20cmX52cm，固定相硅膠壓實(shí)后，用洗脫劑沖洗2h，得到裝 好的制備色譜柱； 2) 將255g長(zhǎng)春瑞濱粗品（純度為79. 65%)用二氯甲烷溶解，進(jìn)料，進(jìn)料量為290ml; 3) 采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑，先用二氯甲烷：乙腈=85 :1溶劑洗脫3個(gè)床層，換用二氯 甲烷：乙腈=45:1溶劑洗脫4個(gè)床層并收集洗脫液a，再換用二氯甲烷：乙腈=30:1溶劑洗 脫4個(gè)床層并收集洗脫液b，最后換用二氯甲烷：乙腈=5 :1的洗脫液洗脫制備色譜柱中殘 留物； 4)減壓回收洗脫液b，得到長(zhǎng)春瑞濱189. 5g，液相色譜檢測(cè)純度為98. 12%，收率為 91. 55%〇
[0019] 實(shí)施例6 1) 稱取6. 20kg300目硅膠，添加乙酸乙酯并攪拌，排出硅膠中氣泡，然后將硅膠均勻 地裝到制備色譜中，柱尺寸為? 20cmX52cm，固定相硅膠壓實(shí)后，用洗脫劑沖洗2h，得到裝 好的制備色譜柱； 2) 將250g長(zhǎng)春瑞濱粗品（純度為79. 65%)用乙酸乙酯溶解，進(jìn)料，進(jìn)料量為290ml; 3) 采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑，先用乙酸乙酯：甲醇=99 :1溶劑洗脫2個(gè)床層，換用乙酸 乙酯：甲醇=50 :1溶劑洗脫3個(gè)床層并收集洗脫液a，再換用乙酸乙酯：甲醇=35 :1溶劑洗 脫3個(gè)床層并收集洗脫液b，最后換用乙酸乙酯：甲醇=10 :1的洗脫液洗脫制備色譜柱中殘 留物； 4) 減壓回收洗脫液b，得到長(zhǎng)春瑞濱196. 6g，液相色譜檢測(cè)純度為98. 35%，收率為 97. 1%〇
[0020] 實(shí)施例7 1) 稱取6. 10kg400目硅膠，添加乙酸乙酯并攪拌，排出硅膠中氣泡，然后將硅膠均勻 地裝到制備色譜中，柱尺寸為?20cmX52cm，固定相硅膠壓實(shí)后，得到裝好的制備色譜柱； 2) 將260g長(zhǎng)春瑞濱粗品（純度為70. 57%)用乙酸乙酯溶解，進(jìn)料，進(jìn)料量為280ml; 3) 采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑，先用乙酸乙酯：甲醇=98 :1溶劑洗脫2個(gè)床層，換用乙酸 乙酯：甲醇=48 :1溶劑洗脫3個(gè)床層并收集洗脫液a，再換用乙酸乙酯：甲醇=30 :1溶劑洗 脫2個(gè)床層并收集洗脫液b，最后換用乙酸乙酯：甲醇=10 :1的洗脫液洗脫制備色譜柱中殘 留物； 4) 減壓回收洗脫液b，得到長(zhǎng)春瑞濱130g，液相色譜檢測(cè)純度為98. 47%，收率為 69. 77%〇
[0021] 實(shí)施例8 1) 稱取5. 90kg400目硅膠，添加氯仿并攪拌，排出硅膠中氣泡，然后將硅膠均勻地裝 到制備色譜中，柱尺寸為? 20cmX52cm，固定相硅膠壓實(shí)后，用洗脫劑沖洗2h，得到裝好的 制備色譜柱； 2) 將220g長(zhǎng)春瑞濱粗品（純度為82. 79%)用氯仿溶解，進(jìn)料，進(jìn)料量為250ml; 3) 采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑，先用氯仿：丙酮=75 :1溶劑洗脫3個(gè)床層，換用氯仿：丙 酮=40 :1溶劑洗脫3個(gè)床層并收集洗脫液a，再換用氯仿：丙酮=25 :1溶劑洗脫2個(gè)床層并 收集洗脫液b，最后換用氯仿：丙酮=5 :1的洗脫液洗脫制備色譜柱中殘留物； 4) 減壓回收洗脫液b，得到長(zhǎng)春瑞濱122g，液相色譜檢測(cè)純度為98. 43%，收率為 65. 93%〇
[0022] 實(shí)施例9 1) 稱取5. 80kg300目硅膠，添加氯仿并攪拌，排出硅膠中氣泡，然后將硅膠均勻地裝 到制備色譜中，柱尺寸為? 20cmX52cm，固定相硅膠壓實(shí)后，用洗脫劑沖洗2h，得到裝好的 制備色譜柱； 2) 將216g長(zhǎng)春瑞濱粗品（純度為79. 19%)用氯仿溶解，進(jìn)料，進(jìn)料量為240ml; 3) 采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑，先用氯仿：丙酮=80 :1溶劑洗脫3個(gè)床層，換用氯仿：丙 酮=45 :1溶劑洗脫3個(gè)床層并收集洗脫液a，再換用氯仿：丙酮=30 :1溶劑洗脫2個(gè)床層并 收集洗脫液b，最后換用氯仿：丙酮=5 :1的洗脫液洗脫制備色譜柱中殘留物； 4) 減壓回收洗脫液b，得到長(zhǎng)春瑞濱156g，液相色譜檢測(cè)純度為98. 57%，收率為 89.90%〇
[0023] 實(shí)施例10 1) 稱取6. 20kg300目硅膠，添加氯仿并攪拌，排出硅膠中氣泡，然后將硅膠均勻地裝 到制備色譜中，柱尺寸為? 20cmX52cm，固定相硅膠壓實(shí)后，用洗脫劑沖洗2h，得到裝好的 制備色譜柱； 2) 將216g長(zhǎng)春瑞濱粗品（純度為79. 19%)用氯仿溶解，進(jìn)料，進(jìn)料量為250ml; 3) 采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑，先用氯仿：丙酮=75 :1溶劑洗脫3個(gè)床層，換用氯仿：丙 酮=45 :1溶劑洗脫3個(gè)床層并收集洗脫液a，再換用氯仿：丙酮=30 :1溶劑洗脫2個(gè)床層并 收集洗脫液b，最后換用氯仿：丙酮=5 :1的洗脫液洗脫制備色譜柱中殘留物； 4) 減壓回收洗脫液b，得到長(zhǎng)春瑞濱160g，液相色譜檢測(cè)純度為98. 1%，收率為91. 76%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種長(zhǎng)春瑞濱的純化方法，其特征在于包括如下步驟： (1) 采用有機(jī)溶劑A溶脹后的硅膠為色譜柱填料制備色譜柱； (2) 用有機(jī)溶劑A將長(zhǎng)春瑞濱粗品溶解后加入上述色譜柱； (3) 采用梯度淋洗的方法對(duì)色譜柱進(jìn)行洗脫，依次用體積比逐漸減小的有機(jī)溶劑A/有 機(jī)溶劑B混合液作為洗脫液進(jìn)行洗脫，收集主成份流出液，最后用溶劑洗下殘留物； (4) 減壓濃縮回收洗脫劑，得到高純度長(zhǎng)春瑞濱，純度98 wt%以上，收率為60~98%。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（1)中，所采用硅膠為100~400 目。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（1)中，所述有機(jī)溶劑A為二氯甲 烷、正丁醇、甲基異丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氧六環(huán)中的一種。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（2)中，所述長(zhǎng)春瑞濱上樣量為 1~6 (w/w%)，進(jìn)料量為制備色譜柱體積的1~12%。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（3)中，所述有機(jī)溶劑B為丙酮、乙 腈、二甲基甲酰胺、甲醇、二甲亞砜中的一種。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（3)中，采用恒壓恒流栗進(jìn)洗脫劑， 洗脫劑依次為溶劑 A :B=99 :1 ~75 :1 (v/v)、溶劑 A :B=65 :1 ~45 :1 (v/v)、溶劑 A :B=45 : 1~15 :1 (v/v)，洗脫劑用量為柱體積的200~500%，洗脫流速為每分鐘洗脫柱體積的1~ 10% ;制備色譜柱運(yùn)行的壓力為0? 1~0? 7 MPa。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（3)中，洗脫液分段收集，收集分兩 段，第一段收集溶劑A :B=65 :1~45 :1 (v/v)餾分；第二段收集溶劑A :B=45 :1~15 :1 (v/ v)餾分。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征是：步驟（3)中，采用溶劑A :B=15 :1~5 : l(v/V)洗脫殘留物。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種工業(yè)制備色譜純化長(zhǎng)春瑞濱的方法。包括（1）采用有機(jī)溶劑A溶脹后的硅膠為色譜柱填料制備色譜柱；（2）將長(zhǎng)春瑞濱粗品有機(jī)溶劑A溶液加入上述色譜柱；（3）采用梯度淋洗的方法對(duì)色譜柱進(jìn)行洗脫，依次用體積比逐漸減小的有機(jī)溶劑A/有機(jī)溶劑B混合液作為洗脫液進(jìn)行洗脫，收集主成份流出液，最后洗下殘留物；（4）減壓濃縮回收洗脫劑，得到高純度長(zhǎng)春瑞濱。本發(fā)明所得產(chǎn)品純度高，該方法可使長(zhǎng)春瑞濱的純度達(dá)到98%以上，收率為60～98%。固定相穩(wěn)定，可重復(fù)使用。
【IPC分類】C07D519/04
【公開號(hào)】CN105001243
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510398974
【發(fā)明人】袁誠(chéng), 傅玉萍, 李金華, 顏景胡, 林秀仙, 潘振華, 李詠華, 朱映萍
【申請(qǐng)人】廣州白云山漢方現(xiàn)代藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年10月28日
【申請(qǐng)日】2015年7月8日