本發(fā)明屬于細胞治療，更具體地說，涉及一種靶向?qū)嶓w瘤的car和多特異性結(jié)合分子。

背景技術(shù)：

1、大多數(shù)現(xiàn)有的癌癥治療方案包括手術(shù)、放療和化療、靶向治療和免疫治療?，F(xiàn)有方案的缺點包括對晚期患者的治療效果不佳、不良副作用和患者生活質(zhì)量差。因此，需要開發(fā)改進的癌癥治療方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本公開的實施方案涉及這樣的發(fā)現(xiàn)，即與它們在正常組織上的表達相比，一些抗原在腫瘤細胞上具有相對高的表達。此外，雖然在正常組織中表達，但這些抗原在特定組織(例如，一組細胞或器官)中特異性表達，并且殺死組織的正常細胞可能不會引起危及生命的事件(例如，并發(fā)癥)到受試者。非必需組織的實例包括諸如前列腺、乳房或黑色素細胞的器官。因此，本公開的實施方案涉及包含結(jié)合這些抗原中的至少一種的細胞外結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體(car)并使用包含car的細胞治療癌癥。

2、實施方案涉及使用car細胞治療癌癥的組合物和方法。實施方案涉及編碼car的分離的核酸序列，其中car包含細胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，其中car的細胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合實體瘤的抗原?？乖梢园╫r2i1p、ly6g6d、lrrc15、ly6k、gfra4、f2rl2、qrfpr、iqgap3、siglec15、havcr1、psg9、kiss1r、prame、hcn4、dpep3、tmem270、her2、slc7a3、sprr2f、slc45a2、chrm1、chrna2、steap1b，fcrl2、黃體生成素受體、edb或cldn18.2。

3、本發(fā)明第一方面提供編碼嵌合抗原受體(car)，其中car包含細胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，并且其中：

4、胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合淋巴細胞抗原6家族成員g6d(ly6g6d)并包含氨基酸序列seq?idno:16、17、18或19；或

5、胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合富含亮氨酸重復(fù)序列15(lrrc15)并包含氨基酸序列seq?id?no:23、24、25或26；或

6、胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合claudin-18.2(cldn18.2)并包含氨基酸序列seq?id?no:6或8。

7、根據(jù)本發(fā)明第一方面任一方案所述的car，其中所述胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合ly6g6d，并且所述car包含氨基酸序列seq?id?no：94、95、96或97。

8、根據(jù)本發(fā)明第一方面任一方案所述的car，其中所述胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合lrrc15，并且所述car包含氨基酸序列seq?id?no：27、28、29或30。

9、根據(jù)本發(fā)明第一方面任一方案所述的car，其中所述胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合cldn18.2，并且所述car包含氨基酸序列seq?id?no：7或9。

10、根據(jù)本發(fā)明第一方面任一方案所述的car，其中所述胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域包含cd3zeta信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域和一個或多個共刺激信號傳導(dǎo)區(qū)域，所述共刺激信號傳導(dǎo)區(qū)域包含選自cd27、cd28的共刺激分子的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、4-1bb、ox40、cd30、cd40、pd-1、icos、淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1(lfa-1)、cd2、cd7、light、nkg2c或b7-h3。

11、編碼本發(fā)明第一方面任一方案所述的car的分離的核酸。

12、載體，其包含本發(fā)明第一方面任一方案所述的car的分離的核酸。

13、修飾的細胞，其包含本發(fā)明第一方面任一方案所述的car的分離的核酸。

14、優(yōu)選地，所述修飾的細胞進一步包含以下中的一者或一者以上：

15、編碼具有抑制性作用的免疫檢查點分子或其受體的顯性失活形式的核酸，并且免疫檢查點分子包含程序性死亡受體1(pd-1)、細胞毒性t淋巴細胞抗原-4(ctla-4)、b-和t淋巴細胞衰減因子(btla)、t細胞免疫球蛋白粘蛋白3(tim-3)、淋巴細胞活化蛋白3(lag-3)、具有ig和itim結(jié)構(gòu)域的t細胞免疫受體(tigit)、白細胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1(lairl)、自然殺傷細胞受體2b4(2b4)或cd?160；

16、內(nèi)源性trac基因表達減少；

17、編碼htert的核酸或編碼sv40lt的核酸，或其組合；

18、編碼自殺基因的核酸；

19、編碼il-6、ifnγ、il-12和/或il-2的核酸。

20、組合物，其包含含有前述的car、分離的核酸或載體的細胞群，或包含前述的修飾的細胞群的組合物。

21、優(yōu)選地，所述細胞群包含淋巴細胞，并且任選地，其中所述淋巴細胞包含t細胞、nk細胞、巨噬細胞或樹突細胞。

22、優(yōu)選地，所述淋巴細胞是t細胞，并且至少一部分t細胞包含與白細胞(wbc)的細胞表面分子結(jié)合的car。

23、優(yōu)選地，wbc是b細胞；

24、wbc的細胞表面分子為cd19、cd22、cd20、bcma、cd5、cd7、cd2、cd16、cd56、cd30、cd14、cd68、cd11b、cd18、cd169、cd1c、cd33、cd38、cd138或cd13；或者

25、wbc的細胞表面分子是cd19、cd20、cd22或bcma。

26、優(yōu)選地，所述組合物包括藥物組合物。一種多特異性結(jié)合分子(pbm)，其中pbm包含至少一個結(jié)合t細胞的第一結(jié)合結(jié)構(gòu)域和至少一個第二結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中第二結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含：

27、seq?id?no：16、17、18或19的氨基酸序列；或

28、seq?id?no：23、24、25或26的氨基酸序列；或

29、seq?id?no：6或8的氨基酸序列。

30、優(yōu)選地，所述第一結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含結(jié)合cd3的scfv。

31、優(yōu)選地，所述pbm是雙特異性抗體。

32、本
技術(shù)實現(xiàn)要素：
不旨在標識所要求保護的主題的關(guān)鍵特征或必要特征，也不旨在用于限制所要求保護的主題的范圍。

技術(shù)特征：

1.編碼嵌合抗原受體(car)，其中car包含細胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，并且其中：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的car，其中所述胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合ly6g6d，并且所述car包含氨基酸序列seq?id?no：94、95、96或97。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的car，其中所述胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合lrrc15，并且所述car包含氨基酸序列seq?id?no：27、28、29或30。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的car，其中所述胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合cldn18.2，并且所述car包含氨基酸序列seq?id?no：7或9。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的car，其中所述胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域包含cd3zeta信號傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域和一個或多個共刺激信號傳導(dǎo)區(qū)域，所述共刺激信號傳導(dǎo)區(qū)域包含選自cd27、cd28的共刺激分子的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域、4-1bb、ox40、cd30、cd40、pd-1、icos、淋巴細胞功能相關(guān)抗原-1(lfa-1)、cd2、cd7、light、nkg2c或b7-h3。

6.編碼權(quán)利要求1-5中任意一項所述的car的分離的核酸。

7.一種載體，其包含權(quán)利要求6所述的分離的核酸。

8.一種修飾的細胞，其包含權(quán)利要求6所述的分離的核酸。

9.如權(quán)利要求8所述的修飾的細胞，其中所述修飾的細胞進一步包含以下中的一者或一者以上：

10.一種組合物，其包含含有權(quán)利要求1-5中任意一項所述的car、權(quán)利要求6所述的分離的核酸或權(quán)利要求7所述的載體的細胞群，或包含權(quán)利要求8或9所述的修飾細胞群的組合物。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物，其中所述細胞群包含淋巴細胞，并且任選地，其中所述淋巴細胞包含t細胞、nk細胞、巨噬細胞或樹突細胞。

12.根據(jù)權(quán)利要求10或11所述的組合物，其中所述淋巴細胞是t細胞，并且至少一部分t細胞包含與白細胞(wbc)的細胞表面分子結(jié)合的car。

13.如權(quán)利要求12所述的組合物，其中：

14.如權(quán)利要求10-13中任一項所述的組合物，其中所述組合物包括藥物組合物。

15.一種多特異性結(jié)合分子(pbm)，其中pbm包含至少一個結(jié)合t細胞的第一結(jié)合結(jié)構(gòu)域和至少一個第二結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其中第二結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含：

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的pbm，其中所述第一結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含結(jié)合cd3的scfv。

17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的pbm，其中所述pbm是雙特異性抗體。

技術(shù)總結(jié)
本文所述的組合物和方法涉及使用CAR?T療法治療實體瘤。例如，該組合物包括含有結(jié)合OR2I1P、LY6G6D、LRRC15、LY6K、GCC、GFRA4、F2RL2、QRFPR、IQGAP3、SIGLEC15、HAVCR1、PSG9、KISS1R、PRAME、HCN4、DPEP3、TMEM270、HER2、SLC7A3、SPRR2F、SLC45A2、CHRM1、CHRNA2、STEAP1B、FCRL2、黃體生成素受體、EDB或CLDN18.2的細胞外結(jié)構(gòu)域的CAR?T細胞。

技術(shù)研發(fā)人員：丁威,沈曉鋼,姜羨漾,韓貴廷,唐旭東,曹志遠,蒲程飛,王文升,肖磊,吳昭,田樂
受保護的技術(shù)使用者：創(chuàng)新細胞治療控股有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19