本發(fā)明涉及煙用香精香料的制備方法，具體是指一種發(fā)酵型煙用柏木葉精油的制備方法。

背景技術(shù)：

微生物發(fā)酵是生物技術(shù)的重要組成部分，它將微生物學(xué)、生物化學(xué)、化學(xué)工程學(xué)的基本原理有機(jī)的結(jié)合起來，是一門利用微生物的生長代謝活動來生產(chǎn)各種有用物質(zhì)的工程技術(shù)。目前，在香精香料的生物合成中應(yīng)用最廣泛的生物技術(shù)是微生物發(fā)酵工程，以工農(nóng)業(yè)廢料為原料，利用微生物可以生產(chǎn)各種天然香料。由微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的風(fēng)味化合物主要有四大類：萜烯類、內(nèi)酯類、吡喃類和酯類。drawert和bantos報道從乳酸克魯維酵母中分離得到單菇類香茅醇、芳樟醇和香葉醇；lee等應(yīng)用酵母如sporidiobolussalmonicolor和yarrowialipolytica催化蓖麻酸，經(jīng)β-氧化為有桃香味兒的γ-癸內(nèi)酯；demain等應(yīng)用微生物在其代謝過程中生產(chǎn)香蘭素等芳香族類風(fēng)味化合物；比利時gent等以雜醇油為前體物，利用姆拉克漢遜酵母將醇轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的乙酸酯，產(chǎn)物被活性炭吸附，解吸后的濃縮物可作為天然香蕉香料。

柏木葉，又名柏葉、香柏葉、香扁柏葉、垂絲柏葉、掃帚柏葉、白木樹葉、密密松、扁柏葉、垂柏葉、柏青樹葉、宋柏葉。為柏科植物柏木cupressusfunebrisendl.的枝葉。苦、澀，溫。止血活血。治燒傷，嘔血，血痢，痔瘡。煎服，9～12克；或搗敷。柏木鮮葉曬干后具有濃郁而獨(dú)特的芳香。作為藥用植物，具有抗菌、抗氧化、抗炎等功效；加工成香料、浸膏、芳香油等，可應(yīng)用于化妝品和食品香精中。在2011年國家煙草專賣局發(fā)布的煙用添加劑許可名單中，也有柏木葉油。柏木葉油的主要成分為α-蒎烯、檜烯、月桂烯、松油醇等芳香化合物，添加到香煙中，使煙氣細(xì)膩柔和，抽吸后可顯著降低副作用，緩解喉部不適反應(yīng)。對吸煙者的喉部、呼吸道能起到保護(hù)作用，可顯著降低吸煙所引起的咳嗽、多痰等不良癥狀，而且香氣飄逸優(yōu)雅，煙草本香與淡雅的天然植物香氣渾然一體。

然而，在目前的制備工藝當(dāng)中，多是直接將柏木葉的干葉用水蒸氣蒸餾而得，存在得油率不高，香氣質(zhì)不高，效率偏低的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有背景技術(shù)的不足之處，而提供一種發(fā)酵型煙用柏木葉精油的制備方法。

本發(fā)明的目的是通過如下措施來達(dá)到的：發(fā)酵型煙用柏木葉精油的制備方法，包括如下步驟：

一種發(fā)酵型煙用柏木葉精油的制備方法，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為15～30:1～5:1～5:0.1～0.3:65～80置于發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵分為兩步：第一步，在5～20℃溫度下發(fā)酵1～7天；第二步，在15～35℃溫度下發(fā)酵1～7天，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：提取、分離步驟(1)中所得的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。

進(jìn)一步的，所述柏木葉粗粉為100～180目。

進(jìn)一步的，所述步驟(1)第一步中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為4.5～7.5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為150～250rpm，通氣量為1～3vvm。

進(jìn)一步的，所述步驟(1)第二步中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為4.5～7.5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為150～250rpm，通氣量為1～3vvm。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：

其一，采用本發(fā)明制備的發(fā)酵型煙用柏木葉精油產(chǎn)率高；

其二，本發(fā)明制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油工藝簡單，制備條件溫和；

其三，發(fā)酵產(chǎn)生的小分子物質(zhì)的致香作用，使發(fā)酵型煙用柏木葉精油具備了豐富的煙香，有提高香氣質(zhì)感的作用。

本發(fā)明以柏木葉為原料，通過微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)具有特征柏木葉香氣的發(fā)酵型煙用香料，應(yīng)用微生物發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)煙用香料，能得到一種經(jīng)濟(jì)、高效且高質(zhì)生產(chǎn)天然煙用香料的新途徑，并開發(fā)出傳統(tǒng)香料生產(chǎn)法所不能生產(chǎn)的新型煙用香料。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施情況，但它們并不構(gòu)成對本發(fā)明的限定，僅作舉例而已。同時通過說明本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)將變得更加清楚和容易理解。

實(shí)施例1

制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成100目的柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為17：1：1.9：0.1：80置于發(fā)酵罐中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為5.5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，通氣量為1vvm，先在5℃條件下發(fā)酵7d，然后在15℃條件下繼續(xù)發(fā)酵7d，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：采用揮發(fā)油提取器提取步驟(1)中所得的發(fā)酵液，再用油水分離器中分離提取的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。

實(shí)施例2

制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成120目的柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為16：2：1.8：0.2：80置于發(fā)酵罐中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為5.5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，通氣量為2vvm，先在10℃條件下發(fā)酵5d，然后在15℃條件下繼續(xù)發(fā)酵6d，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：采用揮發(fā)油提取器提取步驟(1)中所得的發(fā)酵液，再用油水分離器中分離提取的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。

實(shí)施例3

制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成100目的柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為19：1.9：1：0.1：78置于發(fā)酵罐中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm，通氣量為1vvm，先在15℃條件下發(fā)酵7d，然后在15℃條件下繼續(xù)發(fā)酵7d，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：采用揮發(fā)油提取器提取步驟(1)中所得的發(fā)酵液，再用油水分離器中分離提取的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。

實(shí)施例4

制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成150目的柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為21：1：1.8：0.2：76置于發(fā)酵罐中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為6.5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，通氣量為2vvm，先在15℃條件下發(fā)酵5d，然后在25℃條件下繼續(xù)發(fā)酵7d，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：采用揮發(fā)油提取器提取步驟(1)中所得的發(fā)酵液，再用油水分離器中分離提取的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。

實(shí)施例5

制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成120目的柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為21：1.7：2：0.3：75置于發(fā)酵罐中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為5.5，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為250rpm，通氣量為1vvm，先在10℃條件下發(fā)酵7d，然后在20℃條件下繼續(xù)發(fā)酵7d，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：采用揮發(fā)油提取器提取步驟(1)中所得的發(fā)酵液，再用油水分離器中分離提取的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。

實(shí)施例6

制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油，包括如下步驟：

(1)制備發(fā)酵液：將柏木葉粉碎成100目的柏木葉粗粉，再將柏木葉粗粉、葡萄糖、酵母膏、氯化鈉和水按重量比為20：1：1.8：0.2：77置于發(fā)酵罐中，控制發(fā)酵罐中物料ph值為6，調(diào)節(jié)攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，通氣量為2vvm，先在15℃條件下發(fā)酵5d，然后在25℃條件下繼續(xù)發(fā)酵5d，即得到發(fā)酵液；

(2)制備發(fā)酵型煙用柏木葉精油：采用揮發(fā)油提取器提取步驟(1)中所得的發(fā)酵液，再用油水分離器中分離提取的發(fā)酵液，收集所得到的油層，即得到發(fā)酵型煙用柏木葉精油。有益效果對比試驗：

表1不同工藝制備的干柏木葉油的指標(biāo)

由表1可見，采用本發(fā)明實(shí)施例1制備的發(fā)酵型煙用柏木葉精油產(chǎn)率從0.03％-0.06％提高到0.1％-0.2％，產(chǎn)率提高了3倍左右。進(jìn)一步地，發(fā)酵產(chǎn)生的小分子物質(zhì)的致香作用，使發(fā)酵型煙用柏木葉精油具備了豐富煙香、細(xì)膩煙氣，有提高煙氣質(zhì)感的作用。

以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方案的詳細(xì)描述，并不以此限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的設(shè)計思路上所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。