微生物培養(yǎng)器、微生物檢驗試劑盒、透析液的檢驗方法、微生物的培養(yǎng)方法、微生物的檢驗 ...的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本申請揭示一種微生物培養(yǎng)器、微生物檢驗試劑盒、透析液的檢驗方法、微生物的 培養(yǎng)方法、微生物的檢驗方法、及微生物培養(yǎng)器的制造方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 微生物的培養(yǎng)是使用各種培養(yǎng)基而進行。培養(yǎng)基例如有以前以來通常使用的液體 培養(yǎng)基或瓊脂培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基雖然沒有試樣量的限制，但存在無定量性、體積大的缺 點。另外，關(guān)于瓊脂培養(yǎng)基，當(dāng)采用通常使用的直徑90mm的培養(yǎng)皿時，試樣液量的上限通常 為至多l(xiāng)mL，超過lmL的試樣液難以進行檢驗。因此，檢驗微生物濃度相對較低的試樣時，為 了以lmL左右的試樣液進行檢驗，先對原試樣進行增菌培養(yǎng)后再供于檢驗。
[0003] 例如，對于沙門菌（salmonella)等食物中毒菌的檢驗，要求lcfu/25g的敏感度。 另外，近年來，對于例如透析用水（透析水）等醫(yī)療系的水的檢驗，不僅要檢驗放熱性物質(zhì)， 也推薦檢驗微生物。然而，由于此種試樣的微生物濃度很低，故而有時檢驗需要大量試樣。 例如，對于透析水，有時要求可檢測出試樣lmL中微生物小于一個的高敏感度，若可對超過 lmL的例如10mL~100mL的試樣液直接、定量性地進行微生物檢驗，則較簡便，故而理想。
[0004] 對于此種大量試樣的檢驗，若使用更大的容器，則也可進行超過lmL的試樣的檢 驗，但占用空間而不實用。因此，例如若以大面積使用如專利文獻1中提出的片狀培養(yǎng)基， 則也可進行超過lmL的試樣的定量檢驗，但變得需要大于培養(yǎng)基部分的襯紙與覆蓋膜，因 此會損害省空間性，若成為大面積，則覆蓋部的開閉、試樣的擴散也需要時間。另外，在為薄 膜過濾(membrane filter,MF)法的情況下，需要專用的過濾器支架或歧管、或者抽吸泵類， 在檢驗透析液時必須制成專用的培養(yǎng)基等，作業(yè)步驟多而繁雜。另外，在為無需瓊脂培養(yǎng)基 的簡易MF法的情況下，必須添加液體培養(yǎng)基，不易進行菌數(shù)的測定，另外，將試樣裝入裝置 時，細菌或病毒容易附著在手等上。另外，在顯色反應(yīng)法（SensiMedia法）的情況下，由于 為液體培養(yǎng)基，因此無定量性，另外，在檢測原理上，當(dāng)存在不具有呼吸活性的菌的情況下 無法進行正確的檢測。
[0005] 因此，近年來提出有一種在袋狀容器中收納有片狀培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)器，其省 空間，且可簡便地實現(xiàn)超過lmL的相對大量試樣的微生物定量檢驗（例如參照專利文獻2)。
[0006][現(xiàn)有技術(shù)文獻]
[0007][專利文獻]
[0008][專利文獻1]國際公開第01/44437號手冊
[0009][專利文獻2]日本專利特開2007-124985號公報 [0010][專利文獻3]日本專利特開平7-75545號公報
[0011] [專利文獻4]日本專利特開平8-112088號公報
[0012][專利文獻5]日本專利特開平11-137241號公報

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013] 發(fā)明所要解決的問題
[0014] 在袋狀容器收納有片狀培養(yǎng)基的微生物培養(yǎng)器例如可通過打開袋狀容器的開口 部分的拉鏈（zipper)而使其成為開口狀態(tài)，并置于滅菌氣體的氛圍（atmosphere)中，而成 為滅菌過的微生物培養(yǎng)器。但是，利用此種方式進行滅菌處理的微生物培養(yǎng)器有在滅菌處 理后至關(guān)閉開口部分為止的期間，微生物等異物通過開口部分侵入容器內(nèi)部的問題。另外， 使用拉鏈類作為開口部分的開閉物的袋狀容器由于密閉性較低，故而即便為關(guān)閉開口部分 的狀態(tài)也有異物類侵入的問題，另外，例如難以大量地裝入透析液之類的原本細菌數(shù)較少 的試樣以檢測細菌。
[0015] 因此，本申請的目的在于提供一種可抑制侵入的異物的存在且裝入大量試樣的微 生物培養(yǎng)器、微生物檢驗試劑盒、透析液的檢驗方法、微生物的培養(yǎng)方法、微生物的檢驗方 法、及微生物培養(yǎng)器的制造方法。
[0016] 解決問題的技術(shù)手段
[0017] 為了解決上述課題，本發(fā)明分開設(shè)置用以將試樣裝入培養(yǎng)袋的注入口與用以將培 養(yǎng)基裝入內(nèi)部的開封部分（unsealing portion)。
[0018]詳細而言，本發(fā)明是一種微生物培養(yǎng)器，包括將片狀培養(yǎng)基裝入內(nèi)部并進行密封 的附注入口的培養(yǎng)袋。若為此種微生物培養(yǎng)器，則將試樣裝入培養(yǎng)袋內(nèi)時，是通過與可取放 培養(yǎng)基的開封部分相比異物難以通過的注入口裝入，因此會抑制侵入的異物的存在。另外， 由于容器的密閉性好，難以漏出，故而也可裝入大量試樣。
[0019] 此外，培養(yǎng)部的注入口只要可在注入試樣后成為密封狀態(tài)，則可為任何注入口，例 如可應(yīng)用噴口（spout)、螺旋蓋（screw cap)、壓入蓋、皇冠蓋（crown cap)、橡膠塞（rubber plug)、氨甲酸乙酯塞（urethane plug)、娃塞（silicon plug)、軟木塞（cork)、金屬制蓋 (molten cap)、棉塞、紙塞、三通旋塞（three-way cock)、扣件（fastener)、夾頭（chuck)、拉 鏈（zipper)中的任一種以上。
[0020] 另外，上述微生物培養(yǎng)器也可具備將片狀培養(yǎng)基裝入內(nèi)部并進行密封的附注入口 的培養(yǎng)袋、及將培養(yǎng)袋裝入內(nèi)部并進行密封的滅菌袋。若為此種微生物培養(yǎng)器，則培養(yǎng)袋的 外側(cè)的減菌狀態(tài)由減菌袋保持，因此將試樣裝入培養(yǎng)袋時，異物進入培養(yǎng)袋中的可能性低。
[0021] 另外，也可為：上述微生物培養(yǎng)器用于檢測好氣菌，培養(yǎng)袋由透氧性的原材料所形 成。若培養(yǎng)袋由透氧性的原材料所形成，則氧氣會自培養(yǎng)袋的外側(cè)被供給至內(nèi)側(cè)，因此可培 育好氣菌。
[0022] 另外，也可為：上述微生物培養(yǎng)器用于檢測厭氣菌，培養(yǎng)袋由非透氧性的原材料所 形成。若培養(yǎng)袋由非透氧性的原材料所形成，則氧氣不會自培養(yǎng)袋的外側(cè)被供給至內(nèi)側(cè)，因 此可培育厭氣菌。
[0023] 另外，也可為：微生物培養(yǎng)器用于檢測透析液中或逆滲透水中所包含的微生物，培 養(yǎng)袋內(nèi)的培養(yǎng)基具有補充透析液中或逆滲透水中所含的營養(yǎng)成分的規(guī)定輔助營養(yǎng)成分。若 培養(yǎng)基具有補充透析液中原本所含的營養(yǎng)成分程度的規(guī)定輔助營養(yǎng)成分，則可在不使透析 液中的微生物因營養(yǎng)過多而死滅的情況下在培養(yǎng)袋內(nèi)進行培育。
[0024] 此外，培養(yǎng)袋內(nèi)的培養(yǎng)基所具有的所謂規(guī)定輔助營養(yǎng)成分例如可為每平方米 0?lg~3.Og的蛋白胨（peptone)、0?lg~3.Og的酵母提取物（yeastextract)、0?lg~ 〇? 5g的酪蛋白（casein)分解物、Og~0? 5g的葡萄糖（glucose)、0? 075g~0? 3g的丙酮酸 鈉（sodiumpyruvate)、0g~0? 3g的憐酸氫二鉀（dipotassiumphosphate)、0?lg~0? 5g 的可溶性淀粉、〇? 〇lg~〇? 〇5g的硫酸鎂（magnesiumsulfate)、及0? 015g~0?lg的四唑 鹽（tetrazoliumsalt)或0? 15g~l.Og的吲哚酚（indoxyl)衍生物。若培養(yǎng)基中包含該 程度的成分，則可在培養(yǎng)袋內(nèi)培育透析液中或逆滲透水中的微生物。
[0025] 此外，培養(yǎng)袋內(nèi)的培養(yǎng)基所具有的所謂規(guī)定輔助營養(yǎng)成分例如也可為每平方米 0? 38g ~9. Og 的肉提取物（meat extract)或魚肉提取物（fish extract)、0? 63g ~15. Og 的胰化蛋白胨（tryptone)、0g~3. Og的葡萄糖、Og~0?