真空干燥得化合物 3/HNMR(400MHz，DMS0) :6. 51化巧，6. 42 (3H)，3. 20 (細(xì))， 2. 83 化H)，2. 55 (4H)，2. 5U6H)，1. 81 (2H)，1. 67 (2H)，1. 55 (2H)，1. 41 (2H)。 陽124] 實(shí)施例4、化合物4的制備 陽1巧]
[01%] 在產(chǎn)品的制備中存在3, 4-二節(jié)氧基苯丙酷氯遇水水解，帶入下一步反應(yīng)氨化后 得到化合物4。 陽127] 實(shí)施例5、化合物1、化合物2、化合物3和化合物4作為對(duì)照品在檢測(cè)苦柯胺B藥 物中的應(yīng)用。
[0128] 供試品溶液的制備：精密稱取苦柯胺B適量（約為0. 15g)，置100ml量瓶中，加強(qiáng) 酸溶液70ml，超聲10分鐘并不斷振搖使苦柯胺B溶解，放冷，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，用 0. 45μm的濾膜濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液；
[0129] 對(duì)照品儲(chǔ)備溶液：精密稱取化合物1、化合物2、化合物3和化合物4對(duì)照品各適 量，用甲醇溶解并稀釋制成每1ml中含45μg的溶液，作為雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備溶液；
[0130] 苦柯胺B對(duì)照品溶液：精密稱取苦柯胺B對(duì)照品適量，加溶劑溶解并稀釋制成每 1ml中含45μg的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液；分別精密量取雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備溶液和對(duì)照品 儲(chǔ)備溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。 陽131]色譜條件：
[0132] 照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2005年版二部附錄VD)測(cè)定。
[0133] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；W0.02mol/L 憐酸二氨錠溶液-乙臘化00 :470,混勻后用憐酸調(diào)節(jié)抑值為2.4~3. 5)為流動(dòng)相，柱 溫：40°C，流速為1.Oml/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為252皿?？嗫掳稡峰與化合物1、化合物2、化合 物3和化合物4峰之間的分離度均應(yīng)大于6。 陽 134]流速：1.2ml/min。
[0135] 精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15μ1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖 至主峰保留時(shí)間的12倍?？嗫掳乏⒎迮c化合物1、化合物2和化合物3峰之間的分離度均 應(yīng)大于6。 陽136] 實(shí)施例6、化合物1的合成路線 陽 137]
[0138]實(shí)施例7、化合物2的合成路線陽 139]
[0140] 實(shí)施例8、化合物3的合成路線
[0141]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物1具備如下結(jié)構(gòu)，2. 用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物2具備如下結(jié)構(gòu)，3. 用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物3具備如下結(jié)構(gòu)，4. 如權(quán)利要求1所述用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物1的 合成過程，包括以下步驟：O5. 如權(quán)利要求1所述用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物1的 合成過程，包括以下步驟： 將化合物A5和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，將CBZCl用干燥二氯甲烷溶解，于冰 浴攪拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，濃縮二氯甲烷，加入稀鹽酸、乙 酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層析，得純品化合物 A6 ； 將化合物A6溶于四氫呋喃中，加入飽和的氨甲醇溶液和Raney Ni，排盡空氣后，于高 壓釜中攪拌反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，抽濾，濃縮得粗品，柱層析，得純品化合物A7 ; 將化合物A7溶于四氫呋喃中，加入甲醇，鈀/碳后，排盡空氣，常壓室溫下反應(yīng)，直至反 應(yīng)完全，過濾，真空干燥得終產(chǎn)物。6. 如權(quán)利要求2所述用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物2的 合成過程，包括以下步驟：：?7.如權(quán)利要求2所述用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物2的 合成過程，包括以下步驟： 將化合物〇和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，將3, 4-二芐氧基苯丙酰氯用干燥二氯甲 烷溶解，于冰浴攪拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，濃縮二氯甲烷，加 入稀鹽酸、乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層析，得 純品化合物Bl ; 將化合物Bl溶于四氫呋喃中，加入飽和的氨甲醇溶液和Raney Ni，排盡空氣后，于高 壓釜中下攪拌反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，抽濾，濃縮得粗品，柱層析得純品化合物B2 ; 將化合物B2和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，將3, 4-二芐氧基苯丙酰氯用干燥二氯 甲烷溶解，于冰浴攪拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，濃縮二氯甲烷， 加入稀鹽酸、乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層析， 得純品化合物B3 ; 將化合物B3溶于二氯甲烷中，室溫?cái)嚢柘戮徛尤腼柡偷柠}酸乙醚溶液，冰浴下反 應(yīng)，直至反應(yīng)完全，濃縮，抽濾，得產(chǎn)物化合物M ; 將化合物M溶于甲醇中，室溫?cái)嚢柘碌稳牒斜╇娴募状既芤?，滴加結(jié)束后，室溫 反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，濃縮得化合物B5 ; 將化合物B5和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，將CBZCl用干燥二氯甲烷溶解，于冰浴 攪拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反應(yīng)約，直至反應(yīng)完全，濃縮二氯甲烷，乙酸乙酯萃取， 無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層析，得純品化合物B6 ; 將化合物B6溶于四氫呋喃中，加入飽和的氨甲醇溶液和Raney Ni，排盡空氣后，于高 壓釜中攪拌反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，抽濾，濃縮得粗品，柱層析，得純品化合物B7， 將化合物B7溶于四氫呋喃中，加入甲醇，鈀/碳后，排盡空氣，氫氣常壓下室溫反應(yīng)，直 至反應(yīng)完全，過濾，真空干燥得終產(chǎn)物。8. 如權(quán)利要求3所述用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其特征在于，化合物3的 合成過程，包括以下步驟： 將化合物B7和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，將3, 4-二芐氧基苯丙酰氯用干燥二氯 甲烷溶解，于冰浴攪拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反應(yīng)，直至反應(yīng)完全，濃縮二氯甲烷， 加入稀鹽酸、乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層析， 得純品化合物Cl ; 將化合物C 1溶于四氫呋喃中，加入甲醇，鈀/碳后，排盡空氣，氫氣常壓下室溫反應(yīng)， 直至反應(yīng)完全，過濾，真空干燥得終產(chǎn)物。9. 權(quán)利要求1-3所述的任一化合物，在苦柯胺B質(zhì)量檢測(cè)中的應(yīng)用。10. -種苦柯胺B的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟： 供試品溶液的制備：精密稱取苦柯胺B適量，置100mL量瓶中，加溶劑70ml，超聲10分 鐘并不斷振搖使苦柯胺B溶解，放冷，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m的濾膜濾過，續(xù) 濾液作為供試品溶液； 對(duì)照品儲(chǔ)備溶液：精密稱取化合物1、化合物2和化合物3對(duì)照品各適量，用甲醇溶解 并稀釋制成每1ml中含45 μ g的溶液，作為雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備溶液； 苦柯胺B對(duì)照品溶液：精密稱取苦柯胺B對(duì)照品適量，加溶劑溶解并稀釋制成每1ml中 含45 μ g的溶液，作為對(duì)照品儲(chǔ)備溶液；分別精密量取雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備溶液和對(duì)照品儲(chǔ)備 溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液； 色譜條件： 照中國(guó)藥典2005年版二部附錄V D高效液相色譜法測(cè)定： 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0. 02mol/L磷酸二 氫銨溶液-乙腈（600 :470,混勻后用磷酸調(diào)節(jié)pH值為2. 4~3. 5)為流動(dòng)相，柱溫：40°C， 流速為1.0 ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)為252nm，苦柯胺B峰與化合物1、化合物2和化合物3峰之間 的分離度均應(yīng)大于6 ; 流速：I. 2ml/min ; 精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各15 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主 峰保留時(shí)間的12倍，苦柯胺B峰與化合物1、化合物2和化合物3峰之間的分離度均應(yīng)大于 6〇
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的三種參比化合物，及其制備方法，以及用此三種參比化合物控制苦柯胺B質(zhì)量的質(zhì)量控制方法。
【IPC分類】C07C231/12, G01N30/02, C07C235/34
【公開號(hào)】CN105348136
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510504827
【發(fā)明人】董凱, 王琳琳, 韓冬, 張存彥, 孫長(zhǎng)海, 姚小青
【申請(qǐng)人】天津紅日藥業(yè)股份有限公司
【公開日】2016年2月24日
【申請(qǐng)日】2015年8月17日