一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物中含有鹽酸丙咪嗪和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，鹽酸丙咪嗪、化合物(Ⅰ)單獨(dú)作用時(shí)，可以調(diào)節(jié)血脂治療動(dòng)脈粥樣硬化；鹽酸丙咪嗪和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時(shí)，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專利說明】
一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及鹽酸丙咪嗪的新用途，具體涉及鹽酸丙咪嗪的藥 物組合物及其醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 鹽酸丙咪嗪，適用于治療遲緩性的內(nèi)因性抑郁癥，反應(yīng)性抑郁癥及更年期抑郁癥， 還可用于兒童遺尿癥。鎮(zhèn)靜作用和抗膽堿均屬中等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，該藥物組合物中含鹽酸丙 咪嗪和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，鹽酸丙咪嗪和該天然產(chǎn)物可協(xié)同治療動(dòng)脈粥樣硬化。
[0004] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0005] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0007] -種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，包括鹽酸丙咪嗪、如權(quán)利要求1所述的化合物（I) 和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0008] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤(rùn)滑劑。
[0009] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0010] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將黑種草子粉碎，用75~85% 乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇 萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物 用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集70% 洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠 分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d) 步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體 積百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮 得到化合物(I)。
[0011] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用80%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0012] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0013]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進(jìn)行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0014] 上述化合物(I)在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 上述鹽酸丙咪嗪的藥物組合物在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0017] 本發(fā)明提供的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物中含有鹽酸丙咪嗪和一種結(jié)構(gòu)新穎的天 然產(chǎn)物，鹽酸丙咪嗪、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，可以調(diào)節(jié)血脂治療動(dòng)脈粥樣硬化;鹽酸丙咪嗪 和化合物(I)聯(lián)合作用時(shí)，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0019] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0020]分離方法：（a)將黑種草子(2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提?。?5LX3次），合并提 取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3L X 3次）、乙酸乙酯(3L X 3次)和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1 (10個(gè)柱體積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、25:1 (10 個(gè)柱體積)和15:1 (8個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分 4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (10個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積)和1:1 (6個(gè) 柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0021] 結(jié)構(gòu)確證:冊(cè)431-]\^顯示[]\?^]+為111/2 341.2128，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C20H3Q〇3，不飽和度為6。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρπι，DMS〇-d 6，500MHz): H-1 (1 · 52，m)，H-1 (1.78，m)，H-2(2.27，m)，H-2(2.31，m)，H-5(1.17，br，d，J=10.5)，H-6(1.39，m)，H-6(1.43， m)，H-7(1.44，m)，Η-7(1·51，m)，H-9(1.49，m)，Η-11(4·21，br，dd，J=12.0,6.5)，H-12 (1.68，m)，H-12(1.82，ddd，J=13.0,9.0，1.5)，H-13(2.63，m)，H-14(1.01，dd，J = 12.0， 4.5)，H-14(2.15，br，d，J=12.0)，H-15(1.96，dd，J=12.8,2.0)，H-15(2.08，d，J=12.8)， H-17(4.72，br，s)，H-17(4.81，br，s)，H-18(3.19，d，J=11.4)，H-18(3.45，d，J=11.4)，H-19(l.ll，s)，H-20(0.82，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) δ。(ppm，DMS〇-d6，12 5MHz): 40 · 5 (CH2，1 -C)， 34.2(CH2,2-C)，216.3(C，3-C)，50.8(C，4-C)，53.1(CH，5-C)，20.4(CH2,6-C)，42.1(CH2,7-C)，46.5(C，8-C)，61.2(CH，9-C)，40.7(C，10-C)，70.3(CH，n-C)，42.1(CH2，12-C)，44.0 (CH，13-C)，39.8(CH2，14-C)，49.2(CH2，15-C)，155.6(C，16-C)，102.7(CH2，17-C)，67.1 (CH2，18-C)，18.4(CH3，19-C)，16.3(CH3,20-C)。紅外光譜表明該化合物含有羥基和羰基 (3441cm- 1 和1748cm-q。1!!-匪 R 譜顯示了兩個(gè)甲基信號(hào)WH0.82(s，H3-20)和1.11(s，H3-19)]，一個(gè)烯屬亞甲基信號(hào)[6財(cái).72(1^，8，!1-17)和4.81(1^，8，!1-17)]，一個(gè)含氧亞甲基信 號(hào)[5!13.19((1，1=11.4泡，!1-18)和3.45((1，1=11.4泡，!1-18)]，一個(gè)含氧次甲基信號(hào)[3 財(cái).21(1^，(1(1，1=12.0,6.5他，!1-11)]。此外， 13(：-匪1?譜顯示出20個(gè)碳信號(hào)，包括兩個(gè)甲基， 九個(gè)亞甲基(一個(gè)烯烴亞甲基，一個(gè)含氧亞甲基），四個(gè)次甲基(一個(gè)含氧次甲基），以及五個(gè) 季碳(一個(gè)羰基碳，一個(gè)烯烴季碳KHMBC譜中H 2-17與C-13和C-15;H-14b〇H2.15)與07，(：-9，(：-12，(：-15和(：-16 ;以及!1-11與(：-9，(：-10和(：-13的相關(guān)性表明環(huán)外亞甲基位于(：-16/(：-17，C-11位連有一個(gè)羥基。此外，H2-18與C-3，C-4，C-5和C-19的相關(guān)性表明伯羥基位于C-18 位上。通過分析Η-11的親合常數(shù)(br，dd，J = 12.0，6.5Hz)可知C-l 1位的羥基為α構(gòu)型。綜合 氫譜、碳譜、HMBC譜和NOESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下 所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過Ε⑶試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。
[0022]該化合物化學(xué)式及碳原子編號(hào)如下：
[0024] 實(shí)施例2:藥理作用
[0025]本實(shí)施例使用VD3和高脂飼料造動(dòng)脈粥樣硬化(AS)大鼠模型，檢測(cè)動(dòng)物血脂含量， 觀察藥物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療作用。
[0026] 1、材料與方法
[0027] 1.1動(dòng)物
[0028] SD大鼠，雄性，50~55d，體質(zhì)量(200 ± 20)g，由廣東省醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
[0029] 1.2試劑與樣品
[0030] 鹽酸丙咪嗪購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所?；衔铮↖)自制，制備方法見實(shí)施例1。 復(fù)方丹參片:將藥片進(jìn)行研磨，加水溶解，制成混懸液。VD 3、膽酸鈉、膽固醇、丙基硫氧嘧啶： 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司。
[0031] 1.3儀器
[0032] 酶標(biāo)儀（iMARK，BI0-RAD )、顯微鏡（OLYMPUS，DSX500 )、烘干箱（南京萊布科技實(shí)業(yè) 有限公司，DZF-6020)
[0033] 1.4大鼠分組及模型制備
[0034]將60只雄性SD大鼠常規(guī)飼養(yǎng)1周后，觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物狀態(tài)穩(wěn)定，將其隨機(jī)分為6組，每 組10只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(復(fù)方丹參片溶液，25.92mg/mL)和鹽 酸丙咪嗪組(80mg · kg^1)、化合物（I)組（80mg · kg^1)、鹽酸丙咪嗪與化合物（I)組合物組 【40mg · kg<鹽酸丙咪嗪+40mg · kg<化合物（I)】。各組按照體質(zhì)量進(jìn)行腹腔注射造模，其中 空白對(duì)照組注射生理鹽水，其余各組注射VD3。并于造模當(dāng)天除空白對(duì)照組外各組均給予高 脂飼料喂養(yǎng)。高脂飼料制作:將普通飼料粉碎成粉末狀，按照配方添加藥物:配方為:3 %膽 固醇，0.5%膽酸鈉，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖，10%豬油。加水調(diào)勻，制作成條形，放入 烘干箱中烘干。各組按體質(zhì)量灌胃給藥，空白對(duì)照組每天給予普通飼料喂養(yǎng)，灌胃給生理鹽 水;模型對(duì)照組給生理鹽水灌胃；其余藥物組相應(yīng)藥物灌胃，給藥時(shí)間為8周。
[0035] 1.5試驗(yàn)材料獲取
[0036] 8周后禁食24h，進(jìn)水8h，稱量動(dòng)物體質(zhì)量，麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，心臟取血，取動(dòng)脈及心臟 組織。離心血清，5min，5000r/min，取上清，放于-20°C備用。動(dòng)脈及心臟組織置于甲醛固定 液中備用。
[0037] 1.6血脂含量檢測(cè)
[0038] ELISA法檢測(cè)血脂含量，按照說明書中步驟進(jìn)行操作，在酶標(biāo)儀上觀測(cè)結(jié)果。
[0039] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0040] 應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差土s)表 不。
[0041 ] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0042] 2.1對(duì)AS模型大鼠血脂的影響
[0043]血清總膽固醇（TC)、高密度與低密度脂蛋白膽固醇(HDL-C與LDL-C)及三酰甘油 (TG)是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病4項(xiàng)基本指標(biāo)。
[0044] 與空白對(duì)照組比，模型對(duì)照組大鼠 TG、TC、LDL-C水平顯著升高(P<0.01)，HDL-C水 平顯著降低(p<0.01)，說明造模成功。與模型對(duì)照組比，陽(yáng)性對(duì)照組大鼠 TG、TC、LDL-C水平 顯著降低(P<〇.〇l)，HDL_C水平顯著升高(P<0.01);與模型對(duì)照組比，鹽酸丙咪嗪組、化合 物（I)組大鼠 TG、TC、LDL-C水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05);與模型對(duì)照組相 比，鹽酸丙咪嗪與化合物（I)組合物組大鼠 TG、TC、LDL-C水平顯著降低(P< 0.01)，HDL-C水 平顯著升高(Ρ<〇.〇1)。結(jié)果見表1。
[0045] 表1對(duì)AS模型大鼠血脂的影響（? 土s，n = 10，mmol/L)
[0046]
[0047] 上述結(jié)果表明，鹽酸丙咪嗪、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，可以調(diào)節(jié)血脂治療動(dòng)脈粥樣 硬化;鹽酸丙咪嗪和化合物（I)聯(lián)合作用時(shí)，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動(dòng)脈粥 樣硬化的藥物。
[0048]上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物α)，2. -種鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，其特征在于:包括鹽酸丙咪嗪、如權(quán)利要求1所述的 化合物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受的載 體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載 體或潤(rùn)滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、 膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射 劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將黑 種草子粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸 乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物； (b)步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗 脫12個(gè)柱體積，收集70 %洗脫液，減壓濃縮得70 %乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70 %乙醇 洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、 15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵 合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用80%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求2~4任一所述的鹽酸丙咪嗪的藥物組合物在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥 物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C07C45/79GK105949044SQ201610372938
【公開日】2016年9月21日
【申請(qǐng)日】2016年5月28日
【發(fā)明人】蔣靈錕
【申請(qǐng)人】蔣靈錕