一種氧化型α-1,4-寡聚葡萄糖醛酸及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥化合物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸 及其制備方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 淀粉主要存在于植物的葉、根和種子中，呈顆粒狀。淀粉由直鏈的糖淀粉和支鏈的 膠淀粉組成。糖淀粉為α 1 - 4連接，能溶于熱水得到澄明溶液。膠淀粉也是α 1 - 4葡 聚糖，但是結(jié)構(gòu)中還含有α 1 - 6的支鏈，不溶于冷水，在熱水中呈黏膠狀。
[0003] 可溶性淀粉是由淀粉經(jīng)過氧化劑、酸、甘油、酶或其他方法處理而成的淀粉衍生 物。白色或淡黃色粉末，無味無臭?？扇苄缘矸凼亲冃缘牡矸郏苡跓崴?，不溶于冷水、醇和 醚。一般用大米、玉米、小米、土豆的淀粉都可制成可溶性淀粉，但以紅薯淀粉制得的可溶性 淀粉質(zhì)量最好。淀粉、可溶性淀粉除食用外，工業(yè)上用于制備糊精、麥芽糖、葡萄糖、酒精等， 也用于印刷、紡織、醫(yī)藥等產(chǎn)業(yè)。
[0004] 葡萄糖醛酸是一種常見的糖類分子，在體內(nèi)作為糖胺聚糖糖基組成的一部分，如 硫酸乙酰肝素、硫酸軟骨素等；也出現(xiàn)在小分子糖苷的糖基部分。但是自然界中沒有多聚或 寡聚葡萄糖醛酸。
[0005] 近年來，隨著生活水平的提高以及人口結(jié)構(gòu)日益老齡化，腦血管疾病的發(fā)病率和 死亡率正呈上升趨勢，已成為其中一大死因。其中，缺血性腦血管病在腦血管疾病種類中占 主要部分。目前具有良好治療抗腦缺血疾病的藥物種類有中藥組合物、中藥等，但是臨床療 效有待確證，因此研宄新的抗腦缺血疾病藥物具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，本發(fā)明的目的是提出一種氧化型α -1，4-寡聚葡 萄糖醛酸及其制備方法和用途，屬于醫(yī)藥化合物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明以自然界中豐富的淀粉， 特別是可溶性淀粉為原料，通過溴化鈉（NaBr) -2, 2, 6, 6-四甲基哌啶氧化物（TEMPO)-次氯 酸鈉（NaClO)氧化體系作用，將淀粉這種α-1，4-多聚葡萄糖的所有6位羥基氧化成羧基 形成葡萄糖醛酸，同時(shí)通過控制反應(yīng)條件制備出相應(yīng)的氧化型寡聚葡萄糖醛酸，該類化合 物有顯著的抗腦缺血活性，可以發(fā)展成潛在的抗腦缺血藥物。
[0007] 本發(fā)明的目的將通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)：
[0008] -種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸，聚合度為1-20糖，其具有通式I的結(jié)構(gòu)：
[0009]
[0010] 其中，η = 0-19 ;m = 0、1 或 2。
[0011] 一種上述氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的制備方法，包括以下步驟：
[0012] (1)稱取可溶性淀粉，制成水溶液；
[0013] (2)向步驟⑴中制得的水溶液中依次加入TEMPO和溴化鈉，再使用堿性pH調(diào)節(jié) 劑調(diào)節(jié)pH至10~11，之后加入次氯酸鈉溶液于0~30°C條件下反應(yīng)5~10小時(shí)，最后加 入有機(jī)溶劑終止反應(yīng)；
[0014] (3)置于500Da的透析袋中透析，濃縮、凍干得到所述氧化型α-1，4-寡聚葡萄糖 醛酸。
[0015] 優(yōu)選的，上述的制備方法，其中，所述步驟（1)中可溶性淀粉與水的質(zhì)量體積比為 Ig:(50 ~100)ml〇
[0016] 優(yōu)選的，上述的制備方法，其中，所述步驟（2)中所述可溶性淀粉與TEMPO的質(zhì)量 比為 1000: (5 ~50)。
[0017] 優(yōu)選的，上述的制備方法，其中，所述步驟（2)中溴化鈉與TEMPO的質(zhì)量比大于等 于 10:1〇
[0018] 優(yōu)選的，上述的制備方法，其中，所述步驟（2)中可溶性淀粉與次氯酸鈉溶液的質(zhì) 量體積比為Ig: (5~15)ml。
[0019] 優(yōu)選的，上述的制備方法，其中，所述步驟（2)中的有機(jī)溶劑為無水乙醇或甲醇。
[0020] 優(yōu)選的，上述的制備方法，其中，所述步驟（2)中堿性pH調(diào)節(jié)劑為5~50 % NaOH 溶液。
[0021] 一種上述氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸在制備抗腦缺血藥物中的應(yīng)用。
[0022] 本發(fā)明的突出效果為：將可溶性淀粉作為原料用于制備氧化型α -1，4-寡聚葡萄 糖醛酸，制備方法簡單，條件溫和，成本較低，易于產(chǎn)業(yè)化。同時(shí)該類化合物有顯著的抗腦缺 血活性，可以發(fā)展成潛在的抗腦缺血藥物。
[0023] 以下便結(jié)合實(shí)施例附圖，對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步的詳述，以使本發(fā)明 技術(shù)方案更易于理解、掌握。
【附圖說明】
[0024] 圖1是實(shí)施例5中氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸總離子流圖（TIC)和在210nm 下的紫外色譜圖；
[0025] 圖2為實(shí)施例5中峰1的一級質(zhì)譜圖即氧化型α-1,4-寡聚葡萄糖醛酸9和10 糖質(zhì)譜圖；
[0026] 圖3為實(shí)施例5中峰2的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸8糖質(zhì)譜 圖；
[0027] 圖4為實(shí)施例5中峰3的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸7糖質(zhì)譜 圖；
[0028] 圖5為實(shí)施例5中峰4的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸6糖質(zhì)譜 圖；
[0029] 圖6為實(shí)施例5中峰5的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸5糖質(zhì)譜 圖；
[0030] 圖7為實(shí)施例5中峰6的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1,4-寡聚葡萄糖醛酸4糖質(zhì)譜 圖；
[0031] 圖8為實(shí)施例5中峰7的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸3糖質(zhì)譜 圖；
[0032] 圖9為實(shí)施例5中峰8的一級質(zhì)譜圖即氧化型α-1,4-寡聚葡萄糖醛酸2糖質(zhì)譜 圖；
[0033] 圖10為實(shí)施例5中10到20糖的一級質(zhì)譜圖即氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸 dpl〇-dp20 質(zhì)譜圖；
[0034] 圖11為實(shí)施例6中氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的1H-NMR圖譜；
[0035] 圖12為實(shí)施例6中氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的13C-NMR圖譜；
[0036] 圖13為實(shí)施例7中氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸對正常小鼠海馬細(xì)胞的作用；
[0037] 圖14為實(shí)施例7中氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸對缺糖缺氧小鼠海馬細(xì)胞的 作用。
【具體實(shí)施方式】
[0038] 下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明的方法進(jìn)行說明，但本發(fā)明并不局限于此。下述實(shí) 施例中所述實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和材料，如無特殊說明，均可 從商業(yè)途徑獲得。
[0039] 實(shí)施例1 一種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的制備方法
[0040] (1)稱取Ig可溶性淀粉，溶解于50ml水中溶解，制成水溶液；
[0041] (2)向步驟⑴中制得的水溶液中依次加入5mg TEMPO和50mg溴化鈉，用5%Na0H 溶液調(diào)節(jié)pH至10,加入5ml次氯酸鈉溶液，于0°C條件下反應(yīng)5小時(shí)，加入無水乙醇終止反 應(yīng)；
[0042] (3)置于500Da的透析袋中透析，濃縮、凍干得到氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸。
[0043] 實(shí)施例2 -種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的制備方法
[0044] (1)稱取Ig可溶性淀粉，溶解于75ml水中溶解，制成水溶液；
[0045] (2)向步驟⑴中制得的水溶液中依次加入30mg TEMPO和350mg溴化鈉，用20% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至10,加入IOml次氯酸鈉溶液，于10°C條件下反應(yīng)8小時(shí)，加入無水乙醇 終止反應(yīng)；
[0046] (3)置于500Da的透析袋中透析，濃縮、凍干得到氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸。
[0047] 實(shí)施例3 -種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的制備方法
[0048] (1)稱取Ig可溶性淀粉，溶解于100mL水中溶解，制成水溶液；
[0049] (2)向步驟（1)中制得的水溶液中依次加入50mg TEMPO和500mg溴化鈉，用30% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至11，加入15ml次氯酸鈉溶液，于25°C條件下反應(yīng)10小時(shí)，加入甲醇終 止反應(yīng)；
[0050] (3)置于500Da的透析袋中透析，濃縮、凍干得到氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸。
[0051] 實(shí)施例4 一種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸的制備方法
[0052] (1)稱取Ig可溶性淀粉，溶解于100mL水中溶解，制成水溶液；
[0053] (2)向步驟⑴中制得的水溶液中依次加入50mg TEMPO和600mg溴化鈉，用50% NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至11，加入15ml次氯酸鈉溶液，于30°C條件下反應(yīng)10小時(shí)，加入甲醇終 止反應(yīng)；
[0054] (3)置于500Da的透析袋中透析，濃縮、凍干得到氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸。
[0055] 實(shí)施例5 -種氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸質(zhì)譜檢測
[0056] 5. 1 方法
[0057] 稱取2mg的氧化型α -1，4-寡聚葡萄糖醛酸用Iml的純水溶解后，用0. 22 μπι的 微孔濾膜過濾后，進(jìn)行超高效液相串聯(lián)四級桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UHPLC/Q-T0F-MS)分析。
[0058] UHPLC/Q-T0F-MS 分析使用 Agilent 6540UHD Accurate-Mass Q-TOF LC/ MS(安