Or4f3與or4f17在制備hbv相關疾病診斷試劑盒中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學生物檢測技術領域,尤其涉及OR4F3與OR4F17在制備HBV相關疾 病診斷試劑盒中的應用。
【背景技術】
[0002] 乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)是一種嗜肝性復合體DNA病毒。已有 的研宄表明,HBV只對人和猩猩有易感性。HBV感染后可導致慢性或急性肝炎(chronic hepatitisB,CHB),而慢性肝炎感染是導致肝硬化(livercirrhosis,LC)、肝癌 (hepatocellularcarcinoma,HCC)和肝衰竭(liverfailure,LF)的主要病因。其中肝癌 是僅次于食道癌、胃癌的第三大常見惡性腫瘤,嚴重危害人們的健康。從全世界范圍來看, 肝癌的發(fā)病率位居第六位,死亡率位居第三位。中國約有9400萬的慢性乙肝患者,每年有 將近30萬人死于肝癌。
[0003] HBV相關疾病,是指HBV感染后引發(fā)的相關疾病,包括但不限于乙肝肝炎、肝纖維 化、肝硬化和肝癌等。這些肝病中尤其是肝癌的診斷對其治療效果及生存質量有極為重大 的意義。有研宄指出,通過外周血相關指標檢測出來的早期肝癌,其治療效果較好,生存率 有明顯提升,對患者生存質量影響較小。但是對于晚期肝癌患者,其治療后不僅生存率沒有 提高,反而對患者生活質量產(chǎn)生較大的影響。所以,肝癌的治療成功與否,與早期診斷是否 成功有較大聯(lián)系。
[0004] 目前公認的肝癌診斷指標是甲胎蛋白(a-fetoprotein,AFP)。甲胎蛋白在嬰幼 兒及肝癌患者肝組織內含量較多,而正常人肝組織內含量較少,是成熟的肝癌診斷指標。但 是其受試者工作特征曲線線下面積(areaundercurve,AUC)也不過在81%左右。
[0005] 人類嗅覺受體基因家族是人基因組中規(guī)模最大的基因家族,0R4F3與0R4F17為 嗅覺受體基因家族的成員。嗅覺受體蛋白屬于G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR),具有7次跨膜結 構域的結構,并且負責識別和介導與氣味有關的信號轉導的。有研宄證明嗅覺受體相關 基因在前列腺癌中發(fā)生變異,并且與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有關,對前列腺癌有一定的預示 作用([l]BettinaMalnic,PaulA.Godfrey,andLindaB.Buck.Thehumanolfactory receptorgenefamily.PNAS.Vol. 101,no. 8, 2584-2589 ; [2]ElenaLinardopoulou et.al.Transcriptionalactivityofmultiplecopiesofasubtelomerically locatedolfactoryreceptorgenethatispolymorphicinnumberandlocation. HumanMolecularGenetics, 2001,Vol. 10,No. 21. 2373-2383 ; [3]ffengJ,WangJ,HuX,et al.PSGR2,anovelG-proteincoupledreceptor,isoverexpressedinhumanprostate cancer.InternationaljournalofcancerJournalinternationalducancer2006 ; 118(6):1471-80doi:10. 1002/ijc. 21527)〇
[0006]目前尚無0R4F3與0R4F17應用于HBV相關疾病,特別是肝癌診斷的文獻報道。
【發(fā)明內容】
[0007] 本發(fā)明的目的在于提供HBV相關疾病的診斷標志物,本發(fā)明的目的也在于提供 OR4F3與OR4F17的新用途,即在制備HBV相關疾病診斷試劑盒中的應用。
[0008] 本發(fā)明的第一方面,提供了OR4F3與OR4F17作為HBV相關疾病診斷標志物的應 用。
[0009] 本發(fā)明的第二方面,提供了OR4F3與OR4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷 試劑盒中的應用。
[0010] 本發(fā)明所述的OR4F3與OR4F17的信息如下所示:
[0011] OR4F3 Chromosome 5, NC_000005. 10(181367287. . 181368225);
[0012] OR4F17 :Chromosome 19, NC_000019.10(107152.?111690)〇
[0013] 本發(fā)明所述的OR4F3與OR4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷試劑盒中的 應用,所述的診斷試劑,為檢測生物樣品中OR4F3的含量、OR4F17的含量的試劑的組合。
[0014] 所述的診斷試劑盒,包含了檢測生物樣品中OR4F3的含量、OR4F17的含量的試劑。
[0015] 所述的檢測生物樣品中檢測生物樣品中OR4F3的含量、OR4F17的含量的試劑,選 自:對OR4F3、OR4F17具有檢測特異性的PCR引物。
[0016] 所述的對OR4F3與OR4F17具有檢測特異性的PCR引物如下:
【主權項】
1. 0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷試劑盒中的應用。
2. 根據(jù)權利要求1所述的0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷試劑 盒中的應用,其特征在于,所述的診斷試劑為檢測生物樣品中0R4F3的含量、0R4F17的含量 的試劑的組合。
3. 根據(jù)權利要求1所述的0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷試劑 盒中的應用,其特征在于,所述的診斷試劑盒包含了檢測生物樣品中0R4F3的含量、0R4F17 的含量的試劑。
4. 根據(jù)權利要求2或3所述的0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷試 劑盒中的應用,其特征在于,所述的檢測生物樣品中檢測生物樣品中0R4F3的含量、0R4F17 的含量的試劑,選自:對0R4F3、0R4F17具有檢測特異性的PCR引物。
5. 根據(jù)權利要求4所述的0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷試劑 盒中的應用,其特征在于所述的對0R4F3與0R4F17具有檢測特異性的PCR引物如SEQID NO: 1~4所示。
6. 根據(jù)權利要求2或3所述的0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或診斷 試劑盒中的應用,其特征在于,所述的生物樣品獲自對象的外周血。
7. 根據(jù)權利要求1至6任一所述的0R4F3與0R4F17在制備HBV相關疾病診斷試劑或 診斷試劑盒中的應用,其特征在于,所述的HBV相關疾病為乙肝肝炎、肝纖維化、肝硬化或 肝癌。
8. -種HBV相關疾病的診斷試劑盒,該試劑盒包含了檢測生物樣品中0R4F3的含量、 0R4F17的含量的試劑。
9. 根據(jù)權利要求8所述的一種HBV相關疾病的診斷試劑盒,其特征在于,所述的診斷試 劑盒是由反轉錄系統(tǒng)、引物系統(tǒng)和擴增系統(tǒng)組成,所述的引物系統(tǒng)包括如SEQIDN0:1~4 所示的PCR引物。
10. -種利用如權利要求8或9所述的診斷試劑盒進行HBV相關疾病的檢測方法,所述 的檢測方法包括以下步驟: A. 抽提血液基因組總DNA; B. 利用引物對0R4F3與0R4F17的拷貝數(shù)進行定量檢測的試劑,所述的引物為SEQID NO: 1~4所示; C. 計算出0R4F3與0R4F17的拷貝數(shù)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)學生物檢測技術領域,本發(fā)明提供了OR4F3與OR4F17的新用途,具體是在制備HBV相關疾病診斷試劑盒中的應用,本發(fā)明進一步提供了一種利用針對OR4F3和OR4F17的定量PCR檢測來進行HBV相關疾病診斷的試劑盒和檢測方法。本發(fā)明的試劑盒和檢測方法簡便,可靠,周期短,特異性高,易于臨床推廣。
【IPC分類】C12Q1-68
【公開號】CN104818329
【申請?zhí)枴緾N201510198829
【發(fā)明人】劉善榮, 程樹群, 龐亞南, 郭衛(wèi)星, 汪佳祺
【申請人】中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學
【公開日】2015年8月5日
【申請日】2015年4月22日