亡（實(shí)施例4)，抑制A549迀移(實(shí)施例5);其抗腫瘤效應(yīng)與靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白LZ-8相 當(dāng)，卻顯著高于金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋白FlP-fve，極具應(yīng)用潛力。
[0033] 3、首次運(yùn)用基因工程手段提供了一個(gè)新的真菌來(lái)源的免疫調(diào)節(jié)蛋白。
[0034] 由于運(yùn)用基因工程手段來(lái)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3產(chǎn)品還未見(jiàn)報(bào) 道。本發(fā)明首次提供了一個(gè)新的真菌來(lái)源的免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3。而且，根據(jù)本發(fā)明的技 術(shù)方案就可以實(shí)現(xiàn)利用基因工程手段生產(chǎn)真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3。
【附圖說(shuō)明】：
[0035] 圖1~圖4是對(duì)本發(fā)明純化制備的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3進(jìn)行分析和功能實(shí) 驗(yàn)，其中：
[0036] 圖1是superdex 75凝膠過(guò)濾和SDS-PAGE分析：其中，圖la為superdex 75凝膠過(guò) 濾，推測(cè)FIP-sch3活性蛋白為二聚體;圖lb為SDS-PAGE分析。
[0037]圖2是FIP-sch3蛋白抑制腫瘤細(xì)胞A549增殖的CCK檢測(cè)結(jié)果。
[0038] 圖3是FIP-sch3蛋白誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞A549凋亡結(jié)果。
[0039] 圖4是FIP-sch3蛋白抑制腫瘤細(xì)胞A549迀移結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0040]以下實(shí)施例僅用于舉例說(shuō)明本發(fā)明的方法，并不限制本發(fā)明的范圍。
[0041 ] 試驗(yàn)材料
[0042] 1、細(xì)胞株:人肺腺癌細(xì)胞A549，購(gòu)買(mǎi)于北京協(xié)和醫(yī)院細(xì)胞資源中心。
[0043] 2、試劑耗材
[0044] CCK試劑盒:全式金細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒；
[0045] TransDetct? Annexin V-FITC/PI Cell Apoptosis Detection Kit:全式金細(xì)胞 凋亡檢測(cè)試劑盒；
[0046] PCR引物合成和基因測(cè)序均由上海生工生物公司完成；
[0047] 酶類(lèi)：內(nèi)切酶EcoRI和Xhol購(gòu)自TaKaRa公司，連接酶購(gòu)自Invitrogen公司； Prescission Protease由實(shí)驗(yàn)室制備；
[0048]儀器:離心機(jī)、振蕩搖床、顯微鏡、酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀；
[0049] 生化試劑:氨芐青霉素、青霉素(鈉鹽）、硫酸鏈霉素、溴酚蘭、噻唑蘭(MTT )、胎牛血 清(FBS)，二甲基亞砜(DMS0)為Sigma產(chǎn)品。
[0050] 3、培養(yǎng)基
[0051 ] 高糖DMEM培養(yǎng)液，加入10%FBS、100U/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素，0.22μπι濾膜過(guò) 濾滅菌后4°C保存。
[0052]說(shuō)明：以下實(shí)施例中未作具體說(shuō)明的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，均參照《分子克隆實(shí)驗(yàn) 指南》(第三版)J.薩姆布魯克一書(shū)中所列的具體方法進(jìn)行，或者按照試劑盒和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 進(jìn)行。
[0053] 本實(shí)施例中的抗腫瘤效應(yīng)檢測(cè)，均以靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白（LZ-8)和金針菇免疫調(diào)節(jié) 蛋白（FlP-fve)為陽(yáng)性對(duì)照。
[0054] 實(shí)施例1真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3編碼基因篩選、克隆和表達(dá)載體構(gòu)建
[0055] 以金針菇真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FlP-fve為誘餌，在NCBI真菌基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行 BLAST比對(duì)，在子囊真菌Stachybotrys chartarum IBT 7711基因組中發(fā)現(xiàn)與FlP-fve同源 性為52.7%的FIP-sch3編碼基因，基因全長(zhǎng)339bp(336bp外加一個(gè)終止密碼子TAA)，其DNA 序列如SEQ ID N0.2所示。經(jīng)密碼子優(yōu)化后，合成基因。
[0056] 設(shè)計(jì)并合成引物卩1卩-8(^3-卩^(3〇1?1):5'-〇0：6厶八1'1'(：1'0：6(：1'〇厶6八(：-3'和 FIP-sch3-R(XhoI):5'-AAA AAC TCG AGC TTC CAT TGG ACT AG-3'，用以上引物擴(kuò)增合成 基因。用EcoRI和Xhol酶切PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，獲得目標(biāo)基因 f ip-sch3，將目標(biāo)基因連接到經(jīng)相同 酶切的表達(dá)載體PGEX-6T-1，獲得含有真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3基因的重組表達(dá)載體 pGEX-f ip_sch3，轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosetta，獲得重組菌株Rosetta(pGEX_fip_sch3)。
[0057] 實(shí)施例2真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3表達(dá)純化
[0058] 取陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子R0setta(pGEX-fip-sch3)菌株，接種于20mL含有50μg/ml氨芐的LB 培養(yǎng)液中，37°C200rpm過(guò)夜活化。次日，以2%的接菌量，接種于200mL含有50μg/ml氨芐的LB 培養(yǎng)液中，37 °C200rpm培養(yǎng)至0D6QQ為0 · 8-1 · 0，加 0 · ImM IPTG，20°C200rpm過(guò)夜誘導(dǎo) 16h后， 離心收集菌體。0.2體積的PBS溶解菌體，超聲波破碎，離心收集上清。GST柱純化后，用100U/ ml的Prescission Protease 4°C過(guò)夜酶切，去除GST標(biāo)簽。過(guò)Q柱和分子篩純化FIP_sch3蛋 白。
[0059]實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0060] 經(jīng)以上表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)FIP-sch3蛋白的理論分子量為14. lKDa(包括部分載體序列 和限制酶切位點(diǎn)翻譯氨基酸）；FIP-sch3在大腸桿菌中高效表達(dá)，表達(dá)量為27mg/L;經(jīng)柱純 化后，蛋白質(zhì)的含量達(dá)到電泳純（圖1)。
[0061] 結(jié)論：
[0062] FIP_sch3在該大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中實(shí)現(xiàn)高效表達(dá)，因此可以快速提供相當(dāng)數(shù)量的 蛋白質(zhì)純品，以滿足臨床與醫(yī)藥應(yīng)用需求。
[0063] 實(shí)施例3CCK法測(cè)定真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3體外抗腫瘤活性 [0064]實(shí)驗(yàn)方法：
[0065] 1)在DMEM培養(yǎng)液中傳代培養(yǎng)A549細(xì)胞，計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞，稀釋到終濃度為2.5X105 細(xì)胞/ml。
[0066] 2)在96孔培養(yǎng)板內(nèi)每孔加入100μ1腫瘤細(xì)胞懸浮液，100μ1重組蛋白樣品，終濃度 為0、1、2、4、8、16、32和64μg/ml。同時(shí)加入相同方法制備的8yg/mL靈芝和金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋 白LZ-8和FlP-fve做陽(yáng)性對(duì)照。每個(gè)樣品5個(gè)平行。
[0067] 3)混勻后，放于5 % C02，37 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
[0068] 4)24小時(shí)后，CCK法檢測(cè)細(xì)胞活性(具體操作參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)）。
[0069]實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0070] FIP-sch3對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞具有毒性作用，半致死計(jì)量IC5Q為10.80yg/mL(圖2);8 μg/ml的不同來(lái)源的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白比較實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，F(xiàn)IP-sch3對(duì)A549的毒性作用略 弱于靈芝免疫調(diào)節(jié)蛋白LZ-8,顯著高于金針菇免疫調(diào)節(jié)蛋白FlP-fve。
[0071] 結(jié)論：
[0072] FIP_sch3對(duì)腫瘤細(xì)胞具有極強(qiáng)的高毒性作用。
[0073] 實(shí)施例4真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡分析 [0074]實(shí)驗(yàn)方法：
[0075] 1)在5 %⑶2，37 °C培養(yǎng)箱中用DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)A549細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)，使其終濃度為 1 xlO6 細(xì)胞/ml。
[0076] 2)在6孔培養(yǎng)板中每孔加入0.8ml腫瘤細(xì)胞懸浮液，分別加入0.2ml終濃度為8yg/ ml的重組真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3、LZ-8和FlP-fve，以正常生長(zhǎng)的腫瘤細(xì)胞做陰性對(duì) 照;在5 % C02，37 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
[0077] 3)去上清，胰酶消化，3000rpm，室溫離心5分鐘，收集腫瘤細(xì)胞。凋亡檢測(cè)試劑盒檢 測(cè)凋亡，具體操作參見(jiàn)說(shuō)明書(shū)。
[0078]實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0079] FIPs對(duì)A549細(xì)胞具有凋亡作用，8μg/ml的FIP-sch3、LZ-8和FIP-fve處理A549細(xì)胞 24h后，凋亡率分別為45.69%、38· 82%、10.88% (圖3)。
[0080] 結(jié)論：
[0081 ] FIP-sch3對(duì)腫瘤細(xì)胞A549具有凋亡作用，且其誘導(dǎo)凋亡作用顯著高于LZ-8和FIP- fve，是極具潛力的抗腫瘤藥物。
[0082]實(shí)施例5真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP_sch3抑制腫瘤細(xì)胞迀移檢測(cè) [0083]實(shí)驗(yàn)方法：
[0084] 4)在5 %⑶2，37 °C培養(yǎng)箱中用DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)A549細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)，使其終濃度為 5xl05 細(xì)胞/ml。
[0085] 5)在6孔培養(yǎng)板中加入上述腫瘤細(xì)胞懸浮液，在5 %⑶2,37 °C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小 時(shí)，細(xì)胞平鋪長(zhǎng)滿，用tip頭在培養(yǎng)板單層細(xì)胞中間劃線，PBS洗去懸浮細(xì)胞和碎片。
[0086] 6)分別加入終濃度為8μg/ml的重組真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白FIP-sch3、LZ-8和FlP-fve， 以正常生長(zhǎng)的腫瘤細(xì)胞做陰性對(duì)照;在5%C02，37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
[0087] 7)顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并拍照。
[0088] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
[0089] 繼續(xù)培養(yǎng)24h后，未處理細(xì)胞(NC)劃出傷口明顯愈合，8μg/ml的FIP-sch3和LZ-8處 理后，傷口愈合現(xiàn)象不明顯；而8μg/ml的FIP-f ve處理A549細(xì)胞24h后，傷口愈合情況極為顯 著，與陰性對(duì)照極為相似(圖4)。
[0090]結(jié)論：
[0091] FIP-sch3可以抑制腫瘤細(xì)胞A549迀移，F(xiàn)IP-sch3對(duì)腫瘤細(xì)胞A549的迀移抑制作用 與LZ-8相似，卻顯著強(qiáng)于FlP-fve，是極具潛力的抗腫瘤藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有抗腫瘤活性的真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO. 1所示。2. 權(quán)利要求1所述的蛋白在制備免疫調(diào)節(jié)劑和抗腫瘤制劑中的應(yīng)用。3. 權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其中所述腫瘤是肺癌。4. 編碼權(quán)利要求1所述蛋白的基因，其堿基序列如SEQ ID NO.2所示。5. 含權(quán)利要求4所述基因的重組表達(dá)載體。6. 權(quán)利要求5所述的重組表達(dá)載體，是權(quán)利要求4所述基因插入表達(dá)載體pGEX-6T-l所 得到的重組表達(dá)載體。7. 權(quán)利要求6所述的重組表達(dá)載體，所述插入表達(dá)載體，是插入pGEX-6T-l上的EcoRI和 Xhol限制性酶切位點(diǎn)之間。8. 含權(quán)利要求4所述基因的宿主細(xì)胞。9. 含權(quán)利要求4所述基因的重組工程菌株。10. 含權(quán)利要求1所述真菌免疫調(diào)節(jié)蛋白的制劑。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK106046128SQ201610566111
【公開(kāi)日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年7月18日
【發(fā)明人】李淑英, 辛鳳姣, 王鳳忠, 江中豪, 孫麗超, 黃穎, 劉欣
【申請(qǐng)人】中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所