溶解，于冰浴攬拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反 應，直至反應完全，濃縮有機溶劑，乙酸乙醋400ml萃取，無水硫酸鋼干燥，抽濾，濃縮得粗 品。柱層析，得純品化合物B6;
[0051]
[0052] 化合物B6化06mol)溶于30ml四氨巧喃中，加入飽和的氨甲醇溶液800ml和 Ran巧Ni4.3g，排盡空氣后，約3MPa的氨氣壓力下，于高壓蓋中50°C條件下攬拌反應，直 至反應完全，抽濾，濃縮得粗品，柱層析，得純品化合物B7 ;
[0053]
[0054] 化合物B7 0).Olmol)溶于30ml四氨巧喃中，加入700ml甲醇，2g10%鈕/碳后， 排盡空氣，氨氣常壓下室溫反應，直至反應完全，過濾，真空干燥得化合物2。 陽化5] 本發(fā)明的目的之Ξ在于，提供一種用于苦柯胺B質(zhì)量控制中的參比化合物，其結(jié) 構(gòu)如下：
[0056]
[0057] 本發(fā)明還提供化合物3的制備方法，合成路線如下：
[0058]
[0059] 具體的，本發(fā)明所述化合物3的制備方法，包括W下步驟：
[0060] 將化合物B7和Ξ乙胺溶于干燥的二氯甲燒中，將3, 4-二節(jié)氧基苯丙酷氯用干燥 二氯甲燒溶解，于冰浴攬拌下緩慢滴入，滴加結(jié)束后，冰浴反應，直至反應完全，濃縮二氯甲 燒，加入稀鹽酸、乙酸乙醋萃取，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層 析，得純品化合物C1;
[0061] 將化合物C1溶于四氨巧喃中，加入甲醇，鈕/碳后，排盡空氣，氨氣常壓下室溫反 應，直至反應完全，過濾，真空干燥得終產(chǎn)物。
[0062] 優(yōu)選的，本發(fā)明所述化合物3的制備方法，包括W下步驟：
[0063]
W64] 化合物B7化06m〇U、S乙胺化溶于400ml干燥的二氯甲燒中，將 0. 06mol3, 4-二節(jié)氧基苯丙酷氯用干燥二氯甲燒200ml溶解，于冰浴攬拌下緩慢滴入，滴 加結(jié)束后，冰浴反應，直至反應完全。濃縮有機溶劑，加入稀鹽酸500ml、乙酸乙醋400mlX3 萃取，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，抽濾，濃縮得粗品，柱層析得純品化合物Cl; 陽0化]
[0066] 化合物CUO.Olmol)溶于30ml四氨巧喃中，加入700ml甲醇，2g10%鈕/碳后， 排盡空氣，氨氣常壓下室溫反應，直至反應完全，過濾，真空干燥得化合物3。
[0067] 本發(fā)明的目的之四在于，提供本發(fā)明所述的Ξ種化合物在苦柯胺B質(zhì)量檢測中的 應用。
[0068] 本發(fā)明的目的之五在于，提供一種苦柯胺B質(zhì)量檢測方法。
[0069] W本發(fā)明所述的Ξ種化合物作為雜質(zhì)對照品，對苦柯胺B的質(zhì)量進行檢測。
[0070] 本發(fā)明所述的質(zhì)量檢測方法，包括W下步驟：
[0071] 供試品溶液的制備：精密稱取苦柯胺B適量，置100ml量瓶中，加溶劑70ml，超聲 10分鐘并不斷振搖使苦柯胺B溶解，放冷，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，用0. 45μm的濾膜濾 過，續(xù)濾液作為供試品溶液；
[0072] 對照品儲備溶液：精密稱取化合物1、化合物2和化合物3對照品各適量，用甲醇 溶解并稀釋制成每1ml中含45μg的溶液，作為雜質(zhì)對照品儲備溶液；
[0073] 苦柯胺B對照品溶液：精密稱取苦柯胺B對照品適量，加溶劑溶解并稀釋制成每 1ml中含45μg的溶液，作為對照品儲備溶液；分別精密量取雜質(zhì)對照品儲備溶液和對照品 儲備溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液；
[0074] 色譜條件： 陽0巧]照中國藥典2005年版二部附錄VD高效液相色譜法測定：
[0076] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；W0. 02mol/L 憐酸二氨錠溶液-乙臘化00 :470,混勻后用憐酸調(diào)節(jié)抑值為2. 4~3. 5)為流動相，柱 溫：40°C，流速為1.Oml/min;檢測波長為252皿，苦柯胺B峰與化合物1、化合物2和化合 物3峰之間的分離度均應大于6;
[0077]流速：1. 2ml/min;
[0078] 精密量取對照品溶液與供試品溶液各15μ1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖 至主峰保留時間的12倍，苦柯胺Β峰與化合物1、化合物2和化合物3峰之間的分離度均應 大于6。
[0079] 本發(fā)明所述的檢測方法中，還可W選擇加入化合物4作為對照品，對苦柯胺Β的質(zhì) 量進行檢測。
[0080] 本發(fā)明所述的化合物4的結(jié)構(gòu)如下：
[0081]
[0082] 優(yōu)選的，本發(fā)明的檢測方法在實施例中。
[0083] 本發(fā)明提供的化合物1、化合物2、化合物3和化合物4可W為苦柯胺B的定性和 定量分析提供對照品，從而提高苦柯胺B的質(zhì)量標準，為苦柯胺B的臨床用藥提供重要的指 導意義。
[0084] 對本發(fā)明中所出現(xiàn)的名詞進行解釋： 陽0化]CBZC1 :氯甲酸節(jié)醋
[0086] Ran巧Ni:雷尼儀
[0087] 本發(fā)明所述的化合物1、2和3,作為檢測苦柯胺B質(zhì)量的參比化合物，具有非常重 要的意義，可W進一步提高苦柯胺B質(zhì)量檢測的準確度，提高產(chǎn)品的質(zhì)量標準，保證藥物的 安全性。
[0088] 經(jīng)過測試我們發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的檢測方法具有精準度高、穩(wěn)定性好和重復性好等特 點。 W89] 說明書附圖：
[0090] 附圖1化合物1-化合物4及苦柯胺B在色譜圖中的位置示意圖
[0091] 附圖2化合物1-化合物4及苦柯胺B色譜圖面積百分比報告
【具體實施方式】
[0092] 通過W下具體實施例對本發(fā)明作進一步的說明，但不作為限制。
[0093] 化合物0的合成制備與3, 4-二節(jié)氧基苯丙酷氯的合成制備：參照 CN201010539028. 4進行合成。
[0094] 化合物A5的合成采用專利CN201010539028. 4公開的合成方法得到。
[0095] 實施例1、化合物1的制備
[0096]
[0097]67. 6g化合物A5(0. lmol)、31.4ml的Ξ乙胺0). 22mol)溶于400ml干燥的二氯 甲燒中，將0.1mol CBZC1用干燥二氯甲燒200ml溶解，于冰浴攬拌下緩慢滴入，滴加結(jié) 束后，冰浴反應約比，通過薄層層析監(jiān)控反應終點（硅膠板：GF2M，展開劑：二氯甲燒：甲 醇=10:1，紫外燈下檢視），直至反應完全。濃縮有機溶劑，加入稀鹽酸500ml、乙酸乙醋 400ml X 3萃取，飽和食鹽水洗涂，無水硫酸鋼干燥，抽濾，濃縮得粗品。柱層析（洗脫劑： 石油酸：乙酸乙醋=1:2)，得純品化合物A6/H NMR(400MHz，DMS0) :7.19 (20H)，6.61 (1H)， 6. 57 (1H)，6. 52 (1H)，5. ：34 (4H)，5. 20 (4H)，3. 33 (2H)，3. 20 (2H)，2. 96 (6H)，2. 83 (2H)， 2. 67 (2H)，2. 51 (2H)，1. 81 (2H)，1. 55 (4H)。
[0098]
[0099] 64.8g化合物A6〇). 08mol)溶于30ml四氨巧喃中，加入飽和的氨甲醇溶液800ml 和RaneyNi7g，排盡空氣后，約3MPa的氨氣壓力下，于高壓蓋中50°C條件下攬拌反應 12+化，通過薄層層析監(jiān)控反應終點（硅膠板：GF254,展開劑：二氯甲燒：甲醇=10:1，紫外 燈下檢視），直至反應完全。抽濾（娃藻上助濾），濃縮得粗品。柱層析，得純品化合物A7， 黃色油狀物，電NMR(400MHz，DMS0) :7. 19 (20)，6. 61 (1H)，6. 57 (1H)，6. 52 (1H)，5. 34 (4H)， 5. 20 (4H)，3. 33 (2H)，3. 20 (2H)，2. 96 巧H)，2. 83 (2H)，2. 65 (2H)，2. 51 (2H)，1. 81 (2H)， 1. 55(4H)。 陽100]
陽w] 49g化合物A7 0). 06mol)溶于30ml四氨巧喃中，加入700ml甲醇，4.8g10%鈕/碳 后，排盡空氣，氨氣常壓下室溫反應15 +化，通過薄層層析監(jiān)控反應終點（硅膠板：GF254,展 開劑：正下醇：水：醋酸=4:1:1，紫外燈下檢視），直至反應完全。過濾