單羥基苯基卟啉-2,4-二硝基苯磺酰酯的二氯甲烷溶液用20ml飽和氯化鈉 溶液洗滌3~4次，有機層再用無水硫酸鈉干燥（攪拌30min)，再減壓除去大部分的二氯 甲烷（體積約5~IOml)，干法上樣過柱（石油醚：乙酸乙酯=4:1)，過柱后的濾液旋干， 真空干燥，即得一種卟啉型近紅外硫離子熒光探針（單羥基苯基卟啉-2,4-二硝基苯磺酸 酯）。
[0033] 實施例2
[0034] 硫離子的檢測實驗。
[0035] (1)往1〇1111容量瓶中加入5.〇1111的1'冊、1.16臟〇1.171的探針溶液86 4 1，？!1 值為7. 4的0. 2mol. Γ1的磷酸鹽緩沖溶液0. 5ml，用二次蒸餾水稀釋至10ml，得到濃度為 10 μ mol噸4的探針溶液。取3. Oml探針溶液加入4ml比色皿中，分別加入S 2_，使其濃度分 別為 0, 〇· 5,1. 0, 2. 0, 3. 0,4. 0, 5. 0,6. 0, 7. 0,8. 0,9. 0,10 μ mol .I71。常溫下攪拌反應(yīng) 8min 測其熒光發(fā)射光譜（Xex= 550nm，λ em= 570nm)。得到探針與不同濃度S2^反應(yīng)的熒光發(fā) 射光譜圖（見圖3)。由圖3可知，探針溶液本身的熒光強度很小，當(dāng)加入S 2^反應(yīng)Smin后， 反應(yīng)體系的熒光強度明顯增強，且隨著S2^濃度的增加，體系的熒光強度逐漸增強，以上結(jié) 果說明探針能對微量S 2-產(chǎn)生高時效性的熒光增強響應(yīng)。
[0036] (2)以F/F。為縱坐標(biāo)（F為S 2_與探針溶液反應(yīng)后在最大發(fā)射波長λ em= 653nm 處的熒光強度，F(xiàn)tl為一個不加 S 的探針容液在相同條件下的熒光強度），以S 的濃度 Umol ·〇為橫坐標(biāo)，得到硫離子濃度與熒光強度F/FJ Aem= 653nm)的線性關(guān)系圖（見 圖4)。由圖4可知，S2_濃度在1.0-8. Oymol .L η的范圍內(nèi)與F/F。有很好的線性關(guān)系，線 性方程為 F/F。= 0.7188c (μ mol ·廠 1HL 2679 (R2= 0.9952, η = 8)，通過對檢測限的計 算，得到檢測限為64nM(3〇/k)。以上結(jié)果表明探針能在近紅外區(qū)（X em= 653nm)對微量 疒實現(xiàn)高靈敏度的檢測。
[0037] 實施例3
[0038] 硫離子的選擇性實驗。
[0039] (1)往 IOml 容量瓶中加入 5.0ml THF，1. ΙθπιπιοΙ.Γ1 的探針溶液 86μ1，pH 值 為7. 4的0. 2mol. Γ1的磷酸鹽緩沖溶液0. 5ml，用二次蒸餾水稀釋至10ml，得到濃度為 10 μπιο? · Γ1探針溶液。取3. Oml探針溶液加入4ml比色皿中，分別加入陰離子：S 2_，Γ， Cr，Br' C2O42' SO32' HSCV，Γ, NO，，Ac' S042' NO，，S2O32' CO，，SCN-，HCCV，使其濃度分別為 5 μηιο?. I71，常溫攪拌下反應(yīng)8min后測其焚光強度（λ ex= 550nm ; λ em= 570nm)，得到探針 與不同陰離子反應(yīng)后的熒光發(fā)射光譜圖（見圖5)。由圖5可知，加入S2-后，熒光強度顯著 增強，而加入等濃度的其它陰離子后熒光強度幾乎沒有變化，這說明反應(yīng)體系對S 2If很高 的選擇性。
[0040] (2)在盛有3ml探針溶液的4ml比色皿中，加入5 ymol/L的S2-和5 ymol/L陰 離子，S2-+ 陰離子序號從 1 到 16 分別為 S2-，S2_+r，s2_+cr，S2_+Br_，S 2_+C2042_，S2_+S0 32_， s2>hso，，s2>r，S2>N02、S 2>Ac、s2>so廣s2>no，，s2>s 2o32' s2>co32、s2>scn、s 2>hco" 常溫攪拌反應(yīng)8min后，測其焚光光譜（Aex= 550nm，λ em= 570nm)，記錄最大發(fā)射波長λ ex = 653nm處的熒光強度F，同時以一個不加陰離子的探針溶液做為空白對照，相同條件下測 其熒光強度Ftl，以F/匕為縱坐標(biāo)，陰離子序號為橫坐標(biāo)，得到不同的陰離子與S 共存時對 反應(yīng)體系熒光強度的影響的柱狀圖。結(jié)果如圖6所示。由圖6可知，當(dāng)陰離子與S2-共存 時，對S2-與探針反應(yīng)產(chǎn)生的熒光強度幾乎沒有影響，進(jìn)一步說明探針對S2-具有很高的選擇 性。
[0041] 上述實施例僅用來解釋說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明進(jìn)行限制，在本發(fā)明的精神 和權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)，對本發(fā)明所作出的任何修改和改變，都落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種卟啉型近紅外硫離子熒光探針的合成方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 稱取一定量的單羥基苯基卟啉溶于二氯甲烷，然后加入一定量的N，N-二異丙基乙 胺，再稱取一定量的2,4-二硝基苯磺酰氯溶于二氯甲燒，充N2保護(hù)10~30min后用恒壓 滴液漏斗將2,4-二硝基苯磺酰氯的溶液滴入單羥基苯基卟啉溶液中，室溫攪拌24~48小 時，得到單羥基苯基卟啉-2,4-二硝基苯磺酸酯的二氯甲烷溶液； (2) 將步驟（1)所得單羥基苯基卟啉-2,4-二硝基苯磺酸酯的二氯甲烷溶液用飽和氯 化鈉溶液洗滌2~4次，有機層再用無水硫酸鈉干燥，然后去除二氯甲烷，得固體粗品，固體 經(jīng)色譜柱進(jìn)行分離純化，真空干燥，即得有金屬光澤的紫紅色固體純品即卟啉型近紅外硫 離子熒光探針，其結(jié)構(gòu)如式（I)所示：2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的卟啉型近紅外硫離子熒光探針的合成方法，其特征在于： 所述的單羥基苯基卟啉、N，N-二異丙基乙胺及2,4_二硝基苯磺酰氯的摩爾比為1. 0 : 2. 0-2. 4 :1. 4-1. 8。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的卟啉型近紅外硫離子熒光探針的合成方法，其特征在于：所 述步驟（2)去除二氯甲烷的方法為減壓蒸餾。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的卟啉型近紅外硫離子熒光探針的合成方法，其特征在于：所 述步驟（2)的柱色譜，其淋洗劑為體積比為4:1的石油醚與乙酸乙酯的混合物。5. -種根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項所述的合成方法制備的硫離子熒光探針。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項所述的合成方法制備的硫離子熒光探針在硫離子檢測中 的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種卟啉型近紅外硫離子熒光探針的合成方法及應(yīng)用。本發(fā)明的熒光探針是以單羥基苯基卟啉(TPP-OH)、2，4-二硝基苯磺酰氯為原料，以N，N-二異丙基乙胺(DIEA)為催化劑，以二氯甲烷為溶劑，室溫下反應(yīng)制備而成。該探針能對硫離子實行高靈敏度、高選擇性的熒光檢測。與現(xiàn)有的有機小分子熒光探針相比，本發(fā)明得到的熒光探針具有較長的熒光發(fā)射波長(λem＞650nm)，可在近紅外區(qū)實現(xiàn)對微量硫離子的高靈敏度、高選擇性、高時效性檢測，在生物和環(huán)境檢測領(lǐng)域有著巨大的應(yīng)用前景。
【IPC分類】C09K11/06, G01N21/64, C07D487/22
【公開號】CN104945407
【申請?zhí)枴緾N201510413666
【發(fā)明人】曾榮今, 成奮民, 吳湘思, 劉瑪麗, 陳國良, 陳述, 龍云飛, 陳冠凡
【申請人】湖南科技大學(xué)
【公開日】2015年9月30日
【申請日】2015年7月14日