本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種鈣結(jié)合蛋白s100a1作為肺癌免疫治療生物標(biāo)志物的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、近年來(lái)，以免疫檢查點(diǎn)抑制劑(immune?checkpoint?inhibitors,icis)為代表的免疫治療在腫瘤綜合治療方面取得了前所未有的突破，尤其是在非小細(xì)胞肺癌(non-smallcell?lung?cancer,nsclc)、黑色素瘤、乳腺癌等實(shí)體腫瘤中，免疫治療單藥或聯(lián)合治療已成為標(biāo)準(zhǔn)方案。然而，其治療效果表現(xiàn)出明顯的個(gè)體差異，仍有部分患者未能有效響應(yīng)。關(guān)于腫瘤免疫治療響應(yīng)和耐藥的分子機(jī)制，目前尚不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤自身介導(dǎo)的免疫逃逸在免疫治療響應(yīng)中扮演著重要角色。因此，從腫瘤介導(dǎo)免疫逃逸的角度出發(fā)，尋找免疫治療響應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)控因素和生物標(biāo)志物，具有重要的臨床意義。

2、鈣離子(ca2+)是細(xì)胞內(nèi)重要的第二信使，在細(xì)胞增殖、分化、死亡以及多種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面發(fā)揮至關(guān)重要的作用。同時(shí)，ca2+信號(hào)調(diào)控和其在腫瘤發(fā)生、進(jìn)展、轉(zhuǎn)移以及腫瘤微環(huán)境(tumor?microenvironment,tme)中的影響受到了廣泛關(guān)注。越來(lái)越多的證據(jù)表明，腫瘤細(xì)胞通過(guò)改變ca2+信號(hào)促進(jìn)腫瘤生存、增殖和免疫逃逸等多種惡性生物學(xué)行為。鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)涉及ca2+結(jié)合蛋白、鈣泵以及鈣通道等多種分子調(diào)控機(jī)制，其中ca2+結(jié)合蛋白是ca2+執(zhí)行生理功能過(guò)程中至關(guān)重要的載體。值得一提的是，s100鈣結(jié)合蛋白a1(s100?calciumbindingprotein?a1,s100a1)在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)ca2+信號(hào)及ca2+穩(wěn)態(tài)中具有關(guān)鍵作用。s100a1由94個(gè)氨基酸殘基組成，包含兩個(gè)ef-手型(ef-handtype)ca2+結(jié)合結(jié)構(gòu)域，能夠響應(yīng)細(xì)胞內(nèi)外鈣濃度變化并通過(guò)改變自身構(gòu)象進(jìn)而與靶蛋白相互作用發(fā)揮多種生物學(xué)功能。近有研究發(fā)現(xiàn)，s100a1在多種類型的腫瘤中異常表達(dá)，涉及細(xì)胞周期調(diào)控、凋亡、惡性侵襲及轉(zhuǎn)移和免疫逃逸等生物學(xué)過(guò)程，并與患者預(yù)后不良密切相關(guān)。然而，s100a1在肺癌免疫治療響應(yīng)中的具體作用和機(jī)制尚未明確，仍需探索。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，提供一種鈣結(jié)合蛋白s100a1作為肺癌免疫治療生物標(biāo)志物的應(yīng)用。

2、第一方面，本發(fā)明提供鈣結(jié)合蛋白s100a1的第一種用途，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

3、一種檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)在制備評(píng)價(jià)肺癌免疫治療療效和/或肺癌預(yù)后評(píng)估產(chǎn)品中的應(yīng)用。

4、進(jìn)一步的，檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的樣本來(lái)源于血液或細(xì)胞上清液。

5、進(jìn)一步的，所述肺癌包括非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌；非小細(xì)胞肺癌包括肺腺癌、肺鱗癌。

6、進(jìn)一步的，所述檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括化學(xué)發(fā)光法、放射免疫檢測(cè)法、熒光免疫檢測(cè)法、質(zhì)譜、蛋白免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法中所用試劑。

7、第二方面，本發(fā)明提供一種評(píng)價(jià)肺癌免疫治療療效的試劑盒，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

8、一種評(píng)價(jià)肺癌免疫治療療效的試劑盒，包括檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)。

9、進(jìn)一步的，檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的樣本來(lái)源于血液或細(xì)胞上清液。

10、進(jìn)一步的，所述肺癌包括非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌；非小細(xì)胞肺癌包括肺腺癌、肺鱗癌。

11、進(jìn)一步的，所述檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括化學(xué)發(fā)光法、放射免疫檢測(cè)法、熒光免疫檢測(cè)法、質(zhì)譜、蛋白免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法中所用試劑。

12、第三方面，本發(fā)明提供一種評(píng)估肺癌預(yù)后的試劑盒，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

13、一種評(píng)估肺癌預(yù)后的試劑盒，包括檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)。

14、進(jìn)一步的，檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的樣本來(lái)源于血液或細(xì)胞上清液。

15、進(jìn)一步的，所述肺癌包括非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌；非小細(xì)胞肺癌包括肺腺癌、肺鱗癌。

16、進(jìn)一步的，所述檢測(cè)鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括化學(xué)發(fā)光法、放射免疫檢測(cè)法、熒光免疫檢測(cè)法、質(zhì)譜、蛋白免疫印跡或酶聯(lián)免疫吸附法中所用試劑。

17、第四方面，本發(fā)明提供鈣結(jié)合蛋白s100a1的第二種用途，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

18、一種降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)在制備以下至少一種藥物中的應(yīng)用：

19、a.治療肺癌；

20、b.增強(qiáng)肺癌患者對(duì)免疫治療敏感性；

21、c.重塑肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境；

22、d.促進(jìn)肺癌患者巨噬細(xì)胞m1型極化和t細(xì)胞抗腫瘤免疫。

23、進(jìn)一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括crispr-cas9、慢病毒感染以及sirna轉(zhuǎn)染中所用試劑。

24、第五方面，本發(fā)明提供一種治療肺癌的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

25、一種治療肺癌的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)。

26、進(jìn)一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

27、第六方面，本發(fā)明提供一種增強(qiáng)肺癌患者對(duì)免疫治療敏感性的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

28、一種增強(qiáng)肺癌患者對(duì)免疫治療敏感性的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)。

29、進(jìn)一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

30、第七方面，本發(fā)明提供一種重塑肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

31、一種重塑肺癌患者腫瘤免疫微環(huán)境的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)。

32、進(jìn)一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

33、第八方面，本發(fā)明提供一種促進(jìn)肺癌患者巨噬細(xì)胞m1型極化和t細(xì)胞抗腫瘤免疫的藥物，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

34、一種促進(jìn)肺癌患者巨噬細(xì)胞m1型極化和t細(xì)胞抗腫瘤免疫的藥物，包括降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)。

35、進(jìn)一步的，降低鈣結(jié)合蛋白s100a1表達(dá)水平的物質(zhì)包括慢病毒轉(zhuǎn)染中所用試劑。

36、第九方面，本發(fā)明提供一種聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞因子和免疫檢查點(diǎn)抑制劑的用途，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

37、一種細(xì)胞因子和免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合用于制備治療鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達(dá)腫瘤藥物中的應(yīng)用。

38、進(jìn)一步的，免疫檢查點(diǎn)抑制劑選用anti-pd-1、anti-pd-l1和anti-ctla4中的一種或幾種；細(xì)胞因子選用gm-csf因子；鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達(dá)腫瘤包括肺癌、黑色素瘤、乳腺癌、尿路上皮癌。

39、第十方面，本發(fā)明提供一種治療鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達(dá)腫瘤的藥物組合物，是采用以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的。

40、一種治療鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達(dá)腫瘤的藥物組合物，包括細(xì)胞因子和免疫檢查點(diǎn)抑制劑。

41、進(jìn)一步的，所述免疫檢查點(diǎn)抑制劑選用anti-pd-1、anti-pd-l1和anti-ctla4中的一種或幾種；細(xì)胞因子選用gm-csf因子；鈣結(jié)合蛋白s100a1高表達(dá)腫瘤包括肺癌、黑色素瘤、乳腺癌、尿路上皮癌。

42、本技術(shù)具有以下有益效果。

43、本發(fā)明中s100a1與肺癌患者免疫治療響應(yīng)與生存預(yù)后密切相關(guān)，s100a1高表達(dá)患者免疫治療預(yù)后較差，s100a1表達(dá)水平與巨噬細(xì)胞m1極化和cd8+t細(xì)胞浸潤(rùn)呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示s100a1高表達(dá)或與“冷”腫瘤相關(guān)；本發(fā)明進(jìn)一步通過(guò)功能和機(jī)制實(shí)驗(yàn)提出s100a1/usp7/p65/gm-csf調(diào)控軸，該調(diào)控軸可顯著調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞m1極化和t細(xì)胞抗腫瘤免疫功能，從而影響腫瘤免疫逃逸和腫瘤免疫治療響應(yīng)。體內(nèi)模型研究表明gm-csf聯(lián)合anti-pd-1可顯著抑制s100a1高表達(dá)腫瘤生長(zhǎng)，s100a1可作為gm-csf聯(lián)合apd-1治療“冷”腫瘤的潛在標(biāo)志物。