Ahu-377結(jié)晶型游離酸及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種NEP抑制劑AHU-377結(jié)晶型游離酸及其 制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 中性內(nèi)肽酶（EC3. 4. 24. 11 ;腦啡肽酶；必肽酶；NEP)是一種可以在芳族氨基酸的 氨基末端上裂解各種肽底物的包含鋅的金屬蛋白酶。這種酶的底物非限制性地包括心鈉素 (ANF，也被稱為ANP)、腦鈉肽（BNP)、met和leu腦啡肽、緩激肽、神經(jīng)激肽A和P物質(zhì)。
[0003] ANF是一族血管舒張、利尿和抗高血壓的肽類，一種形式--ANF99-126是在心臟 擴張情況中由心臟釋放的循環(huán)肽激素。ANF的功能是維持鹽和水的體內(nèi)平衡以及調(diào)節(jié)血壓。 ANF在循環(huán)中被至少兩個過程迅速滅活：受體-介導(dǎo)的清除和在NEP進行的酶滅活。NEP抑 制劑增強了實驗動物進行藥理學(xué)ANF注射后的低血壓、利尿、促尿鈉排泄和血漿ANF響應(yīng)。 通過兩種特定的NEP抑制劑進行的ANF的增強，1988年，美國專利US4749688中一般性地公 開了可以用NEP來增強ANF。同年，美國專利US4740499中公開了噻奧芬（thiorphan)和凱 拉托芬也可以用于增強心房肽的應(yīng)用。此外，NEP抑制劑可降低血壓和發(fā)揮ANF-樣作用如 在一些形式的實驗性高血壓中的利尿和增加環(huán)鳥苷3'，5'_單磷酸（cGMP)排泄的作用。因 為ANF的抗體將抵消血壓的降低，所以NEP抑制劑的抗高血壓作用是通過ANF介導(dǎo)的。長 期和不進行控制的高血壓血管疾病最終將導(dǎo)致靶器官如心和腎的各種病理學(xué)改變。持續(xù)的 高血壓也能導(dǎo)致中風(fēng)的發(fā)生率增加。因此，強烈需要對抗高血壓治療的功效進行評估，即對 除了血壓降低以外的其它心血管終點事件進行檢查以進一步發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療的益處。
[0004] 1993年，Gary Ksander等在美國專利US5217996中公開了一類聯(lián)芳基取代的4-氨 基丁酸衍生物，該類化合物被發(fā)現(xiàn)具有明顯的NEP抑制活性，其中最具代表性的一個化合 物為N-(3-羧基-1-氧代丙基）-(4S)-對-苯基苯基甲基）-4-氨基-2R-甲基丁酸乙酯 (又稱 AHU-377)。
[0005]
[0006] 在實際生產(chǎn)制備過程中AHU-377通常以油狀物出現(xiàn)，不利于保存及后續(xù)藥物開 發(fā)。AHU-377粗品經(jīng)叔丁醇酯化、氫氧化鈉堿水解后得到的AHU-377鈉鹽經(jīng)二氯甲烷/正 己烷重結(jié)晶后聚集狀態(tài)不明，而且經(jīng)發(fā)明人深入研究發(fā)現(xiàn)AHU-377鈉鹽吸濕性相當(dāng)大，物 質(zhì)不穩(wěn)定且不利于儲存，因此，AHU-377作為藥物活性成分，其產(chǎn)品質(zhì)量、物質(zhì)穩(wěn)定性、儲存 或稱量等均存在很大問題，其鈉鹽也沒有解決上述問題，雖然美國專利US5217996也公開 了 AHU-377還可以制備成各種鹽型化合物，例如堿金屬鹽、堿土金屬鹽、胺鹽、烷基胺鹽、羥 烷基胺鹽等，但是，主要還是從AHU-377含有一個羧基的化學(xué)結(jié)構(gòu)上推斷得出，并未實際得 到各種除鈉鹽之外的其它鹽型化合物，不能解決AHU-377產(chǎn)品質(zhì)量差、物質(zhì)不穩(wěn)定、難以儲 存及稱量等問題。
[0007] 因此，鑒于現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，有必要對AHU-377開發(fā)出一種穩(wěn)定的游離酸聚 集狀態(tài)，以符合藥物開發(fā)的需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，改善AHU-377理化性質(zhì)，例如改善的結(jié)晶性，增加 溶解性，減少吸濕性，增強工藝可操作性，提高化學(xué)穩(wěn)定性等。發(fā)明人通過深入研究，在現(xiàn)有 技術(shù)的基礎(chǔ)上開發(fā)出了一種AHU-377結(jié)晶型游離酸，大大改善了 AHU-377的理化性質(zhì)，例如 產(chǎn)品質(zhì)量、溶解性、吸濕性、化學(xué)穩(wěn)定性等。
[0009] 本發(fā)明第一方面提供一種AHU-377結(jié)晶型游離酸（指定為晶型I)，其X線粉末 衍射圖包括位于 23·70±0·2°，15·84±0·2°，20·84±0·2° 和 8·56±0·2°，的衍射角 (2 Θ )處的峰。
[0010] 作為進一步優(yōu)選的方案，優(yōu)選其X射線粉末衍射圖還包括位于17. 06±0. 2° ,25. 98±0·2°，18·01±0·2°，9·42±0·2° 和 26·91±0·2° 的衍射角（2Θ)處的峰。
[0011] 作為更進一步優(yōu)選的方案，優(yōu)選其X射線粉末衍射圖進一步還包括位于34. 70±0 .2。，21.83±0.2。，25.69±0.2。，25.33±0.2。，11.67±0.2。和26.24±0.2。的衍射角 (2 Θ )處的峰。
[0012] 作為更進一步優(yōu)選的方案，最優(yōu)選其X射線粉末衍射圖與圖1中顯示的衍射角 (2 Θ )處的峰基本上相同，其X射線粉末衍射數(shù)據(jù)如表1所示：
[0013] 表 1
[0014]

[0015] 本文所使用的關(guān)于X射線衍射峰位置的術(shù)語"基本上相同的"意指考慮典型的峰 位置和強度可變性。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，峰位置（2 Θ)將由于XRTO儀器不同， 而造成測量值有所變化，有時這種變化達有時多達0.2°。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解， XRro樣品制樣方法，XRro儀器，樣品結(jié)晶度，樣品用量以及晶體擇優(yōu)取向等因素將導(dǎo)致樣 品XRro衍射圖中相對峰強度的改變。
[0016] 本發(fā)明第二方面提供一種AHU-377結(jié)晶型游離酸的制備方法，包括如下步驟，
[0017] 1)將AHU-377游離酸溶解在合適的有機溶劑中；
[0018] 2)降低溶液體系溫度，和/或加入晶種，和/或加入適量反溶劑至溶液出現(xiàn)渾濁， 析晶；
[0019] 3)固液分離得到AHU-377結(jié)晶型游離酸。
[0020] 作為進一步優(yōu)選的方案，包括如下步驟，
[0021] 1)將AHU-377游離酸在常溫或加熱狀態(tài)下溶解在合適的有機溶劑中；
[0022] 2)降低步驟1)中溶液體系的溫度，和/或加入晶種，析晶；
[0023] 3)固液分離得到AHU-377結(jié)晶型游離酸。
[0024] 作為進一步優(yōu)選的方案，包括如下步驟，
[0025] 1)將AHU-377游離酸溶解在合適的有機溶劑中；
[0026] 2)將步驟1)中的溶液與反溶劑相混合；
[0027] 3)固液分離得到AHU-377結(jié)晶型游離酸。
[0028] 優(yōu)選的，步驟2)中與反溶劑相混合之前在反溶劑中預(yù)先加入AHU-377結(jié)晶型游離 酸晶種。
[0029] 所述的"相混合"是指將步驟1)中的溶液滴加到反溶劑之中或者將反溶劑滴加到 步驟1)中的溶液之中。
[0030] 作為更進一步優(yōu)選的方案，上述制備方法中步驟1)所述合適的有機溶劑為選自 醚類、環(huán)醚類、酯類、鹵代烷烴、苯類有機溶劑或其混合物，包括但不限定于以下溶劑：自乙 酸乙酯、乙酸異丙酯、二氯甲烷、三氯乙烷、四氯化碳、甲基叔丁基醚、異丙醚、苯、甲苯、二甲 苯或其組合物，優(yōu)選自乙酸異丙酯、二氯甲烷、甲基叔丁基醚、異丙醚或其組合物。
[0031] 作為更進一步優(yōu)選的方案，上述制備方法中步驟2)所述反溶劑是指極性較小的 有機溶劑，包括但不限定于以下溶劑：正庚烷、正己烷、異辛烷、戊烷、環(huán)己烷、環(huán)戊烷、乙醚 或其組合物；優(yōu)選自正庚烷、正己烷、環(huán)己烷、乙醚或其組合物。
[0032] 作為進一步優(yōu)選的方案，上述制備方法中"溶解"是指本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員一 般的操作，通?？梢赃m當(dāng)?shù)募訜崾笰HU-377游離酸原料溶解或溶清，或者在常溫下（20~ 25°C )加大溶劑的用量來使AHU-377游離酸原料溶解或溶清。
[0033] 作為更進一步優(yōu)選的方案，所述適當(dāng)?shù)募訜醿?yōu)選將溶劑加熱至40~80°C使 AHU-377游離酸原料溶解或溶清。
[0034] 作為更進一步優(yōu)選的方案，所述加大溶劑的用量優(yōu)選結(jié)晶溶劑的加入量為 AHU-377游離酸的5-20倍體積質(zhì)量比，使AHU-377游離酸原料溶解或溶清。
[0035] 作為