一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，特別涉及一種促黃體生成素（LH）和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，屬于檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。其包括LH免疫層析檢測試紙條，以及尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或幾種，較佳地，LH免疫層析檢測試紙條的結(jié)合墊和層析膜上分別包被相應(yīng)的免疫標(biāo)記抗體和檢測抗體，LH免疫層析檢測試紙條與尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或幾種并列設(shè)置或置于底板的上下表面，本實用新型可以通過自我取樣，一次取樣即可同時檢測LH和泌尿系統(tǒng)感染，簡單方便，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用。
【專利說明】一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實用新型涉及一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，特別涉及一種促黃體生成素(LH)和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，屬于檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]促黃體生成素(LH)由腺垂體嗜堿粒細(xì)胞分泌，存在于人的血液和尿液中，其作用是刺激卵巢內(nèi)成熟卵子的釋放。尿液中的LH濃度通常在排卵前36~48小時左右突然大幅度上升，在14~28小時達(dá)到高峰，高峰后約14~28小時卵泡膜破裂，排出成熟卵子。女性在LH高峰后的1~3天內(nèi)最容易受孕，因而，檢測LH在尿液中的存在水平能夠用于預(yù)測排卵時間。
[0003]泌尿系統(tǒng)感染為臨床常見感染性疾病.女性發(fā)病率明顯高于男性。長期發(fā)生泌尿系統(tǒng)感染會影響懷孕，而且懷孕期間會使腎臟的負(fù)擔(dān)加重，如果腎臟存在疾患，后果會非常嚴(yán)重。
[0004]臨床上廣泛應(yīng)用膠體金法對LH進(jìn)行快速檢測，泌尿系統(tǒng)感染檢測也有多種檢測方法，包括尿液分析，細(xì)菌學(xué)檢查等，但尚未發(fā)現(xiàn)LH和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢的產(chǎn)品。如將LH和泌尿系統(tǒng)感染進(jìn)行聯(lián)檢，自我取樣，一次即可以進(jìn)行聯(lián)檢，簡單方便。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本實用新型的目的在于克服上述不足之處，通過一次取樣，對LH和泌尿系統(tǒng)感染進(jìn)行檢測，提供一種促黃體生成素(LH)和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，應(yīng)用簡便，適于大規(guī)模推廣應(yīng)用。
[0006]按照本實用新型提供的技術(shù)方案，一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板，在第一底板的一面上設(shè)置有層析膜，層析膜的前端設(shè)置不透明保護膜，不透明保護膜的前端設(shè)置箭頭；箭頭的前端設(shè)置結(jié)合墊；層析膜上還依次設(shè)置有檢測線和質(zhì)控線，層析膜后端設(shè)置有吸水墊。
[0007]還包括感染指標(biāo)檢測區(qū)。
[0008]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)附著于第二底板上或復(fù)合于第一底板的任意一個表面上。
[0009]在第一底板的一面上設(shè)置有層析膜，層析膜的前端設(shè)置結(jié)合墊，結(jié)合墊的前方還設(shè)置樣品墊；層析膜上還依次設(shè)置有檢測線和質(zhì)控線，層析膜后端設(shè)置有吸水墊；第一底板的下表面上還設(shè)置有感染指標(biāo)檢測區(qū)。
[0010]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)設(shè)置有尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或幾種。
[0011]所述附著尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙的第一底板或第二底板的材料為PET、PVC、PE、PP或PS中的一種，長為10_300mm，寬2-30mm,厚度為 0.1-1.5mm。
[0012]所述尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙的基礎(chǔ)材料為纖維素濾紙，玻璃纖維濾紙，層析紙，聚酯膜或尼龍膜；所述試紙的形狀為正方形，長方形，圓形，橢圓形，三角形，菱形或梯形；大小為長1-30 mm;寬1-30 mm;厚度0.01-5臟；多種試紙之間的間距為1_30 mm。
[0013]所述結(jié)合墊上有促黃體生成素LH免疫標(biāo)記抗體。
[0014]所述層析膜上包被有促黃體生成素LH檢測抗體。
[0015]本實用新型的有益效果:本實用新型可以通過自我取樣，一次取樣即可同時檢測LH和泌尿系統(tǒng)感染，簡單方便，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0016]圖1是實施例1第一底板10結(jié)構(gòu)示意圖。
[0017]圖2是實施例1第二底板11結(jié)構(gòu)示意圖。
[0018]圖3是實施例2結(jié)構(gòu)示意圖。
[0019]圖4是實施例3結(jié)構(gòu)示意圖。
[0020]圖5是實施例4結(jié)構(gòu)示意圖。
[0021]圖6是實施例1感染指標(biāo)檢測區(qū)結(jié)構(gòu)示意圖。
[0022]圖7是實施例2感染指標(biāo)檢測區(qū)結(jié)構(gòu)示意圖。
[0023]圖8是實施例3感染指標(biāo)檢測區(qū)結(jié)構(gòu)示意圖。
[0024]圖9是實施例4感染指標(biāo)檢測區(qū)結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實施方式】
[0025]實施例1
[0026]如圖1、2、5所示，一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設(shè)置有層析膜6，層析膜6的前端設(shè)置不透明保護膜3，不透明保護膜3的前端設(shè)置箭頭2 ;箭頭2的前端設(shè)置結(jié)合墊I ;層析膜6上還依次設(shè)置有檢測線4和質(zhì)控線5，層析膜6后端設(shè)置有吸水墊7。
[0027]還包括感染指標(biāo)檢測區(qū)8。所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8附著于第一底板10的上表面。
[0028]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8設(shè)置有所述尿蛋白檢測試紙。包括LH免疫層析檢測試紙條，以及泌尿系統(tǒng)感染指標(biāo)檢測區(qū)，包括所述尿蛋白檢測試紙，以水平覆蓋方式或內(nèi)置嵌入方式置于底板10的上表面。
[0029]實施例2
[0030]如圖3、7所示，一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設(shè)置有層析膜6，層析膜6的前端設(shè)置不透明保護膜3，不透明保護膜3的前端設(shè)置箭頭2 ;箭頭2的前端設(shè)置結(jié)合墊I ;層析膜6上還依次設(shè)置有檢測線4和質(zhì)控線5，層析膜6后端設(shè)置有吸水墊7。
[0031]還包括感染指標(biāo)檢測區(qū)8。所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8附著于第二底板11上。
[0032]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8設(shè)置有白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙。以水平覆蓋方式或內(nèi)置嵌入方式置于底板的上表面，且與LH免疫層析檢測試紙條并列設(shè)置于卡槽上。
[0033]實施例3
[0034]如圖4、8所示，一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設(shè)置有層析膜6，層析膜6的前端設(shè)置結(jié)合墊1，結(jié)合墊I的前方還設(shè)置樣品墊9 ;層析膜6上還依次設(shè)置有檢測線4和質(zhì)控線5，層析膜6后端設(shè)置有吸水墊7 ;第一底板10的下表面上還設(shè)置有感染指標(biāo)檢測區(qū)8。
[0035]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8附著于第一底板10的下表面上。
[0036]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8設(shè)置有尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙，以水平覆蓋方式或內(nèi)置嵌入方式置于底板的表面，且與LH免疫層析檢測試紙條分別置于底板的上下表面。
[0037]實施例4
[0038]如圖5、9所示，一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板10，在第一底板10的一面上設(shè)置有層析膜6，層析膜6的前端設(shè)置不透明保護膜3，不透明保護膜3的前端設(shè)置箭頭2 ;箭頭2的前端設(shè)置結(jié)合墊I ;層析膜6上還依次設(shè)置有檢測線4和質(zhì)控線5，層析膜6后端設(shè)置有吸水墊7。所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8附著于第二底板11上。
[0039]在實施例1-4中，所述LH免疫標(biāo)記抗體是抗人LH膠體金免疫標(biāo)記抗體,所述LH檢測抗體是抗人LH檢測抗體，其中的抗人LH膠體金免疫標(biāo)記抗體和抗人LH檢測抗體結(jié)合人LH的不同部位。
[0040]所述感染指標(biāo)檢測區(qū)8設(shè)置有尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙，以水平覆蓋方式或內(nèi)置嵌入方式置于底板的上表面，且與LH免疫層析檢測試紙條置于可拆卸 的卡槽上。
[0041]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍(lán)，表面活性劑和檸檬酸緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所訴溴酚藍(lán)在溶液中的濃度為100-2000 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為0.1-10 %，檸檬酸緩沖液的pH值為2.8-4.6，摩爾濃度為0.01-1 M ；
[0042]所述白細(xì)胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為40-1000 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為200-10000 mg/L ；
[0043]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯(lián)苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1_10%，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為0.1-40 g/L，PBS緩沖液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01~1 M ；
[0044]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為500-4000 mg/L, α-萘胺的濃度為500-4000 mg/L，酒石酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05-10%。
[0045]檢測時如果LH免疫層析檢測試紙條C區(qū)出現(xiàn)條帶，則T區(qū)出現(xiàn)條帶即表示樣品為陽性，未出現(xiàn)條帶則表示陰性；如果C區(qū)未出現(xiàn)條帶，則表示試紙條失效。尿蛋白檢測試紙顏色發(fā)生變化表示不正常，顏色不發(fā)生變化表示正常。白細(xì)胞檢測試紙不顯色表示正常，出現(xiàn)藍(lán)色或綠色表示不正常。便潛血檢測試紙不顯色表示正常，出現(xiàn)藍(lán)色(或藍(lán)紫色)表示不正常。亞硝酸鹽檢測試紙不顯色表示正常，出現(xiàn)粉紅色或紅色表示不正常。
[0046]制備實施例1
[0047]用于LH檢測的抗體膠體金標(biāo)記方法為加入200 μ L，3%的碳酸鉀調(diào)節(jié)50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.15 mL ,6.6 mg/mL待標(biāo)記抗LH抗體于上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ；8000 g 4°C離心Ih，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用25 mL洗滌液溶解，6000 g 4°C離心lh，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用1.2 mL洗滌液溶解，轉(zhuǎn)入1.5 mL離心管中，4500 g 4°C離心lh，去上清；所有沉淀用I mL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0048]用于LH檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述制備的膠體金抗體結(jié)合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為8 μ L/cm ;1號管道為噴點通道；將I號管道置于膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將金標(biāo)墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的金標(biāo)墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續(xù)和貫通整個金標(biāo)墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片金標(biāo)墊，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片)；噴點結(jié)束，將噴點的金標(biāo)墊置于室溫中自然干燥I小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0049]用于LH檢測的抗體層析膜制備方法如下:取鼠抗人LH抗體500 ug，加到5 mL刻度離心管中,抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記T標(biāo)志。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L，加到5 mL刻度離心管中，抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記C標(biāo)志；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為I μ L/cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置于檢測帶溶液中，將2號管道置于對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續(xù)和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片);噴點結(jié)束，將噴點的層析膜置于室溫中自然干燥I個小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0050]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設(shè)定切膜程序，設(shè)定切割寬度為4 mm ;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上“G0”鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上“G0”鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0051]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍(lán)，表面活性劑和檸檬酸緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所訴溴酚藍(lán)在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩沖液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0052]所述白細(xì)胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0053]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯(lián)苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L, PBS緩沖液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；[0054]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%,烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0055]分別將尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內(nèi)置嵌入方式粘貼固定于透明的PVC片上，各試紙間距為5_，切成邊長為4 mm的試紙條即成。
[0056]制備實施例2
[0057]用于LH檢測的抗體膠體金標(biāo)記方法為加入200 μ L，3%的碳酸鉀調(diào)節(jié)50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.15 mL ,6.6 mg/mL待標(biāo)記抗LH抗體于上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ；8000 g 4°C離心Ih，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用25 mL洗滌液溶解，6000 g 4°C離心lh，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用1.2 mL洗滌液溶解，轉(zhuǎn)入1.5 mL離心管中，4500 g 4°C離心lh，去上清；所有沉淀用I mL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0058]用于LH檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述制備的膠體金抗體結(jié)合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為8 μ L/cm ;1號管道為噴點通道；將I號管道置于膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將金標(biāo)墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的金標(biāo)墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續(xù)和貫通整個金標(biāo)墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片金標(biāo)墊，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片)；噴點結(jié)束，將噴點的金標(biāo)墊置于室溫中自然干燥I小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0059]用于LH檢測的抗體層析膜制備方法如下:取鼠抗人LH抗體500 ug,加到5 mL刻度離心管中,抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記T標(biāo)志。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L，加到5 mL刻度離心管中，抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記C標(biāo)志；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為I μ L/cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置于檢測帶溶液中，將2號管道置于對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續(xù)和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片);噴點結(jié)束，將噴點的層析膜置于室溫中自然干燥I個小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0060]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設(shè)定切膜程序，設(shè)定切割寬度為4 mm ;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上“G0”鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上“G0”鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0061]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍(lán)，表面活性劑和檸檬酸緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所訴溴酚藍(lán)在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩沖液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0062]所述白細(xì)胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0063]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯(lián)苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L，PBS緩沖液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0064]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%,烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0065]分別將尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內(nèi)置嵌入方式粘貼固定于透明的PVC片上，各試紙間距為5mm，切成邊長為4 mm的試紙條即成，且與LH免疫層析檢測試紙條并列置于卡槽上。
[0066]制備實施例3
[0067]用于LH檢測的抗體膠體金標(biāo)記方法為加入200 μ L，3%的碳酸鉀調(diào)節(jié)50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.15 mL ,6.6 mg/mL待標(biāo)記抗LH抗體于上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ；8000 g 4°C離心Ih，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用25 mL洗滌液溶解，6000 g 4°C離心lh，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用1.2 mL洗滌液溶解，轉(zhuǎn)入1.5 mL離心管中，4500 g 4°C離心lh，去上清；所有沉淀用I mL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0068]用于LH檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述制備的膠體金抗體結(jié)合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為8 μ L/cm ;1號管道為噴點通道；將I號管道置于膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將金標(biāo)墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的金標(biāo)墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續(xù)和貫通整個金標(biāo)墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片金標(biāo)墊，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片)；噴點結(jié)束，將噴點的金標(biāo)墊置于室溫中自然干燥I小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0069]用于LH檢測的抗體層析膜制備方法如下:取鼠抗人LH抗體500 ug，加到5 mL刻度離心管中,抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記T標(biāo)志。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L，加到5 mL刻度離心管中，抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記C標(biāo)志；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為I μ L/cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置于檢測帶溶液中，將2號管道置于對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續(xù)和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片);噴點結(jié)束，將噴點的層析膜置于室溫中自然干燥I個小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。[0070]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設(shè)定切膜程序，設(shè)定切割寬度為4mm ;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上“G0”鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上“G0”鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0071]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍(lán)，表面活性劑和檸檬酸緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所訴溴酚藍(lán)在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩沖液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0072]所述白細(xì)胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0073]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯(lián)苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L, PBS緩沖液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0074]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%,烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0075]分別將尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內(nèi)置嵌入方式粘貼固定于透明的PVC片上，各試紙間距為5mm,切成邊長為4 mm的試紙條即成，且與HCG免疫層析檢測試紙條并列置于卡槽上分別置于底板的上下表面。
[0076]制備實施例4
[0077]用于LH檢測的抗體膠體金標(biāo)記方法為加入200 μ L，3%的碳酸鉀調(diào)節(jié)50 mL膠體金溶液的pH ;在攪拌條件下逐漸加入0.15 mL ,6.6 mg/mL待標(biāo)記抗LH抗體于上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ;將12.5 mL封閉液緩慢加入上述膠體金溶液中，混勻，室溫靜置30 min ；8000 g 4°C離心Ih，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用25 mL洗滌液溶解，6000 g 4°C離心lh，去上清，留疏松沉淀；各管沉淀用1.2 mL洗滌液溶解，轉(zhuǎn)入1.5 mL離心管中，4500 g 4°C離心lh，去上清；所有沉淀用I mL膠體金抗體重懸液重懸，4°C保存。
[0078]用于LH檢測的抗體膠體金墊的噴點方法如下:用膠體金抗體重懸液將上述制備的膠體金抗體結(jié)合物稀釋4倍；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為8 μ L/cm ;1號管道為噴點通道；將I號管道置于膠體金抗體重懸溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將金標(biāo)墊按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的金標(biāo)墊，噴點的膠體金抗體條帶均勻、連續(xù)和貫通整個金標(biāo)墊的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片金標(biāo)墊，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片)；噴點結(jié)束，將噴點的金標(biāo)墊置于室溫中自然干燥I小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0079]用于LH檢測的抗體層析膜制備方法如下:取鼠抗人LH抗體500 ug,加到5 mL刻度離心管中,抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記T標(biāo)志。取羊抗鼠IgG抗體25 μ L，加到5 mL刻度離心管中，抗體稀釋液至I mL，容器標(biāo)記C標(biāo)志；開啟點膜儀的電源，設(shè)定噴點程序，噴點量為I μ L/cm, I號管道為檢測帶噴點通道，2號管道為對照帶噴點通道；將I號管道置于檢測帶溶液中，將2號管道置于對照帶溶液中，選擇初始化程序，初始化6個循環(huán)；將層析膜按固定位置平放在點膜儀上，按控制面板上“G0”鍵開始噴點，點完后取下，檢查噴點好的層析膜，檢測帶和對照帶為兩條均勻、連續(xù)和貫通整個層析膜的直線為合格噴點品，兩條直線中出現(xiàn)斷點為不合格噴點品；每放一片層析膜，按一次控制面板上的“G0”鍵為噴點一次(一片);噴點結(jié)束，將噴點的層析膜置于室溫中自然干燥I個小時，膜上應(yīng)看不到噴點痕跡。
[0080]將底板上較寬部分的保護紙除去，沿上面保護紙的上邊緣，將劃好線的層析膜，以C線在上方的方式貼到底板板上；將膠體金墊貼在T線下方，與NC膜少許接觸；將樣品墊貼在膠體金墊下方，與膠體金墊少許接觸；接著除去上方保護紙，將吸水墊貼在NC膜的上方，與NC膜少許接觸；將保護紙及指示帶紙逐一貼在組裝好的試紙條外面，組裝成大卡。接通切割機電源，設(shè)定切膜程序，設(shè)定切割寬度為4 mm ;將大卡合格品平放入切割機平臺軌道中，正面朝上，按操作面板上“G0”鍵，開始切割；每放一片大卡合格品，按操作面板上“G0”鍵一次，直至切割完所有大卡合格品。
[0081]所述尿蛋白檢測試紙為將空白濾紙在溴酚藍(lán)，表面活性劑和檸檬酸緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所訴溴酚藍(lán)在溶液中的濃度為500 mg/L，表面活性劑在溶液中的濃度為10 %，檸檬酸緩沖液的pH值為4.6，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0082]所述白細(xì)胞檢測試紙為將空白濾紙在5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽和蔗糖組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸鹽在溶液中的濃度為800 mg/L，所述蔗糖在溶液中的濃度為10000 mg/L，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0083]所述便潛血檢測試紙為將空白濾紙在過氧化氫或過氧化異丙苯，四甲基聯(lián)苯胺或氨基比林，表面活性劑和PBS緩沖液組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述過氧化氫或過氧化異丙苯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，四甲基聯(lián)苯胺(TMB)或氨基比林的濃度為40 g/L, PBS緩沖液的PH值為7.0，摩爾濃度為0.01 M，烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形；
[0084]所述亞硝酸鹽檢測試紙為將空白濾紙在對氨基苯磺酸，α -萘胺和酒石酸組成的溶液中浸泡后干燥處理，所述對氨基苯磺酸的濃度為4000 mg/L, α -萘胺的濃度為2000mg/L,酒石酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%,烘干后使用切割機切成邊長為4 mm的正方形。
[0085]分別將尿蛋白檢測試紙，白細(xì)胞檢測試紙，便潛血檢測試紙和亞硝酸鹽檢測試紙中的一種或多種以水平覆蓋或內(nèi)置嵌入方式粘貼固定于透明的PVC片上，各試紙間距為5mm,切成邊長為4 mm的試紙條即成，且與HCG免疫層析檢測試紙條并列置于可拆卸的卡槽上。
【權(quán)利要求】
1.一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板(10)，其特征是:在第一底板(10)的一面上設(shè)置有層析膜(6)，層析膜(6)的前端設(shè)置不透明保護膜(3)，不透明保護膜(3)的前端設(shè)置箭頭(2);箭頭(2)的前端設(shè)置結(jié)合墊(I);層析膜(6)上還依次設(shè)置有檢測線(4)和質(zhì)控線(5 )，層析膜(6 )后端設(shè)置有吸水墊(7 )。
2.如權(quán)利要求1所述促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，其特征是:還包括感染指標(biāo)檢測區(qū)(8)。
3.如權(quán)利要求2所述促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，其特征是:所述感染指標(biāo)檢測區(qū)(8)附著于第二底板(11)上或復(fù)合于第一底板(10)的任意一個表面上。
4.一種促黃體生成素和泌尿系統(tǒng)感染聯(lián)檢試劑盒，包括第一底板(10)，其特征是:在第一底板(10)的一面上設(shè)置有層析膜(6)，層析膜(6)的前端設(shè)置結(jié)合墊(1)，結(jié)合墊(I)的前方還設(shè)置樣品墊(9);層析膜(6)上還依次設(shè)置有檢測線(4)和質(zhì)控線(5)，層析膜(6)后端設(shè)置有吸水墊(7);第一底板(10)的下表面上還設(shè)置有感染指標(biāo)檢測區(qū)(8)。
【文檔編號】G01N33/558GK203551569SQ201320690172
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年11月4日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月4日
【發(fā)明者】陸月, 時振華, 胡越, 韋彥余 申請人:無錫博慧斯生物醫(yī)藥科技有限公司