hesis of DNA in Vitro via a Polymerase-Catalyzed Chain Reaction, Kary Mullis等人，Method In Enzymology, 155卷，第335-350頁(yè)（1987)中描述的一種或多種方法。
[0034] 在至少一個(gè)實(shí)施方案中，PCR分析是如由Jo Vandesompele作序的商業(yè)小冊(cè)子 qPCR guide (自網(wǎng)址http://www. eurogentec. com/f ile-browser. html在 1 月 19 日，2012 下載）中描述的qPCR分析。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，方法是定量qPCR分析。在至少一個(gè) 實(shí)施方案中，方法是定性qPCR分析。
[0035] 在至少一個(gè)實(shí)施方案中，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR)是用于靶向核酸（DNA或RNA)的 序列和提高靶序列的拷貝數(shù)目以獲得有用數(shù)量的核酸用于下游分析的方法。該方法可被 應(yīng)用于在包括但不限于機(jī)制毛毯（machine felt)、板缺陷（sheet defect)、機(jī)器沉積物 (machine deposit)等的各種樣品中尿素降解生物體和硝化生物體的檢測(cè)。
[0036] 在至少一個(gè)實(shí)施方案中，在DNA通過使用商業(yè)上可得的任何DNA提取試劑盒從樣 品中提取后，它可以通過使用例如定量PCR方法的PCR方法實(shí)時(shí)分析。定量PCR利用與PCR 同樣的技術(shù)，但是它包括實(shí)時(shí)定量組成部分。在這種技術(shù)中，引物用于基于生物體的身份或 特定基因的功能靶向感興趣的DNA序列。例如熒光的一些檢測(cè)形式可以用于檢測(cè)所得的 DNA或"DNA擴(kuò)增子"。熒光的改變與靶DNA的量直接成比例。將達(dá)到預(yù)定的熒光閾值需要 的循環(huán)的數(shù)目與對(duì)應(yīng)特定DNA靶的標(biāo)準(zhǔn)相比。標(biāo)準(zhǔn)典型地是純的和以跨幾個(gè)對(duì)數(shù)范圍濃度 的已知量的靶基因。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中存在的靶DNA的拷貝數(shù)目。每一樣品的拷貝 數(shù)目然后用于確定每一樣品的細(xì)胞數(shù)目。
[0037] 在至少一個(gè)實(shí)施方案中，使用引物組，其使用保守方法靶向來自硝化生物體的DNA 序列以定量總生物體。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，使用靶向尿素降解生物體，包括但不限于鞘 氨醇單胞菌（Sphingomonas sp.)、鞘氨醇單胞菌（Sphingomonas spp.)、不動(dòng)桿菌、和黃桿 菌的引物組。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，引物用于區(qū)分尿素降解和非尿素降解生物體。
[0038] 在至少一個(gè)實(shí)施方案中，使用引物組，其使用保守方法靶向來自硝化生物體的DNA 序列以定量總生物體。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，使用靶向硝化生物體，包括但不限于亞硝化 單胞菌（Nitrosomonas)、亞硝化葉菌（Nitrosolobus)、亞硝化球菌（Nitrosococcus)、亞硝 化弧菌（Niotrosospira)、亞硝化螺菌（Niotrosospira)、硝化桿菌（Nitrobacter)、和硝化 球菌（Nitrococcus)的引物組。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，引物用于區(qū)分硝化和非硝化生物 體。
[0039] 在至少一個(gè)實(shí)施方案中，檢測(cè)方法包括檢測(cè)穩(wěn)定劑降解生物體的指示物 (telltale)存在。例如因?yàn)樵S多這些生物體分泌脲酶，所以方法包括檢測(cè)脲酶或氨的存在。 而且許多硝化生物體將穩(wěn)定劑轉(zhuǎn)化為將不是另外由殺生物劑的氧化反應(yīng)產(chǎn)生的終反應(yīng)物， 所以方法包括檢測(cè)這些終反應(yīng)物（例如通過它們消化含氮化合物產(chǎn)生的特定的硝酸鹽、羥 胺或亞硝酸鹽）的存在。此外策略可包括檢測(cè)這些生物體（例如氨單加氧酶或亞硝酸鹽氧 化還原酶）產(chǎn)生的其他基于非含氮的終反應(yīng)物。最后，另一策略可包括注意：如果當(dāng)使用多 樣性指數(shù)分析，總?cè)后w是否響應(yīng)于應(yīng)用穩(wěn)定氧化劑殺生物劑生長(zhǎng)，但是它響應(yīng)于應(yīng)用該殺 生物劑的非穩(wěn)定形式短暫地下降，這表明被以穩(wěn)定劑為食物的系統(tǒng)的生物體定殖。另一策 略可包括通過在實(shí)驗(yàn)室中篩選穩(wěn)定氧化劑的抗微生物效應(yīng)，注意群體的發(fā)展。 實(shí)施例
[0040] 前述可以通過引用以下實(shí)施例更好的理解，展示其用于闡述目的并且不預(yù)期限制 本發(fā)明范圍。
[0041] 造紙廠的工藝水流通過使用尿素穩(wěn)定的氯程序處理。盡管穩(wěn)定氧化劑程序應(yīng)用之 前的初始實(shí)驗(yàn)室篩選表明尿素穩(wěn)定的氯程序在控制該廠中的微生物生長(zhǎng)方面是有效的，重 復(fù)篩選表明該程序不再有效（表1)。該細(xì)菌群也展示了對(duì)異噻唑酮?dú)⑸飫┑哪褪堋?br>[0042] 表1顯示了使用NaOCl處理的工藝用水的實(shí)驗(yàn)室篩選和使用尿素穩(wěn)定的氯處理后 10個(gè)月的工藝用水樣品的篩選結(jié)果的比較。結(jié)果表明對(duì)使用尿素穩(wěn)定的氯程序的工藝用水 處理耐受的微生物群的發(fā)展。涂布4小時(shí)樣品后，工藝用水樣品用未處理的工藝用水（1% v/v)挑戰(zhàn)。典型地，尿素穩(wěn)定的氯相對(duì)于未處理的對(duì)照展示了極好的長(zhǎng)期保持以及在4小 時(shí)和24小時(shí)低的細(xì)菌密度。在表1中，在對(duì)該廠水系統(tǒng)應(yīng)用該程序前觀察到來自尿素穩(wěn)定 的氯的保持和耐受群的發(fā)展。重復(fù)篩選展示了新廠群（mill population)對(duì)尿素穩(wěn)定的氯 程序的耐受。
[0043]表1:
[0044]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種處理工藝用水系統(tǒng)中微生物侵?jǐn)_的方法，所述方法包括w下步驟： 向所述工藝用水系統(tǒng)中引入包含氧化劑和氧化劑穩(wěn)定劑的殺生物組合物，所述穩(wěn)定劑 允許所述氧化劑持續(xù)作為殺生物劑而不管所述系統(tǒng)中存在對(duì)所述氧化劑的高需求， 檢測(cè)能夠降解所述氧化劑穩(wěn)定劑的生物體的存在， 如果檢測(cè)到，引入能夠中和所述降解生物體的物質(zhì)的組合物，而不另外損害所述殺生 物組合物的效力。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述穩(wěn)定劑包括基于氮的化合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述生物體是脈酶分泌生物體。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述生物體是硝化生物體。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述組合物容許高需求并且所述生物體在所述容 許高需求的組合物已經(jīng)完全被消耗很長(zhǎng)時(shí)間后保持中和。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述檢測(cè)通過選自由DNA分析、PCR分析、qPCR分 析、脈酶檢測(cè)、氨檢測(cè)、氨單加氧酶檢測(cè)、亞硝酸鹽氧化還原酶、硝酸鹽檢測(cè)、亞硝酸鹽檢測(cè)、 哲胺檢測(cè)W及其任何組合組成的列表的至少一項(xiàng)完成。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中如果沒有引入所述中和組合物，所述生物體實(shí)際 上在所述殺生物組合物存在下比在殺生物組合物缺失下將會(huì)更好地繁榮生長(zhǎng)，因?yàn)樗黈所 述穩(wěn)定劑為食物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述中和組合物包括戊二醒、DBNPA和其任何組 厶 口 〇
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述中和組合物包括次氯酸鋼。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中如果檢測(cè)到脈酶降解群，所述中和組合物包括無 機(jī)氯胺。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述檢測(cè)通過檢測(cè)所述工藝用水中W下化合物 的存在來實(shí)現(xiàn)：所述化合物是硝化生物體轉(zhuǎn)化所述穩(wěn)定劑而產(chǎn)生的特有的化合物并且所述 化合物不是另外由所述殺生物劑的氧化反應(yīng)產(chǎn)生的化合物。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述檢測(cè)通過檢測(cè)所述工藝用水中W下化合物 的存在來實(shí)現(xiàn)：所述化合物是尿素降解生物體轉(zhuǎn)化所述穩(wěn)定劑而產(chǎn)生的特有的化合物并且 所述化合物不是另外由所述殺生物劑的氧化反應(yīng)產(chǎn)生的化合物。
【專利摘要】本發(fā)明提供了阻止或控制降解氧化劑穩(wěn)定殺生物劑中氧化劑穩(wěn)定劑的生物體的生長(zhǎng)的處理策略。這允許穩(wěn)定鹵素程序以在它們預(yù)期的水平執(zhí)行并且阻止在維持這些微生物群的控制和降低由它們的酶副產(chǎn)品創(chuàng)造的鹵素需求的嘗試中增加的鹵素使用的需要。
【IPC分類】C12Q1-68, C12Q1-18, C12Q1-04
【公開號(hào)】CN104685063
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201380050547
【發(fā)明人】勞拉·E·賴斯, 伊利薩·盧特
【申請(qǐng)人】納爾科公司
【公開日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2013年10月18日
【公告號(hào)】CA2885190A1, EP2912188A1, US20140110347, WO2014066177A1