一株膠凍樣芽孢桿菌及馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)集約生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種膠凍樣芽孢桿菌及其馬鈴薯專用 生物有機(jī)緩控釋肥料。
【背景技術(shù)】
[0002] 馬鈴薯是世界四大栽培作物之一。馬鈴薯性喜冷涼，具有單產(chǎn)高、適應(yīng)性強(qiáng)、用途 廣、營養(yǎng)豐富、經(jīng)濟(jì)效益高等特點(diǎn)，是一種重要的糧菜兼用型農(nóng)作物，其薯塊具有豐富的營 養(yǎng)，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和人民生活中占有重要的地位。目前我國馬鈴薯種植面積與產(chǎn)量保持世界 第一。
[0003] 伴隨著現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展，提高土地利用率和土地高度集約化經(jīng)營的種植理念已蓬 勃發(fā)展。由于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)具有復(fù)種指數(shù)高，作物種類單一的特點(diǎn)，使得同一作物或近緣作物連 作以后，即使在正常管理的情況下，也會產(chǎn)生產(chǎn)量降低、品質(zhì)變劣、生理狀況變差、病害愈發(fā) 嚴(yán)重的現(xiàn)象，這成為農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中的一個亟待解決的瓶頸問題。伴隨農(nóng)業(yè)勞動力缺乏 及勞動成本上升，方便高效的施肥方式已成為發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的重要途徑。
[0004] 土壤中有益微生物可有助于土壤結(jié)構(gòu)形成；分解土壤中有機(jī)質(zhì)及礦物質(zhì)；調(diào)節(jié)植 物生長；抑制病原微生物的繁殖；降解農(nóng)藥殘留等功能。利用有益微生物與有機(jī)肥發(fā)酵制 成的生物有機(jī)肥具有提高作物產(chǎn)量，改善作物品質(zhì)；提高土壤肥力，改善土壤理化性狀及微 生態(tài)系統(tǒng)；減少或降低植物病蟲害的發(fā)生等功效。
[0005] 控釋肥利用樹脂等材料包膜在肥料表面，可控制肥料養(yǎng)分的釋放速率，有效減少 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施肥次數(shù)及肥料養(yǎng)分損失，節(jié)約勞動成本，提高肥料的利用率。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明針對以上不足之處，提供了一種膠凍樣芽孢桿菌及其馬鈴薯專用生物有機(jī) 緩控釋肥料，此種肥料所含的各種營養(yǎng)元素滿足馬鈴薯不同生長發(fā)育階段對養(yǎng)分的需求， 有效提高馬鈴薯產(chǎn)量，有效防治馬鈴薯病害，改良土壤質(zhì)地 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一株膠凍樣芽孢桿菌，簡稱AMCC100035 菌株，已于2012年11月01日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保 藏編號為 CGMCC No. 6766。
[0007] -種馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料，含有上述膠凍樣芽孢桿菌，所述肥料各組 分按質(zhì)量配比如下： 生物有機(jī)肥 42~50 % ; 樹脂包膜尿素11~14 %; 尿素 6~9 % ; 磷酸二銨 11~13 %; 硫酸鉀 20~22 %。
[0008] 所述生物有機(jī)肥具體為將40~50 L由權(quán)利要求1所述膠凍樣芽孢桿菌制成的菌 劑與1噸符合NY 525-2011 (有機(jī)肥料)標(biāo)準(zhǔn)要求的有機(jī)肥混合均勻后進(jìn)行造粒；生物有機(jī) 肥料中有效活菌數(shù)彡IX 108 cfu/g，有機(jī)質(zhì)含量彡45%，以干基計(jì)。
[0009] 所述的樹脂包膜尿素為顆粒型，型號為44-0-0,含氮量多42%; 尿素為顆粒型，含氮量46 %; 磷酸二銨為顆粒型，含氮量18%，含五氧化二磷量46% ; 硫酸鉀為顆粒型，氧化鉀含量50% ; 生物有機(jī)緩控釋肥中氮、五氧化二磷、氧化鉀的質(zhì)量比為：10~11、5~6、10~11，含 權(quán)利要求1所述膠凍樣芽孢桿菌活菌數(shù)多2X107 cfu/g，有機(jī)質(zhì)含量多20%。
[0010] 馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料的制備方法，包括如下步驟： 將稱量好的生物有機(jī)肥、樹脂薄膜尿素、尿素、磷酸二銨、硫酸鉀按放入攪拌機(jī)中攪拌 10分鐘混合均勻，然后計(jì)量、包裝即制成馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥。
[0011] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)： 1、提高肥料養(yǎng)分利用率 本發(fā)明產(chǎn)品針對馬鈴薯養(yǎng)分需求規(guī)律設(shè)置養(yǎng)分配比，肥料中的氮以控釋狀態(tài)為主，其 肥料養(yǎng)分釋放曲線與馬鈴薯養(yǎng)分利用曲線相一致，既滿足馬鈴薯養(yǎng)分需求，又能減少無機(jī) 肥的揮發(fā)流失，提高肥料利用率。
[0012] 2、改善土壤生態(tài)環(huán)境，有效降低馬鈴薯病害發(fā)生 本發(fā)明產(chǎn)品包含微生物有機(jī)肥。有機(jī)肥料施入既為作物提供必需營養(yǎng)元素，改善作物 品質(zhì)，又可改良土壤質(zhì)地；而具有生防功能的膠凍樣芽孢桿菌的施入不僅可改善土壤根際 微生態(tài)環(huán)境，抑制馬鈴薯瘡痂病病原菌的發(fā)生危害，而且對馬鈴薯植株生長具有一定的促 生功能。因而可有效降低馬鈴薯瘡痂病的發(fā)生及促進(jìn)植株生長。
[0013] 3、一次施肥，省工省力 本發(fā)明產(chǎn)品具有控釋肥料，生產(chǎn)中一次施入無需追肥，減少勞動力投入，降低生產(chǎn)成 本。
【附圖說明】
[0014] 圖1為AMCC100035菌株的菌落形態(tài) 圖2為AMCC100035菌株對馬鈴薯(瘡痂?。┎≡种谱饔谩?br>【具體實(shí)施方式】
[0015] 以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn) 方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無特殊說明，均為自 常規(guī)生化試劑商店購買得到的。以下實(shí)施例中的定量試驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果取平 均值。
[0016] 實(shí)施例1、AMCC100035菌株的分離和保藏 一、AMCC100035菌株的分尚 1、分尚培養(yǎng)基 鹿糖0.5% (質(zhì)量比)、磷酸氫二鈉0.2% (質(zhì)量比)、硫酸鎂0.05% (質(zhì)量比)、碳酸隹$ 0. 01% (質(zhì)量比)、三氯化鐵0. 0005% (質(zhì)量比)、瓊脂1. 5% (質(zhì)量比)，溶劑為水pH 7. 0~7. 2 2、AMCC100035菌株的分離 稱取馬鈴薯根際土壤樣品l〇g (精確到〇. Olg)，加入帶玻璃珠（15個左右）的90ml無 菌水中（250ml錐形瓶)，在旋轉(zhuǎn)式搖床上180r/min充分震蕩30min即成母液菌懸液（KT1梯 度)。從KT 1稀釋液中移取lml液體加入9ml水中作為1(T2稀釋液…依次類推稀釋至合適 梯度。
[0017] 吸取0. 1ml稀釋液添加到分離培養(yǎng)基上，用無菌玻璃棒將稀釋液均勻 地涂開后置于37°C恒溫培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)2-3d。將純化獲得的單菌落 轉(zhuǎn)接到斜面培養(yǎng)基上進(jìn)行保藏備用。
[0018] 3、對馬鈴薯瘡痂病病原菌拮抗作用的驗(yàn)證 將分離的菌株以瘡痂病病原菌為靶標(biāo)菌株，采用紙碟法測定其對病原菌的拮抗效果， 得到具有抗病功能的菌株AMCC100035菌株，如圖2所示為紙碟法得到結(jié)果。
[0019]二、AMCC100035 菌株的保藏 AMCC100035菌株屬于膠凍樣芽抱桿菌（ifeciBys 菌株的菌落形態(tài) 及顯微形態(tài)見圖1。菌落在選擇性固體培養(yǎng)基上無色透明隆起，菌落濕潤有光澤，邊緣整齊， 粘稠有彈性。桿狀有芽孢。革蘭氏染色陽性，菌體外包有莢膜。明膠液化陽性，淀粉水解陽 性，檸檬酸鹽利用陽性，丙酸鹽利用陰性。氧化酶陰性，甲基紅陰性。
[0020] 膠凍樣芽抱桿菌（皿ci/agifliostts) AMCC100035,簡稱 AMCC100035 菌 株，已于2012年11月01日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡 稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)大屯路，中國科學(xué)院微生物研宄所)，保藏編號為CGMCC No. 6766〇
[0021] 實(shí)施例2、一種馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料的制備和應(yīng)用 一、生物有機(jī)肥的制備 1、微生物菌劑的制備 (1)將AMCC100035菌株接種到液體種子培養(yǎng)基(蔗糖0. 5%(質(zhì)量比)、磷酸氫二鈉0. 2% (質(zhì)量比)、硫酸鎂〇. 5% (質(zhì)量比)、碳酸鈣0. 01% (質(zhì)量比)、三氯化鐵0. 0005% (質(zhì)量比)，溶 劑為水pH 7. 0~7. 2,121°C滅菌20min)進(jìn)行種子培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度37°C，攪拌 速度為200rpm，培養(yǎng)時間24小時。
[0022] (2)將制備的AMCC100035菌株種子液接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基(可溶性淀粉2% (質(zhì) 量比)、酵母膏0. 7% (質(zhì)量比)、磷酸氫二鉀0. 2% (質(zhì)量比)、硫酸鎂0. 1% (質(zhì)量比)、碳酸隹$ 〇. 5% (質(zhì)量比);121°C滅菌20min。），接種量2~5% (體積比)、37°C (實(shí)際應(yīng)用中35~37°C 均可)、200rpm (實(shí)際應(yīng)用中180~220rpm均可)振蕩培養(yǎng)，得到菌濃度為5X 109cfu/ml (實(shí) 際應(yīng)用中，2X109~10X109cfu/ml均可）的微生物菌劑。
[0023] 2、生物有機(jī)肥的制備 將40~50 L所述AMCC100035菌劑與1噸符合NY 525-2011 (有機(jī)肥料）標(biāo)準(zhǔn)要求有 機(jī)肥混合均勻后進(jìn)行造粒，有機(jī)肥料具體可為唐山金土生物有機(jī)肥有限公司生產(chǎn)的冀農(nóng)肥 (2012)準(zhǔn)字8601號或者煙臺綠源有機(jī)肥有限公司生產(chǎn)的魯農(nóng)肥（2004)準(zhǔn)字1721號；使生 物有機(jī)肥料中有效活菌數(shù)多1 X 108cfu/g。
[0024] 二、生物有機(jī)緩控釋肥的制備 制備的馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥，由生物有機(jī)肥、樹脂包膜尿素、尿素、磷酸二銨、 硫酸鉀混合而成，可按如下表的配方進(jìn)行配制：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一株膠凍樣芽孢桿菌，其特征在于，簡稱AMCC100035菌株，已于2012年11月Ol日 保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No. 6766。
2. -種馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料，其特征在于，含有上述膠凍樣芽孢桿菌，所述 肥料各組分按質(zhì)量配比如下： 生物有機(jī)肥 42~50 % ; 樹脂包膜尿素11~14 %; 尿素 6~9 % ; 磷酸二銨 11~13 %; 硫酸鉀 20~22 %。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料，其特征在于， 所述生物有機(jī)肥具體為將40~50 L由權(quán)利要求1所述膠凍樣芽孢桿菌制成的菌劑與 1噸符合NY 525-2011有機(jī)肥料標(biāo)準(zhǔn)要求的有機(jī)肥混合均勻后進(jìn)行造粒；生物有機(jī)肥料中 有效活菌數(shù)彡IXlO8 cfu/g，有機(jī)質(zhì)含量彡45%，以干基計(jì)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料，其特征在于，所述的樹脂 包膜尿素為顆粒型，型號為44-0-0,含氮量多42% ; 尿素為顆粒型，含氮量46 %; 磷酸二銨為顆粒型，含氮量18%，含五氧化二磷量46% ; 硫酸鉀為顆粒型，氧化鉀含量50% ; 生物有機(jī)緩控釋肥中氮、五氧化二磷、氧化鉀的質(zhì)量比為：1〇~11、5~6、10~11，含 權(quán)利要求1所述膠凍樣芽孢桿菌活菌數(shù)多2XlO7 cfu/g，有機(jī)質(zhì)含量多20%。
5. 權(quán)利要求2-4所述的馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料的制備方法，其特征在于，包 括如下步驟： 將稱量好的生物有機(jī)肥、樹脂薄膜尿素、尿素、磷酸二銨、硫酸鉀按放入攪拌機(jī)中攪拌 10分鐘混合均勻，然后計(jì)量、包裝即制成馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一株膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）及馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料。本發(fā)明提供的膠凍樣芽孢桿菌（Bacillus mucilaginosus）AMCC100035，簡稱AMCC100035菌株，保藏編號為CGMCC No.6766。本發(fā)明還保護(hù)一種馬鈴薯專用生物有機(jī)緩控釋肥料，其特征在于：由生物有機(jī)肥42～50%；樹脂包膜尿素11～14%；尿素6～9%；磷酸二銨11～13%；硫酸鉀20～22%混合而成，按質(zhì)量百分比計(jì)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，所含的各種營養(yǎng)元素滿足馬鈴薯不同生長發(fā)育階段對養(yǎng)分的需求，有效提高馬鈴薯產(chǎn)量，有效防治馬鈴薯病害，改良土壤質(zhì)地。CGMCC No.676620121101
【IPC分類】C05G3-00, C12R1-07, C12N1-20
【公開號】CN104830706
【申請?zhí)枴緾N201410810021
【發(fā)明人】周波, 張銘鑠, 王冰, 王建宇, 陳升富, 張民
【申請人】山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2014年12月24日