一種從石蒜屬植物中提取石蒜堿的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種石蒜堿的提取方法，特別涉及一種從石蒜屬植物中提取石蒜堿的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 石蒜(Xycoris radiate. Herb)是石蒜科（Amaryllidaceae)石蒜屬（Xycoris)的 多年生草本植物，主要分布在亞洲，我國有17種，在我國湖南、湖北、江蘇、浙江、福建等省 均有分布。石蒜屬植物具有較高的觀賞價(jià)值，被譽(yù)為"中國郁金香"，石蒜鱗莖富含淀粉，女口 將其磨碎后用大量水淘洗，脫毒后食用，味如懦米粉，《救荒本草》中記載，可將其炒熟，水浸 過食。石蒜性味辛、甘、溫，具有消腫、殺蟲的作用，其所含豐富的生物堿也得到廣泛應(yīng)用，尤 其是石蒜堿，石蒜堿具有抗腫瘤、抗病毒的療效，但是含量均較低。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中主要有溶劑提取法、超聲波提取法、微波提取法、超臨界流體萃取等方 法，但存在環(huán)境污染嚴(yán)重、生產(chǎn)成本高等缺點(diǎn)。
[0004] 中國專利2006100512151公開了一種從石蒜屬植物中提取石蒜堿的方法，提取目 標(biāo)物為石蒜堿；該專利重在石蒜堿分離，工藝復(fù)雜，操作繁瑣，己酸己醋價(jià)格較高，需要反復(fù) 萃取。相比之下，本方法生產(chǎn)成本低，操作較簡(jiǎn)單。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題，克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供一種提取率高、 成產(chǎn)成本低的從石蒜中提取石蒜堿的方法。
[0006] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案，一種從石蒜屬植物中提取石蒜堿的方 法，包括W下步驟：
[0007] (1)提?。?br>[0008] 首先稱取經(jīng)烘干、粉碎、過篩處理的石蒜屬植物粉末，W料液比1:5-25(優(yōu)選 1:10-1:25,更優(yōu)選1:10)，單位比例為g/mU加入抑調(diào)節(jié)為1. 5-7. 5(優(yōu)選3-6,更優(yōu)選4. 5) 的水，加入石蒜屬植物粉末質(zhì)量1 % -5% (優(yōu)選2-5%，更優(yōu)選4% )的酶，在40-8(TC (優(yōu) 選35-65C，更優(yōu)選5(TC )酶解0. 5-2.化（優(yōu)選1-化，更優(yōu)選1.化），離也20min，過濾，取上 清液，即得石蒜堿提取液；
[000引 似純化
[0010] ①溶劑萃取；將步驟（1)提取的石蒜堿提取液用化0H調(diào)節(jié)抑至10,按體積比1:1 加入萃取劑H氯甲焼，搖勻，靜置過夜，取下層氯仿相，肥1調(diào)節(jié)抑至2,抽濾，得石蒜堿萃取 濃縮液；
[0011] ②陽離子交換樹脂吸附；將步驟①中萃取濃縮液經(jīng)肥1調(diào)節(jié)抑至1~6(優(yōu)選 抑為2)用D-001型陽離子交換樹脂，W上樣速率l-3BV/h (優(yōu)選3BV/h)上樣至飽和，用含 0. 5-2. 5mol/L(優(yōu)選1. 5mol/L)氨水的40% -80% (優(yōu)選70% )己醇溶液W 3BVA的洗脫 速率進(jìn)行洗脫，干燥，得干燥物I ;
[0012] ③Ci8反相硅膠柱層析；C 18填料預(yù)處理，將20倍質(zhì)量于步驟②中干燥物I的Ci8填 料裝于層析柱中，然后W流動(dòng)相（流動(dòng)相；V(己膳）；V(磯酸鹽）為16 ; 84)溶解層析 出來的層析物，上樣，采用甲醇-水溶液分次洗脫，收集洗脫液，濃縮，真空冷凍干燥，得干 燥物II ;
[0013] ④正相硅膠柱層析；用經(jīng)預(yù)處理的20倍質(zhì)量于步驟③所得干燥物II的柱層析用 硅膠（200-300目）W柱直徑-柱高濕法裝柱，所述柱直徑-柱高的比例為1:10~30 (優(yōu) 選1:10)，步驟③所得干燥物II與硅膠混勻，加入洗脫劑溶解，所述洗脫劑為石油離、己酸己 醋、氯仿、丙麗、甲醇中的兩種溶劑混合；蒸發(fā)溶劑后干法上樣，洗脫，收集洗脫液，濃縮，真 空冷凍干燥，得干燥物III ;
[0014] ⑥重結(jié)晶；將步驟④所得干燥物III經(jīng)己醇溶解，再結(jié)晶得到石蒜堿粗品，過濾，在 50~6(TC真空干燥得的石蒜堿。
[0015] 進(jìn)一步，所述步驟④中，洗脫劑為石油離和己酸己醋，所述己酸己醋與石油離的體 積比為8. 4:1.6。
[0016] 進(jìn)一步，所述酶為纖維素酶與半纖維素酶的混合酶，纖維素酶與果膠酶的混合酶， 半纖維素酶與果膠酶的混合酶，纖維素酶、半纖維素酶及果膠酶的混合酶中的一種。
[0017] 進(jìn)一步，所述酶為纖維素酶與果膠酶的混合酶，所述纖維素酶與果膠酶的質(zhì)量比 為 1:1。
[0018] 進(jìn)一步，所述石蒜屬植物為忽地笑、紅花石蒜、攻瑰石蒜、稻草石蒜、或中國石蒜 (優(yōu)選忽地笑）
[0019] 進(jìn)一步，所述石蒜屬植物粉末為鱗莖或花粉末。
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，因采用的提取溶劑為水，按料液 比1:10計(jì)算，若生產(chǎn)1kg石蒜堿，比使用甲醇或無水己醇（工業(yè)用7. 5元/公斤）作為提取 溶劑，生產(chǎn)成本就降低42811元；對(duì)環(huán)境無污染，提取得率較高，提取得率提高了 30. 46% ; 反應(yīng)時(shí)間短，與采用超聲波輔助提取相比，時(shí)間縮短1. 5h，與現(xiàn)有技術(shù)浸提方法相比，時(shí)間 縮短2.化；本發(fā)明只在傳統(tǒng)水提工藝上增加酶解過程，具有一定的應(yīng)用價(jià)值，易用于工業(yè) 化生產(chǎn)；純化工藝環(huán)保，且純度高，可達(dá)99. 3%。
【附圖說明】
[0021] 圖1為本發(fā)明抑值對(duì)石蒜堿得率的影響分布圖；
[0022] 圖2為本發(fā)明酶用量對(duì)石蒜堿得率的影響分布圖；
[0023] 圖3為本發(fā)明酶解時(shí)間對(duì)石蒜堿得率的影響分布圖；
[0024] 圖4為本發(fā)明酶解溫度對(duì)石蒜堿得率的影響分布圖；
[00巧]圖5為本發(fā)明料液比對(duì)石蒜堿得率的影響分布圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026] 參照附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。
[0027] 本實(shí)施例包括W下步驟；（1)提?。皇紫确Q取經(jīng)烘干、粉碎、過篩處理的石蒜屬植 物粉末2. 000g，W料液比1:5-25,單位比例為g/mU分別加入抑調(diào)節(jié)為1.5-7. 5的水，加 入石蒜屬植物粉末質(zhì)量1 % -5 %的酶，在40-8(TC酶解0. 5-2.化，離也20min，過濾，取上清 液，即得石蒜堿提取液；
[002引 似純化
[0029] ①溶劑萃?。粚⒉襟E（1)提取的石蒜堿提取液用化0H調(diào)節(jié)抑至10,按體積比1:1 加入萃取劑H氯甲焼，搖勻，靜置過夜，取下層氯仿相，肥1調(diào)節(jié)抑至2,抽濾，得石蒜堿萃取 濃縮液；
[0030] ②陽離子交換樹脂吸附；將步驟①中萃取濃縮液經(jīng)肥1調(diào)節(jié)抑至2,用D-001型陽 離子交換樹脂，W上樣速率3BVA上樣至飽和，用含1. 5mol/L氨水的70%己醇溶液W 3BV/ h的洗脫速率進(jìn)行洗脫，干燥，得干燥物I ;
[0031] ③反相硅膠柱層析；C 18填料預(yù)處理，將20倍質(zhì)量于步驟②中干燥物I的Ci8填 料裝于層析柱中，然后W流動(dòng)相（流動(dòng)相；V(己膳）；V(磯酸鹽）為16 ; 84)溶解層析 出來的層析物，上樣，采用甲醇-水溶液分次洗脫，收集洗脫液，濃縮，真空冷凍干燥，得干 燥物II ;
[0032] ④正相硅膠柱層析；用經(jīng)預(yù)處理的20倍質(zhì)量于步驟③所得干燥物II的柱層析用 硅膠（200-300目）W柱直徑-柱高濕法裝柱，所述柱直徑-柱高的比例為1:10,步驟③所 得干燥物II與硅膠混勻，加入洗脫劑溶解，所述洗脫劑為石油離、己酸己醋、氯仿、丙麗、甲 醇中的兩種溶劑混合；蒸發(fā)溶劑后干法上樣，洗脫，收集洗脫液，濃縮，真空冷凍干燥，得干 燥物III ;
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