色固體，mp:145-146°C
[0040]核磁共振譜圖數(shù)據(jù):4 NMR(400MHz，DMS〇-d6)S:7.79(t，J = 9.5Hz，1H),7.44(td，J = 9.8,7.0Hz，lH)，7.35(dd，J=18.1，9.1Hz，lH)，5.03~4.78(m，2H，），4.48~3.86(m，7H)， 2·95~2·57(m，4H)，2·03~1·85(m，2H)，1·44(s，4H)。
[0041 ] 2、藥理藥效實(shí)驗(yàn)
[0042] 對(duì)經(jīng)上述方法制備的5-NA-SG的藥效學(xué)作用通過5-NA-SG對(duì)鏈脲佐菌素(STZ)所致 的小鼠糖尿病模型的降血糖和N0釋放作用來實(shí)現(xiàn)。
[0043] 1)實(shí)驗(yàn)材料和儀器
[0044]材料：
[0045] 鏈脲佐菌素（Streptozocin，STZ，美國Sigma公司），西格列汀(武漢鴻?？翟噭┯?限公司），5-NA-SG，一水合梓檬酸、二水合梓檬酸三鈉均為分析純。
[0046]儀器：
[0047]安穩(wěn)血糖儀及配套血糖試紙(三諾生物傳感股份有限公司），紫外-可見分光光度 計(jì)等。
[0048] 動(dòng)物：
[0049] 昆明小鼠（20.0±2.0g)。
[0050] 2)實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果
[0051] 糖尿病小鼠模型的建立
[0052]小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3d，禁食12h，腹腔注射STZ(使用0 . lmol/L，pH4.5檸檬酸緩沖液， 200mg/kg)72h后禁食611測血糖，血糖大于16.0mmol/L，并出現(xiàn)多飲、多食、體重減輕為造模 成功。
[0053] 0 · lmmol/L pH4 · 5檸檬酸緩沖液的配制:A液的配制（0 · lmol/L檸檬酸水溶液）：一 水合檸檬酸2.10g加入蒸餾水至100ml A液的配制(0. lmol/L檸檬酸三鈉水溶液）：二水合檸 檬酸三鈉2.94g加蒸餾水至lOOmLj. lmol/L檸檬酸水溶液與0. lmol/L檸檬酸三鈉水溶液的 按體積比1:1.44進(jìn)行混合，即可配制形成0. lmmol/L pH4.5檸檬酸緩沖液。
[0054] STZ溶液配制：以0.1mm〇l/L pH 4.5檸檬酸緩沖液溶解，配制成20mg/mL的溶液，冰 浴，避光，半小時(shí)內(nèi)注射完。
[0055] 3)糖尿病小鼠的降血糖藥效學(xué)研究
[0056] 取糖尿病成模小鼠，分別稱重并測量空腹血糖值，按照體重、血糖值相近的原則分 為3組:模型組、西格列汀組、活性化合物組(5-NA-SG)，再取一組正常小鼠為空白組，每組8 只，西格列汀組和5-NA-SG組每天灌胃給藥一次，空白組和模型組灌胃等劑量蒸餾水。連續(xù) 灌胃15天，分別在第0天、第7天、第14天斷尾，用血糖測試儀測定血糖值，第15天灌胃給藥后 6小時(shí)摘眼球取血，離心取血漿。
[0057]給藥劑量按照轉(zhuǎn)換公式確定劑量：
[0059] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:各組平均血糖濃度見表1，血糖濃度-時(shí)間曲線見圖1。
[0060] 表1各組小鼠平均血糖濃度(mmo 1 /L) (η = 8)
[0061]
[0062] 注:表示與空白組相比P<0.01，*表示與模型組相比P<0.05
[0063] 從表1和圖1中可以看出，與模型組比較5-NA-SG具有顯著的降血糖作用。
[0064] 4)糖尿病小鼠體內(nèi)N0釋放活性研究
[0065]用上述小鼠血漿測定血漿中N0含量，N0含量按照N0試劑盒方法進(jìn)行測定。測定結(jié) 果如表2和圖2所不。
[0066] 表2各組小鼠血清中N0的濃度（！ 土 SD ) (umo 1 /L) (η = 8)
[0067]
[0068] 注:#表示與空白組相比Ρ<0.05，*表示與模型組相比Ρ<0.05
[0069] 從表2和圖2分析可以得出，糖尿病小鼠（模型組)血漿中NO水平明顯低于空白組， 西格列汀組N0含量也明顯低于空白組，給予5-NA-SG后N0水平明顯高于模型組和西格列汀 組，而與模型組小鼠沒有明顯區(qū)別?？梢?，5-NA-SG在糖尿病小鼠體內(nèi)可以通過釋放一定量 的N0，提高糖尿病小鼠體內(nèi)的N0水平。
[0070] 綜上可見，本發(fā)明提供的一氧化氮供體型西格列汀-硝酸酯雜合體活性化合物，具 有降低血糖和補(bǔ)充一氧化氮的雙重活性。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一類西格列汀-硝酸醋雜合體，其特征在于，其結(jié)構(gòu)式如下：其中，n=l，2,3,4,5。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的西格列汀-硝酸醋雜合體，其特征在于，西格列汀-硝酸醋雜合 體中含有NO供體結(jié)構(gòu)。3. -類西格列汀-硝酸醋雜合體的制備方法，其特征在于，將西格列汀與CO-硝酷氧基 脂肪酸的活化醋采用活化醋化法，在西格列汀中間鏈的伯胺氮上，引入包含NO供體功能的 硝酷氧基脂肪酷基結(jié)構(gòu)，制得西格列汀-硝酸醋雜合體。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的一類西格列汀-硝酸醋雜合體的制備方法，其特征在于，包括 W下步驟： 1. W 漠代脂肪酸和硝酸銀為反應(yīng)原料，用乙臘溶解，在65~80°C下，避光攬拌反應(yīng)， 反應(yīng)完畢后加入過量的飽和NaCl溶液，然后抽濾，得濾液； 2) 用乙酸乙醋萃取濾液，干燥、濃縮，制得CO-硝酷氧基脂肪酸； 3) 將CO-硝酷氧基脂肪酸溶解于N，N-二甲基甲酯胺中，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽，室溫下攬拌反應(yīng)，得到活化醋； 4) 向西格列汀與4-二甲氨基化晚的混合物中加入活化醋，室溫下攬拌反應(yīng)，然后將反 應(yīng)物依次用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的化肥化溶液和飽和食鹽水洗涂，經(jīng)干燥、濃縮，再通過柱層析 分離，制得西格列汀-硝酸醋雜合體。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一類西格列汀-硝酸醋雜合體的制備方法，其特征在于，步驟 1)中漠代脂肪酸與硝酸銀的摩爾比為1: (2~2.5);步驟3)中CO-硝酷氧基脂肪酸與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽的摩爾比為1:(0.8~1.1);步驟4)中西格列汀、 4-二甲氨基化晚及活化醋的摩爾比為1: (0.1~0.3): (1~2)。6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一類西格列汀-硝酸醋雜合體的制備方法，其特征在于，步驟 1)所述避光攬拌反應(yīng)時(shí)間為8~15h;步驟3)、步驟4)所述室溫下攬拌反應(yīng)時(shí)間為10~15h。7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一類西格列汀-硝酸醋雜合體的制備方法，其特征在于，步驟 4)中柱層析分離所用的展開劑為氯仿和甲醇按25:1體積比配制而成。8. 權(quán)利要求1所述的西格列汀-硝酸醋雜合體在制備治療糖尿病的藥物和/或保健品中 的應(yīng)用。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物和/或保健品為能夠提高血清 中NO含量的藥物和/或保健品。10. 權(quán)利要求1所述的西格列汀-硝酸醋雜合體在制備治療糖尿病并發(fā)癥的藥物和/或 保健品中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一類西格列汀-硝酸酯雜合體及其制備方法和應(yīng)用，屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開的西格列汀-硝酸酯雜合體與西格列汀具有較大差異，但仍然具有降血糖活性，并且在降血糖的同時(shí)釋放NO，從而改善糖尿病狀態(tài)下NO功能缺損而誘發(fā)的血管等病變。該化合物ω-NA-SG對(duì)鏈脲所菌素(STZ)所致的小鼠糖尿病模型具有顯著持續(xù)的降糖效果，能夠快速降低血糖，并且通過釋放NO，提高血清中NO含量水平，改善糖尿病狀態(tài)下NO功能缺損，保護(hù)血管內(nèi)皮功能，從而延緩相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展，有望成為一類新型的多功能治療糖尿病及其并發(fā)癥藥物。
【IPC分類】A61P3/10, A61K31/4985, C07D487/04
【公開號(hào)】CN105503883
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201511024107
【發(fā)明人】邊曉麗, 謝允東, 陸文芳, 楊亞萍, 許艷紅, 陳建剛
【申請(qǐng)人】西安交通大學(xué)
【公開日】2016年4月20日
【申請(qǐng)日】2015年12月30日