一種高egcg低咖啡因茶葉提取物制備提純工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種高EGCG低咖啡因茶葉提取物制備提純工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]茶葉中的兒茶素作為重要的一類天然活性物質(zhì)，特別是表沒食子兒茶素沒食子酸酯EGCG具有更明顯降脂、降血糖、抗氧化、抗癌功效，近年來食品藥品行業(yè)需求量逐年增加。傳統(tǒng)提制技術(shù)主要有:有機(jī)溶劑提取法:該方法是利用茶葉中不同化合物在有機(jī)溶劑中不同的溶解度進(jìn)行提取分離。該方法操作要求嚴(yán)格、工藝復(fù)雜、產(chǎn)品中有溶劑殘留。金屬離子沉淀法:該方法是利用茶多酚在一定條件下與某些金屬離子絡(luò)合生成結(jié)晶沉淀，從而從浸提液中分離出來。該方法三廢處理難度大，容易造成環(huán)境污染，產(chǎn)品中有金屬殘留。超臨界液體萃取法:利用二氧化碳在臨界點的壓力和溫度下呈現(xiàn)液體和氣體狀態(tài)，在液體狀態(tài)下萃取茶多酚。該方法存在設(shè)備昂貴、得率低問題。樹脂吸附法:利用樹脂能與茶多酚發(fā)生吸附作用的特性進(jìn)行茶多酚與其他成分分離。該方法安全、無毒、高效、可持續(xù)生產(chǎn)特點。但傳統(tǒng)工藝未能一次性分離有效兒茶素和咖啡因，通常是利用該方法制成粗品茶多酚后，再進(jìn)行有效兒茶素的純化，加工周期長，生產(chǎn)成本高。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明針對以上問題的不足提供一種技術(shù)方案，利用樹脂吸附原理，采用特殊的工藝，一次性制成高EGCG低咖啡因含量的制品，加工過程無殘留、高效，產(chǎn)品特有功效明顯，可廣泛應(yīng)用于食品藥品行業(yè)。
[0004]本發(fā)明的制備過程是:
[0005](1)選料:將綠茶片放入蒸餾釜中；
[0006](2)水浸提:往蒸餾釜中加入80-85°C水，在此溫度下水浸提30-40分鐘；
[0007](3)將上述得到的產(chǎn)物進(jìn)行固液分離；
[0008](4)在室溫下將分離后的產(chǎn)物冷卻到30-35 °C ;
[0009](5)過濾:用1000目濾網(wǎng)過濾，得到去除固體殘渣的過濾產(chǎn)物；
[0010](6)將過濾后的產(chǎn)物用裝有樹脂的上柱水洗，水流速為5-7米/小時；
[0011](7)第一次乙醇洗脫:向水洗過后的產(chǎn)物中加入2-3倍體積水稀釋，再加4?5倍產(chǎn)物重量的乙醇洗脫4-5次；
[0012](8)第二次乙醇洗脫:在第一次乙醇洗脫處理后得到的產(chǎn)物再次加入一定濃度的乙醇洗脫2_3次；
[0013](9)對第二次乙醇洗脫后的產(chǎn)物進(jìn)行濃縮干燥得到粗提物；
[0014](10)粗提物處理:取粗提物，用其重量6-9倍的15%乙醇水溶液溶解，有不溶物則過濾；
[0015](11)聚酰胺柱層析:所溶樣品以柱體積6-9:1上樣，以乙醇水溶液梯度洗脫，洗脫液PH值均以冰醋酸調(diào)節(jié)至PH3-4 ;
[0016]洗脫液分別為水:(2-3BV)、20% 乙醇(3-4BV)、30 % 乙醇(4-6BV)，
[0017]分步收集，合并無EGCG臨近雜質(zhì)的的洗脫液，濃縮備用；
[0018](12)自制MCC柱層析:以步驟(11)下的洗脫液濃縮物為原料，以2_3倍體積水稀釋，以柱體積25-35:1上樣，洗脫液為7%乙醇水溶液(以冰醋酸調(diào)節(jié)PH值至3_4)，分步收集EGCG重量百分比含量為95%以上的溶液；
[0019](13)濃縮干燥:對各段產(chǎn)品濃縮干燥，冷凍保存。
[0020]作為改進(jìn)，所述步驟(6)中的吸附樹脂可采用H103、H1020、NKA-2、NKA-9。
[0021]作為改進(jìn)，所述第一次乙醇洗脫的乙醇濃度為20%?30%。
[0022]作為改進(jìn)，所述第二次乙醇洗脫的乙醇濃度為60%?70%。
[0023]作為又一改進(jìn)，所述粗提物的兒素達(dá)40%，有效比80%，咖啡因含量低于2%。
[0024]作為又一改進(jìn)，所述步驟(9)中的濃縮干燥方法為噴霧干燥。
[0025]作為更進(jìn)一步改進(jìn)，所述洗脫后的乙醇廢液經(jīng)濃縮達(dá)到濃度70%之后可回收再利用。
[0026]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明提供一種高EGCG低咖啡因茶葉提取物制備提純工藝，最終產(chǎn)物兒茶素達(dá)50%以上，有效比95%以上，咖啡因含量低于1%;乙醇70%可回收再利用，樹脂可再生利用，環(huán)保；可規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，充分開發(fā)中國低檔茶的價值。
【具體實施方式】
[0027]實施例1
[0028](1)選料:將綠茶片放入蒸餾釜中；
[0029](2)水浸提:往蒸餾釜中加入80C水，在此溫度下水浸提30分鐘；
[0030](3)將上述得到的產(chǎn)物進(jìn)行固液分離；
[0031](4)在室溫下將分離后的產(chǎn)物冷卻到30C ;
[0032](5)過濾:用1000目濾網(wǎng)過濾，得到去除固體殘渣的過濾產(chǎn)物；
[0033](6)將過濾后的產(chǎn)物用裝有樹脂的上柱水洗，水流速為5米/小時；吸附樹脂采用H103 ；
[0034](7)第一次乙醇洗脫:向水洗過后的產(chǎn)物中加入2倍體積水稀釋，再加4倍產(chǎn)物重量的乙醇洗脫4次；乙醇濃度為20% ;
[0035](8)第二次乙醇洗脫:在第一次乙醇洗脫處理后得到的產(chǎn)物再次加入一定濃度的乙醇洗脫2次；乙醇濃度為60% ;
[0036](9)對第二次乙醇洗脫后的產(chǎn)物進(jìn)行濃縮干燥得到有效兒茶素達(dá)42%，有效比83%，咖啡因含量1.8%的粗提物；
[0037](10)粗提物處理:取粗提物，用其重量6倍的15%乙醇水溶液溶解，有不溶物則過濾；
[0038](11)聚酰胺柱層析:所溶樣品以柱體積6:1上樣，以乙醇水溶液梯度洗脫，洗脫液PH值均以冰醋酸調(diào)節(jié)至PH3-4 ；
[0039]洗脫液分別為水:(2BV)、20 %乙醇(3BV)、30 %乙醇(4BV)，分步收集，合并無EGCG臨近雜質(zhì)的的洗脫液，濃縮備用；
[0040](12)自制MCC柱層析:以步驟(11)下的洗脫液濃縮物為原料，以2_3倍體積水稀釋，以柱體積25:1上樣，洗脫液為7%乙醇水溶液(以冰醋酸調(diào)節(jié)PH值至3)，分步收集EGCG重量百分比含量為95%以上的溶液；
[0041](13)濃縮干燥:對各段產(chǎn)品濃縮干燥，冷凍保存，得到最終產(chǎn)物兒茶素達(dá)55%，有效比95 %，咖啡因含量0.9%。
[0042]實施例2
[0043](1)選料:將綠茶片放入蒸餾釜中；
[0044](2)水浸提:往蒸餾釜中加入83°C水，在此溫度下水浸提35分鐘；
[0045](3)將上述得到的產(chǎn)物進(jìn)行固液分離；
[0046](4)在室溫下將分離后的產(chǎn)物冷卻到33C ;
[0047](5)過濾:用1000目濾網(wǎng)過濾，得到去除固體殘渣的過濾產(chǎn)物；
[0048](6)將過濾后的產(chǎn)物用裝有樹脂的上柱水洗，水流速為6米/小時；吸附樹脂采用H103 ；
[0049](7)第一次乙醇洗脫:向水洗過后的產(chǎn)物中加入2.5倍體積水稀釋，再