述11為401?2、？服4〔8、40〔￥3、4了？心3、4了？243、？1'山]\1￥0(、了^-〇和比18基因 運九種中的至少一種基因；
[0056] II、所述Ml在檢測或輔助檢測動物組織和/或器官中02受體激動劑中的應用；
[0057] III、利用巧光定量PCR檢測所述Ml的的物質(zhì)在檢測或輔助檢測動物組織和/或器 官中0 2受體激動劑中的應用；
[0058] IV、利用巧光定量PCR檢測所述Ml的的物質(zhì)在制備檢測或輔助檢測動物組織和/ 或器官中@2受體激動劑產(chǎn)品中的應用；
[0059] V、檢測所述Ml的表達量或相對表達量的物質(zhì)在檢測或輔助檢測動物組織和/或 器官中@2受體激動劑中的應用；
[0060] VI、檢測所述Ml的表達量或相對表達量的物質(zhì)在制備檢測或輔助檢測動物組織 和/或器官中β2受體激動劑產(chǎn)品中的應用；
[0061] W、所述成套試劑在檢測或輔助檢測動物組織和/或器官中β2受體激動劑中的 應用；
[0062] W、所述成套試劑在制備檢測或輔助檢測動物組織和/或器官中β2受體激動劑 產(chǎn)品中的應用。
[0063] 本發(fā)明中，所述動物可為哺乳動物，如山羊。所述組織可為肌肉組織。所述02受 體激動劑可為萊克多己胺。所述內(nèi)參基因可為GAPDH。
[0064] 本發(fā)明利用和β2受體激動劑的作用機理相關(guān)的9個基因一一ADRB2 (β2腎上腺素 受體）、Ρ服ACB(cAMP依賴性蛋白激酶）、ADCY3 (腺巧酸環(huán)化酶）、ΑΤΡ1Α3 (化7Κ+-ΑΤΡ酶）、 ATP2A3Ka"-ATP酶）、PTH(甲狀旁腺激素）、MYLK(肌球蛋白輕鏈激酶）、TNF-α(腫瘤壞死 因子α)和IL1B(白介素-10)基因?qū)z測動物組織中的02受體激動劑進行了檢測，利 用本發(fā)明的方法對動物體內(nèi)@2受體激動劑的預測值與動物體內(nèi)β2受體激動劑的實測值 的相關(guān)性好，R= 0. 8924。
[0065] 本發(fā)明還分別W動物體內(nèi)β2受體激動劑的不同臨界值為界限，對含有β2受體激 動劑的樣品進行了分析，發(fā)現(xiàn)，利用運九種基因不僅可W區(qū)分@2受體激動劑的用藥與否， 還可W對樣品的0 2受體激動劑殘留水平進行界定。
[0066] 本發(fā)明在樣品中是否含有β2受體激動劑的水平上利用SPSS22. 0進行分析中對 初始分組中的案例（樣品）進行正確分類的比率為100.0%，對交叉驗證中的案例（樣品） 進行正確分類的比率為91.7%。在樣品中02受體激動劑為2gP2受體激動劑/l〇9g組織 的水平上利用SPSS22.0進行分析中對初始分組中的案例（樣品）進行正確分類的比率為 96.3%，對交叉驗證中的案例（樣品）進行正確分類的比率為77.8%。在樣品中02受體 激動劑為lOgβ2受體激動劑/109g組織的水平上利用SPSS22. 0進行分析中對初始分組中 的案例（樣品）進行正確分類的比率為88. 9%，對交叉驗證中的案例（樣品）進行正確分 類的比率為77.8%。在樣品中02受體激動劑為lOOgP2受體激動劑/l〇9g組織的水平上 利用SPSS22. 0進行分析中對初始分組中的案例（樣品）進行正確分類的比率為81. 5%， 對交叉驗證中的案例（樣品）進行正確分類的比率為77.8%。
[0067] 本發(fā)明可W有效解決β2受體激動劑的監(jiān)測難題，有效實現(xiàn)對β2受體激動劑的監(jiān) 測。
【附圖說明】
[0068] 圖1為萊克多己胺實測值與預測值相關(guān)性分析。橫坐標和縱坐標的單位均為 g/109g組織。
[0069] 圖2為主成分分析結(jié)果。treatment和control分別代表實驗組（黑點）和對照 組樣品（白點），PC1和PC3為提取的兩個主成分。
[0070] 圖3為聚類分析結(jié)果。其中，control為對照組樣品，其余均為實驗組樣品。
[0071] 圖4為W萊克多己胺含量為2g/109g組織為臨界點的主成分分析結(jié)果。白點代表 實驗組中萊克多己胺含量大于等于2g/109g組織的樣品，黑點代表實驗組中萊克多己胺含 量小于2g/109g組織的樣品，PC1和PC3為提取的兩個主成分。卵b表示g/109g組織。
[0072] 圖5為W萊克多己胺含量為2g/109g組織為臨界點的聚類分析結(jié)果。ppb表示 g/109g組織。
[0073] 圖6為W萊克多己胺含量為10g/109g組織為臨界點的主成分分析結(jié)果。白點代 表實驗組中萊克多己胺含量大于等于10g/109g組織的樣品，黑點代表實驗組中萊克多己胺 含量小于l〇g/l〇9g組織的樣品，PC1和PC3為提取的兩個主成分。ppb表示g/109g組織。
[0074] 圖7為W萊克多己胺含量為10g/109g組織為臨界點的聚類分析結(jié)果。ppb表示 g/109g組織。
[00巧]圖8為W萊克多己胺含量為100g/109g組織為臨界點的主成分分析結(jié)果。白點代 表實驗組中萊克多己胺含量大于等于100g/109g組織的樣品，黑點代表實驗組中萊克多己 胺含量小于l〇〇g/l〇9g組織的樣品，PC1和PC3為提取的兩個主成分。ppb表示g/109g組 織。
[007引圖9為W萊克多己胺含量為100g/109g組織為臨界點的聚類分析結(jié)果。卵b表示g/109g組織。
【具體實施方式】
[0077] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡 明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0078] 下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0079] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0080] 實施例1、山羊肌肉組織樣品中β2受體激動劑的檢測方法
[0081] 本實施例用到的實驗組（treatment)和對照組（control)的山羊肌肉組織樣品均 由中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所提供。實驗組的山羊肌肉組織樣品為對山羊飼喂萊克多己 胺值r.E虹enstorferGmbH(Augsburg,Germany),LR0714001C)的山羊肌肉組織，對照組的 山羊肌肉組織樣品為未對山羊飼喂萊克多己胺W及其他任何02受體激動劑的山羊肌肉組 織。
[0082] 使用超高相液相色譜-四極桿質(zhì)譜對實驗組和對照組樣品中的萊克多己胺含量 進行測定，內(nèi)參為萊克多己胺值r.E；虹ensto;rferGmbH(Augsburg,Germany),LR0714022C), 定量離子對是m/z302. 17507、m/z308. 21273。實驗組和對照組的27個山羊肌肉組織樣 品中萊克多己胺的含量實測值如表1所示。
[0083] 表1、實驗組和對照組的各山羊肌肉組織樣品中萊克多己胺含量的實測值（g/109g 組織）
[0084]
[0085]
[0086] 注：表1中，實驗組樣品中樣品名稱相同的樣品為相同萊克多己胺處理Ξ個山羊 的樣品，每行的實驗組樣品與對照組樣品（即樣品編號相同的實驗組樣品與對照組樣品） 的區(qū)別僅在于：實驗組樣品來源的山羊經(jīng)萊克多己胺處理，對照組樣品來源的山羊未經(jīng)萊 克多己胺處理，實驗組樣品來源的山羊與對照組樣品來源的山羊的其他處理均相同。
[0087] 1、檢測待測動物組織中β2受體激動劑的成套試劑的制備
[0088] 檢測待測動物組織中β2受體激動劑的成套試劑，由可W分別與和β2受體激動劑 的作用機理相關(guān)的9個基因一一ADRB2 (β2腎上腺素受體）基因、PRKACB(cAMP依賴性蛋白 激酶）基因、ADCY3 (腺巧酸環(huán)化酶）基因、ATP1A3 (化7K+-ATP酶）基因、ATP2A3 (Ca"-ATP 酶）基因、PTH(甲狀旁腺激素）基因、MYLK(肌球蛋白輕鏈激酶）基因、IL1B(白介素-10) 基因和TNF-a(腫瘤壞死因子α)基因（表2)特異結(jié)合的引物對組成，運些引物對的名稱 分別為Ρ1、Ρ2、Ρ3、Ρ4、Ρ5、Ρ6、Ρ7、Ρ8和Ρ9 (表 3);
[0089] Ρ1為由序列1和序列2所示的單鏈DNA組成的引物對；
[0090] Ρ2為由序列3和序列4所示的單鏈DNA組成的引物對；
[00川 Ρ3為由序列5和序列6所示的單鏈DNA組成的引物對；
[009引Ρ4為由序列7和序列8所示的單鏈DNA組成的引物對；
[009引 Ρ5為由序列9和序列10所示的單鏈DNA組成的引物對；
[0094]Ρ6為由序列11和序列12所示的單鏈DNA組成的引物對；
[009引 Ρ7為由序列13和序列14所示的單鏈DNA組成的引物對；
[0096] Ρ8為由序列15和序列16所示的單鏈DNA組成的引物對；
[0097] Ρ9為由序列17和序列18所示的單鏈DNA組成的引物對。
[0098] 下述步驟中用到的內(nèi)參基因為GAPDH，與內(nèi)參基因的特異結(jié)合的引物對其名稱為 Ρ10,Ρ10為由序列19和序列20所示的單鏈DNA組成的引物對。
[0099] 表2、目的基因名稱及登錄號
[0100]
[0101] 表3、引物序列及退火溫度
[0102]
[0104] 2、數(shù)據(jù)分析
[0105] 樣品前處理：
[0106] 取約Ig山羊肌肉組織液氮研磨，用Trizol法提取總RNA，用分光光度計測定RNA 的濃度和純度，用于確定下一步cDNA合成時總RNA的添加量。cDNA第一鏈的合成按照 Invitrogen公司的SuperscriptVIL0cDNA合成試劑盒說明書進行，根據(jù)總RNA濃度，確 定總RNA添加體積，使得總RNA添加量約1μg左右，反應條件為：25°C，lOmin，42°C，60min， 85°C，5min，產(chǎn)物于-20°C保存。
[0107] 巧光定量PCR:
[0108] 巧光定量PCR實驗步驟參照SYBRPremixExTaqII試劑盒燈akara，大連，中 國）進行，儀器為7500RealTime巧光定量PCR儀（AB，加拿大，美國）對于每個基因，每個 濃度梯度設(shè)計3個平行，反應體系如下：
[0109]
[0110] 結(jié)果計算：
[0111] 相對定量法計算公式為：
[011引Act=Ct(目的基因）-Ct(內(nèi)參基因）
[0113]ΔΔCt=ΔCt(實驗組）-meanΔCt(對照組）
[0114] 相對表達倍數(shù)=2AAU
[0115] W上9個基因的相對于對照組樣品的相對表達倍數(shù)如下表所示。
[0116] 表4、各基因的相對表達倍數(shù)
[0117]
[011 引

[0119]
[0120]
[0121] 注：* 即p<0. 05，** 即iKO. 01。
[0122] 由表4可知，所選的9個基因相對表達量皆存在顯著差異，因此都用于進一步的分 析。
[012引樣品中0 2受體激動劑含量的預測：
[0124] 按照如下方法對實驗組和對照組樣品中0 2受體激動劑的含量進行預測：軟件是 SPSS22. 0,方法為多元統(tǒng)計分析，回歸方程（公式9):pv= 714. 571-14. 881Xxl-2. 948X x2巧0. 71Xx3-12. 638Xx4+17. 078X巧-35. 274Xx6-17. 073X巧-1. 029Xx8-26. 623Xx9 ，xl-x9分別代表ADCY3基因、ADRB2基因、ATP1A3基因、AT