本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種3-甲基-1-苯基-1h-吡唑-5-o-β-d-葡萄糖苷，其制備方法，包含其的藥物組合物，及其在醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、腦血管病以發(fā)病率高、致殘率高、致死率高和復(fù)發(fā)率高等四高而著稱，其中腦卒中(或稱腦?；蚰X中風(fēng))是最主要的臨床腦血管疾病。腦卒中的發(fā)病機制是由于腦部血管突然破裂或因血管阻塞導(dǎo)致血液不能流入大腦而引起腦組織損傷，包括缺血性腦卒中和出血性腦卒中。

2、與腦卒中類似，肌萎縮側(cè)索硬化癥(als)，俗稱漸凍癥，也是一種以神經(jīng)細胞受損萎縮和死亡為病理特征的疾病。雖然als的發(fā)病機制目前尚無定論，但生物學(xué)研究表明該疾病至少與超氧化物歧化酶(sod)有關(guān)。目前科學(xué)界普遍認為，sod1的突變是als形成的原因之一。

3、線粒體腦肌病是由于線粒體基因或細胞核基因缺失或突變導(dǎo)致的線粒體結(jié)構(gòu)異常而引起腦部和橫紋肌功能異常的一類疾病。該疾病在臨床上與癲癇、腦梗塞、腦炎以及腦發(fā)育不良等病癥類似，是嚴重影響患者的健康和生命的一類疾病。由于線粒體是對各種損傷最為敏感的細胞器之一，病理學(xué)研究表明，其受到氧自由基的攻擊而導(dǎo)致功能異常，進而累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，從而形成線粒體腦肌病。

4、我國發(fā)布的《關(guān)于公布第一批罕見病目錄的通知》(國衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2018]10號)中明確規(guī)定，肌萎縮側(cè)索硬化癥、線粒體腦肌病為我國罕見病(也稱孤兒病)。據(jù)不完全統(tǒng)計，目前我國罹患als的人數(shù)約為10-20萬人，而且能夠根治該疾病的藥物尚未開發(fā)成功。而線粒體腦肌病在成人中的發(fā)病率約為1/4300左右，在兒童中的發(fā)病率則高達1/2000。因此，針對該類罕見病進行藥物開發(fā)是我國乃至全世界生物醫(yī)藥領(lǐng)域科學(xué)家的共同奮斗目標和我國醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域重大攻關(guān)課題之一。

5、中國專利申請cn201810959516.7公開了一系列取代吡唑類化合物，并對部分化合物進行了穩(wěn)定性、溶解度、細胞毒性以及體外和體內(nèi)藥效測試，其中實施例33公開了3-甲基-1-苯基-1h-吡唑-5-醇的d-葡萄糖苷(如下所示)及其制備方法，試驗例1-6公開了相關(guān)的效果數(shù)據(jù)，但該申請的說明書中并未明確披露或暗示化合物結(jié)構(gòu)中糖苷鍵的絕對構(gòu)型?？紤]到不同構(gòu)型的糖苷化合物可能表現(xiàn)出理化性質(zhì)(例如，穩(wěn)定性、溶解度)，甚至是生物活性方面的差異，因此有必要進行相關(guān)研究，以便為后續(xù)的藥物研發(fā)提供依據(jù)。

6、

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、發(fā)明要解決的問題

2、鑒于目前尚無單一構(gòu)型的(或單一構(gòu)型富集的)3-甲基-1-苯基-1h-吡唑-5-o-d-葡萄糖苷，本發(fā)明希望進行相關(guān)開發(fā)，以期提供理化性能和/或生物活性得到改善的產(chǎn)品及其制備方法和應(yīng)用。

3、用于解決問題的方案

4、第一方面，本發(fā)明提供了一種如式i所示的化合物

5、

6、或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥；

7、或者，

8、所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥的富集物，其中所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥的含量在85wt％以上。

9、第二方面，本發(fā)明提供了上述如式i所示的化合物的制備方法，其包括下列步驟：

10、1)將化合物a與化合物b反應(yīng)，得到中間體1；

11、

12、2)將中間體1與化合物c反應(yīng)，得到中間體2；

13、

14、3)將中間體2拆分，得到中間體2a和中間體2b；

15、

16、4)將中間體2b脫保護，即得；

17、

18、或者，將步驟3)和步驟4)替換為步驟3’)和步驟4’)：3’)將中間體2脫保護，得到中間體3；

19、

20、4’)將中間體3拆分，即得；

21、

22、第三方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，其包含上述如式i所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥或者上述富集物。

23、進一步地，所述藥物組合物還包含一種或多種藥學(xué)上可接受的輔料。

24、第四方面，本發(fā)明提供了上述如式i所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥或者上述富集物或者上述藥物組合物在制備用于預(yù)防和/或治療腦卒中、腦栓塞、腦卒中后遺癥、腦卒中運動機能障礙、線粒體腦肌病和/或肌萎縮側(cè)索硬化癥的藥物中的應(yīng)用。

25、發(fā)明的效果

26、針對3-甲基-1-苯基-1h-吡唑-5-o-d-葡萄糖苷，本發(fā)明開發(fā)了一種能夠獲得兩個單一差向異構(gòu)體的制備方法，并對其進行了對比研究。結(jié)果顯示，雖然兩個單一異構(gòu)體及二者的混合物在溶液穩(wěn)定性方面均表現(xiàn)出優(yōu)異性能，但令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，這兩個異構(gòu)體在溶解度方面卻存在顯著差異(β型異構(gòu)體在不同溶劑中的溶解度均高于α型異構(gòu)體，且大約為α構(gòu)型異構(gòu)體的3倍)。另外，通過體外活性實驗發(fā)現(xiàn)，兩個單一異構(gòu)體的活性也存在明顯差異(β型異構(gòu)體可顯著提高細胞的存活率，而α型異構(gòu)體的作用相對較弱)。

技術(shù)特征：

1.如式i所示的化合物

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的如式i所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥的富集物，其中所述化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥的含量在85wt％以上，優(yōu)選在85wt％、90wt％、95wt％或99wt％以上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的如式i所示的化合物的制備方法，其包括下列步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，

6.根據(jù)權(quán)利要求3至5中任一項所述的制備方法，其特征在于，

7.根據(jù)權(quán)利要求3至6中任一項所述的制備方法，其特征在于，

8.根據(jù)權(quán)利要求3至6中任一項所述的制備方法，其特征在于，

9.一種藥物組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求1所述的如式i所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥或者根據(jù)權(quán)利要求2所述的富集物；

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的如式i所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯、溶劑化物、同位素標記物、活性代謝物或前藥或者根據(jù)權(quán)利要求2所述的富集物或者根據(jù)權(quán)利要求9所述的藥物組合物在制備用于預(yù)防和/或治療腦卒中、腦栓塞、腦卒中后遺癥、腦卒中運動機能障礙、線粒體腦肌病和/或肌萎縮側(cè)索硬化癥的藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于藥物領(lǐng)域，涉及一種3?甲基?1?苯基?1H?吡唑?5?O?β?D?葡萄糖苷及其制備方法、藥物組合物和應(yīng)用。具體而言，本發(fā)明的3?甲基?1?苯基?1H?吡唑?5?O?β?D?葡萄糖苷如式I所示，其制備方法包括依次進行的羥基活化、取代、脫保護以及拆分(也可以在脫保護步驟之前進行)等步驟。經(jīng)對比研究發(fā)現(xiàn)，3?甲基?1?苯基?1H?吡唑?5?O?D?葡萄糖苷的兩個差向異構(gòu)體在溶解度、體外活性等方面存在顯著差異，且β型異構(gòu)體的效果均更佳，適宜進一步開發(fā)成藥。

技術(shù)研發(fā)人員：姚俊華,陳肖卓,李澤東,高連平
受保護的技術(shù)使用者：江蘇萬高藥業(yè)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19