一種從石蒜屬植物提取石蒜堿的方法
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從石蒜屬植物提取石蒜堿的方法。
【【背景技術(shù)】】
[0002]石蒜鱗莖為石蒜的地下部分，含有多種生物堿，其中石蒜堿含量較高，研宄較為廣泛。石蒜堿可用于抗菌、抗病毒，治療腫瘤及心血管疾病，其對(duì)阿米巴痢疾也有很好的療效。
[0003]目前，石蒜堿的提取技術(shù)主要有回流法、煎煮法、索氏提取法等，效率較低且耗時(shí)長。新興的生物堿提取技術(shù)有超聲輔助提取、微波萃取、臨界流體萃取等等，大大縮短了時(shí)長，提高了效率。石蒜堿的分離技術(shù)常用的主要有有機(jī)溶劑萃取法、樹脂吸附法等等，相繼誕生的新興的分離技術(shù)有色譜法、分子印跡法、膜分離法等。迄今，未見分子篩作為載體的石蒜堿提取分離方法的相關(guān)報(bào)道。
【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種從石蒜屬植物提取石蒜堿的方法，通過提取、萃取和洗脫等步驟提取石蒜堿，顯著提高提取液中石蒜堿的含量，進(jìn)而石蒜堿的收率也得到了明顯提高，為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案。
[0005]一種從石蒜屬植物提取石蒜堿的方法，包括以下步驟:
[0006]I)取石蒜鱗莖切碎烘干、粉碎后，得到石蒜鱗莖粉，用硫酸溶液在水浴條件下對(duì)石蒜鱗莖粉進(jìn)行提取，經(jīng)超聲處理、離心、過濾后，得到石蒜粗提取液；
[0007]2)將石蒜粗提取物pH值調(diào)節(jié)至堿性，使用氯仿萃取，得到萃取液；
[0008]3)將萃取液pH值調(diào)節(jié)至酸性后上分子篩層析柱；
[0009]4)去除分子篩層析柱中糖類；
[0010]5)用含有氨水的乙醇溶液對(duì)分子篩層析柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮后得到石赫喊。
[0011]在本技術(shù)方案中，離心時(shí)速率范圍可在4000-6000rap/min內(nèi)，使用氯仿萃取次數(shù)為2-4次。對(duì)分子篩層析柱進(jìn)行水洗以去除分子篩層析柱中的糖類，如果不去除分子篩層析柱中的糖類，分子篩層析柱中會(huì)吸附一定量的糖類，降低分子篩層析柱吸附石蒜堿的量，同時(shí)導(dǎo)致在后續(xù)步驟中從分子篩層析柱中洗脫出石蒜堿的效果變差，降低石蒜堿的收率，降低提取的石蒜堿的純度。
[0012]進(jìn)一步地，所述步驟3)還包括對(duì)分子篩層析柱的流出液進(jìn)行生物堿測試的步驟，流出液生物堿測試呈陽性時(shí)停止上萃取液。其中，所述生物堿測試通過碘化鉍鉀反應(yīng)進(jìn)行。
[0013]進(jìn)一步地，所述步驟4)中去除分子篩層析柱中糖類包括:對(duì)分子篩層析柱進(jìn)行水洗，至洗出液糖類測試為陰性停止水洗。
[0014]進(jìn)一步地，所述步驟I)中硫酸溶液的體積濃度為0.5-1 %，石蒜鱗莖粉與硫酸溶液的料液比為1:10-20g/mL。
[0015]進(jìn)一步地，所述步驟I)中用硫酸溶液在水浴條件下提取時(shí)間為3-5小時(shí)，超聲處理時(shí)間為30-60分鐘。
[0016]進(jìn)一步地，所述步驟2)中，“將石蒜粗提取物pH值調(diào)節(jié)至堿性”采用質(zhì)量濃度為15-25 %的NaOH溶液調(diào)節(jié)石蒜粗提取物的pH值，調(diào)節(jié)pH值至8_11。
[0017]進(jìn)一步地，所述步驟3)中，“將萃取液pH值調(diào)節(jié)至酸性”采用體積濃度為35-38%的HCl溶液調(diào)節(jié)萃取液的pH值，調(diào)節(jié)pH值至2-5。
[0018]進(jìn)一步地，所述步驟3)中所述分子篩層析柱由分子篩在500?600°C、空氣氛圍下焙燒3?6小時(shí)，再裝入層析柱獲得。
[0019]進(jìn)一步地，所述分子篩層析柱中分子篩為ZSM-5型、X型、Y型、Beta型分子篩中的任意一種。
[0020]進(jìn)一步地，所述步驟5)中含有氨水的乙醇溶液中氨水的濃度為1.5?2.0mol/L，氨水在乙醇溶液中體積百分比為70-90% ;所述“收集洗脫液”在洗脫液生物堿測試呈陽性時(shí)開始收集，在洗脫液生物堿測試呈陰性時(shí)停止收集。
[0021]本發(fā)明一種從石蒜屬植物提取石蒜堿的方法操作簡單，石蒜堿提取分離效果優(yōu)異，在能夠有效的提高了石蒜堿的收率，石蒜堿純度高。同時(shí)該方法實(shí)施安全，實(shí)施過程中使用的原材料能夠有效回收利用，節(jié)約成本，滿足工業(yè)化生產(chǎn)的要求，適于廣泛推廣應(yīng)用。
【【具體實(shí)施方式】】
[0022]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。
[0023]實(shí)施例1
[0024]取石蒜鱗莖樣品切碎烘干、粉碎后，得到石蒜鱗莖粉，取石蒜鱗莖粉10g加入到IL體積溶度為0.5%硫酸溶液中，在70°C水浴條件下提取3h，超聲處理30min，5000rap/min轉(zhuǎn)速條件下離心，過濾后獲得石蒜粗提物。石蒜粗提物用質(zhì)量濃度20%的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH值至10，使用氯仿萃取4次，得到萃取液。將萃取液用體積濃度35%的HCl溶液調(diào)節(jié)pH值至2。將ZSM-5型分子篩在馬弗爐中550°C焙燒5小時(shí)，然后裝入層析柱中，得到分子篩層析柱。將調(diào)節(jié)PH值之后的萃取液上分子篩層析柱，對(duì)分子篩層析柱流出液進(jìn)行碘化鉍鉀反應(yīng)測試，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性時(shí)停止上樣。對(duì)分子篩層析柱用蒸餾水洗去多糖，至洗出液Molish反應(yīng)為陰性停止。用含1.5mol/L的氨水的乙醇溶液(氨水在乙醇溶液的體積百分比為70% )對(duì)分子篩層析柱進(jìn)行洗脫，洗脫液碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性時(shí)開始收集，洗脫液碘化鉍鉀反應(yīng)呈陰性停止洗脫，收集洗脫液，濃縮后即得石蒜堿。
[0025]上述方法得到的石蒜堿93mg，經(jīng)測定，石蒜堿的收率為0.093 % (以石蒜鱗莖干粉質(zhì)量計(jì)算)，純度為33%。
[0026]實(shí)施例2
[0027]取石蒜鱗莖樣品切碎烘干、粉碎后，得到石蒜鱗莖細(xì)粉，取石蒜鱗莖細(xì)粉10g加入到1.5L體積溶度為0.5%硫酸溶液中，在水浴條件下提取5h，超聲處理60min，5000rap/min轉(zhuǎn)速條件下離心，過濾后獲得石蒜粗提物。石蒜粗提物用質(zhì)量濃度20%的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至11，使用氯仿多次萃取兩次，得到萃取液。將萃取液用體積濃度38%的HCl溶液調(diào)節(jié)PH值至5。將X型分子篩在馬弗爐中500°C焙燒6小時(shí)，然后裝入層析柱中，得到分子篩層析柱。將調(diào)節(jié)PH值之后的萃取液上分子篩層析柱，對(duì)分子篩層析柱流出液進(jìn)行碘化鉍鉀反應(yīng)測試，碘化鉍鉀反應(yīng)呈陽性時(shí)停止上樣。對(duì)分子篩層析柱用蒸餾水洗去多糖，至洗出液Molish反應(yīng)為陰性停