體外診斷受試者的薄皮狀態(tài)的方法及相關(guān)應(yīng)用
【專利說明】體外診斷受試者的薄皮狀態(tài)的方法及相關(guān)應(yīng)用 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及皮膚學(xué)的技術(shù)領(lǐng)域，并且涵蓋皮膚學(xué)的化妝和治療兩方面。
[0002] 更具體而言，本發(fā)明設(shè)及診斷受試者的薄皮狀態(tài)的體外方法及鑒定用于預(yù)防或治 療薄皮狀態(tài)的活性劑的篩選方法。本發(fā)明還設(shè)及要用于所述方法的試劑盒和核酸陣列。
[0003] 頭皮屑值）是一種在多達(dá)50%的人中發(fā)生的頭皮狀況，并且盡管有幾種可用的治 療，其一直存在了幾個世紀(jì)。
[0004] 頭皮屑又稱為單純頭皮慷疹（pityriasissimplexcapilitii,P.simplex capitis)和干性慷疹（p.sicca),該詞語頭皮屑源于盎格魯-撒克遜語，即意為"皮疹"的 "tan"和意為"臟"的"化of"的組合。它通常W頭皮的過多片狀剝落為特征，并且經(jīng)常引起 發(fā)癢。在約5%人群中觀察到的極端重度形式的頭皮屑中，又稱為脂溢性皮炎（seborrheic dermatitis,SD)，身體的其他區(qū)域諸如面部和/或胸部也可W受到影響，并且該些區(qū)域的 皮膚（包括頭皮）炎癥可W是可見的。雖然不是威脅生命的，但是頭皮屑是相對不美觀的， 而且可W導(dǎo)致自尊喪失。
[0005] 至今為止，為了闡明此種狀況的起源而進(jìn)行的研究已經(jīng)將酵母生物馬拉色菌 (Malassezia)鑒定為主要的致病因素。雖然也會設(shè)及其它因素，至今開發(fā)的去頭屑組合物 牽設(shè)使用軟化并溶解薄片（flake)的角質(zhì)層分離劑化eratol^icagent),使用角質(zhì)化調(diào) 節(jié)劑，使用抗真菌劑或抗脂溢劑（antiseborrheicagent)，在需要時使用消炎藥，及組合使 用它們。也有提議天然產(chǎn)物諸如茶樹油、蜂蜜或肉桂酸，通常與其他合成的活性劑組合。
[0006] 然而，該些藥劑僅僅最多緩解頭皮屑的體征，而沒有導(dǎo)致使用停止后該狀況的完 全消退。通常，在受頭皮屑影響的受試者停止使用抗真菌制劑后，狀況的外觀體征重現(xiàn)，并 且馬拉色菌群體升回到其初始水平。
[0007] 因此，需要鑒定新穎的有效且更為合適的頭皮屑治療，而且還需要表征受頭皮屑 影響的受試者中薄皮狀態(tài)的嚴(yán)重性程度W明顯調(diào)節(jié)所述治療。
[000引至今為止，已知評估薄皮狀態(tài)的技術(shù)主要依賴于頭皮的視覺檢查。
[0009] 發(fā)明人令人驚訝且出乎意料地鑒定出，在頭皮上定居的微生物菌群的特定失調(diào) (尤其設(shè)及伴隨丙酸桿菌物種密度降低的馬拉色菌物種密度顯著升高）與薄皮狀態(tài)的嚴(yán)重 程度直接相關(guān)。
[0010] 因此，本發(fā)明第一次提供了診斷受試者的薄皮狀態(tài)的體外方法，其是高度可預(yù)測 的，靈敏的，且展現(xiàn)出較高的預(yù)測價值。本發(fā)明進(jìn)一步提供了鑒定用于預(yù)防或治療所述狀態(tài) 的活性劑的篩選方法，及用于實施所述方法的試劑盒和核酸陣列。
[0011] 發(fā)明詳述
[0012] 關(guān)于遍及本說明書的不同術(shù)語的使用，適用W下定義。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的"薄皮狀態(tài)"意為受試者頭皮的異常脫落，即死亡的皮膚細(xì)胞的喪 失。薄皮狀態(tài)通常W頭皮的皮膚細(xì)胞的過多喪失為特征，其也可W伴隨皮膚的輕度發(fā)紅和 刺激。一般地，喪失的細(xì)胞對于肉眼而言W帶白色或帶灰色的薄片（又稱為頭皮屑）可 見，其可W從頭皮脫落并落下，并且通常由角化細(xì)胞簇構(gòu)成。喪失的細(xì)胞數(shù)目反映薄皮狀 態(tài)的嚴(yán)重程度，其可W通過不同方法諸如視覺評分（即，ASFS，又稱為粘附頭皮剝落量表 (a化erentscalpflakingscale);VanAbbe, 1964)，鱗屑計量法（squamometry)或通過 使用角化細(xì)胞計數(shù)（Pierard-Franchimont等，2006;PierardGE等，1995;PierardGE 等，1992)評估。高于10的ASFS得分通常表征薄皮狀態(tài)，若ASFS得分高于24,則其也可W 與皮膚的輕度炎癥聯(lián)系起來。在脂溢性皮炎（SD)的情況中，ASFS得分高于24,并且薄皮狀 態(tài)伴有皮膚炎癥、發(fā)紅和劇烈發(fā)癢。如本文中使用的，"脂溢性皮炎"（SD)指薄皮狀態(tài)的重 度形式，其不僅可W影響受試者的頭皮，而且還影響面部和/或胸部，并且其與皮膚炎癥有 關(guān)。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明，"去頭屑劑"（或活性劑）是對如上文定義的薄皮狀態(tài)，包括其重度形 式，諸如脂溢性皮炎（SD)有活性的成分。
[0015] 術(shù)語"微生物群體微菌群"，"微生物菌群"，或"微生物群落"）指占據(jù)特定環(huán) 境的兩個或更多個微生物細(xì)胞。在本發(fā)明的內(nèi)容中，所述微生物包括細(xì)菌、古細(xì)菌、微觀真 核生物和真菌（諸如酵母）及病毒，優(yōu)選細(xì)菌和真菌。環(huán)境指微生物存在于其中并且對微 生物生長和形成具有影響的因素、條件、或影響，諸如在受試者的皮膚或毛發(fā)上，更優(yōu)選在 所述受試者的頭皮、面部、胸部或甚至全身的皮膚或毛發(fā)上。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明的細(xì)菌的例子包括但不限于放線菌科（Actinobacteria)、厚壁菌科 (Firmi州tes)和變形菌科（Proteobacteria)的細(xì)菌，更具體地細(xì)菌屬于丙酸桿菌屬、微 桿菌屬（Microbacterium)、葡萄球菌屬（Staphylococ州S)、鏈球菌屬（Str巧tococ州S)、 氣球菌屬（Aerococcus)、差異球菌屬（Alloiococcus)、厭氧球菌（Anaerococ州S)、芬戈 爾德菌屬（Finegoldia)、李生球菌屬（Gemella)、顆粒鏈菌屬（Granulicatella)、乳球菌 屬（Xactococ州S)、嗜腺菌屬（P巧toni地ilus)、不動桿菌屬（Acinetobacter)、澄單胞菌 屬（Aurantimonas)、短波單胞菌屬炬evundimonas)、嗜血桿菌化36111〇地5^1113)、甲基桿菌 屬（Meth}dobacte;rium)、莫拉氏菌屬（Moraxella)、奈瑟氏菌屬（Neisseria)、副球菌屬 (Paracoccus)、假單胞菌屬（Pseudomonas)、銷氨醇單胞菌屬（S地ingomonas)、和寡養(yǎng)單胞 菌屬（Stenotrophomonas)。丙酸桿菌物種特別包括物種瘦瘡丙酸桿菌化acnes)和顆粒丙 酸桿菌化granulosum)。葡萄球菌物種特別包括物種表皮葡萄球菌（S. epidermis)、耳葡 萄球菌化auricularis)、山羊葡萄球菌（S. caprae)、人葡萄球菌（S. hominis)、和施氏葡 萄球菌僅schleiferi)。
[0017] 根據(jù)本發(fā)明的真菌的例子包括但不限于子囊菌科（Ascomycota)和擔(dān)子菌科 炬asidiomycota)的真菌，更具體地屬于德己利氏酵母屬值ebaryomyces)、Exophylia、 青霉屬（Penicillium)、松蘿屬化snea)、隱球菌屬Kryptococ州s)、馬拉色菌屬、紅酵 母屬（Miodotolura)、裂權(quán)菌屬（Schizophyllum)和大囊松果傘（Strobilirus)的真 菌。馬拉色菌屬包括約14個種，其中包括限制性馬拉色菌（M.restricts)、球形馬拉色菌 (M.globosa)、合軸馬拉色菌（M.sympodi