【
技術(shù)領(lǐng)域：
】本發(fā)明積雪草甙制備
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種從積雪草中提取積雪草甙的工藝。
背景技術(shù)：
：積雪草為雙子葉植物傘形科植物積雪草的全草或帶根全草，具有清熱利濕，消腫解毒之功效；用于治療濕熱黃疸，痢疾風(fēng)疹、喉腫、腫毒和跌打損傷等。積雪草甙是積雪草提取物中的有效成分之一。積雪草甙具有多種藥理作用：(1)美容：有抗氧化作用，祛除老死角脂層，促進(jìn)皮膚的新陳代謝，增加皮膚的彈性及光滑，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)素。(2)保健：調(diào)節(jié)內(nèi)分泌，改善腸道功能，延緩衰老，改善記憶，改善貧血，促進(jìn)睡眠，改善腸胃功能。(3)減肥：降低膽固醇，清除多余脂肪與降低超重，調(diào)節(jié)大腦的神經(jīng)遞質(zhì)，補(bǔ)充大腦神經(jīng)中樞的營(yíng)養(yǎng)。(4)促進(jìn)傷口愈合和治愈皮膚損傷：能治療皮膚潰瘍，如頑固性創(chuàng)傷、皮膚結(jié)核、麻風(fēng)等。對(duì)小鼠、豚鼠、兔肌肉注射或皮下植入時(shí)可促進(jìn)皮膚生長(zhǎng)、局部白細(xì)胞增多、結(jié)締組織血管網(wǎng)增生、粘液分泌增加、毛和尾的生長(zhǎng)加速等。(5)調(diào)節(jié)免疫功能：積雪草甙可抑制自身抗體的形成，降低免疫球蛋白，改善細(xì)胞免疫功能。(6)抗菌：對(duì)金黃色葡萄菌、溶血型鏈球菌、各種痢疾桿菌、傷寒桿菌均有抑制作用。(7)抗?jié)冏饔茫嚎梢种拼笫笥拈T(mén)結(jié)扎潰瘍和應(yīng)激性潰瘍。(8)對(duì)中樞神經(jīng)的作用：刺激中心神經(jīng)系統(tǒng)，從而改善記憶和抗疲勞。(9)鎮(zhèn)靜、安定作用：可用于治療失眠癥。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，積雪草甙對(duì)靜脈功能不全而致的長(zhǎng)期不能愈合的下肢潰瘍及外傷病例、手術(shù)或創(chuàng)傷引起的肌腱粘連、灼傷等因素所致的創(chuàng)面恢復(fù)后的瘢痕疙瘩以及硬皮病均有一定療效。積雪草甙還能輕度抑制乙酰膽堿的作用，并用于乳腺增生的治療。積雪草甙的保健、藥用功效如此之多，但到目前為止，很少有關(guān)于從積雪草中提取高純度積雪草甙的相關(guān)報(bào)道。cn1491656a公開(kāi)了從積雪草中提取積雪草提取物的工藝步驟，但該提取物的主要成分為積雪草甙和羥基積雪草甙，二者在提取物中的含量為10％-95％，沒(méi)有將積雪草甙和羥基積雪草甙分開(kāi)。cn101210040a公開(kāi)了一種積雪草甙化學(xué)對(duì)照品的分離制備方法，可獲得純度大于98％的積雪草甙化學(xué)對(duì)照品，但該方法是以重量含量30％-97％的積雪草甙提取物為原料進(jìn)行分離提純的，必須先從積雪草中提取出一定含量的積雪草甙提取物。cn101323637a公開(kāi)了一種積雪草甙及其制備方法，制得的積雪草甙純度在95％以上，所得樣品不能完全作為定性的對(duì)照品。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供的一種從積雪草中提取積雪草甙的工藝，以解決土現(xiàn)有技術(shù)制得的積雪草甙純度在95％以上，所得樣品不能完全作為定性的對(duì)照品的問(wèn)題。為解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)工藝：一種從積雪草中提取積雪草甙的工藝，包括以下步驟：s1：將積雪草進(jìn)行粉碎并過(guò)篩子，制得積雪草粉末；s2：向步驟s1制得的積雪草粉末中加入乙醇，在水浴條件下回流提取2-3次，每次提取時(shí)長(zhǎng)為1.2-1.6h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4-4.6，溫度控制為56-62℃，通過(guò)活性炭脫色除雜，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-5.4倍體積的42-50℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2-3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:4-5.2(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-80％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4-4.6，溫度控制為56-62℃，通過(guò)活性炭脫色除雜，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為6-10℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)萃取，制得積雪草甙液體；s7：將步驟s6制得的積雪草甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后結(jié)晶并干燥，制得積雪草甙。優(yōu)選地，步驟s1中所述篩子的目數(shù)為40-60。優(yōu)選地，步驟s2中所述積雪草粉末與乙醇的重量比為1:6-8。優(yōu)選地，所述乙醇的體積分?jǐn)?shù)為70％-80％。優(yōu)選地，步驟s2中所述通過(guò)活性炭脫色除雜的時(shí)間為0.5-1h。優(yōu)選地，步驟s4中所述通過(guò)活性炭脫色除雜的時(shí)間為0.4-0.7h。優(yōu)選地，步驟s6中所述萃取為超臨界co2萃取。優(yōu)選地，所述超臨界co2萃取的條件：萃取釜壓力為12-15mpa，萃取溫度為40-45℃，萃取時(shí)間為28-35min。優(yōu)選地，步驟s6中所述結(jié)晶是在溫度為3-8℃下進(jìn)行的。優(yōu)選地，步驟s6中所述晶體在溫度為40-45℃下真空干燥至含水率≤1％。本發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明的方法制得的積雪草甙的純度在98.02％以上，均高于現(xiàn)有技術(shù)制得的積雪草甙的純度，且能作為定性、定量的對(duì)照品?！揪唧w實(shí)施方式】為便于更好地理解本發(fā)明，通過(guò)以下實(shí)施例加以說(shuō)明，這些實(shí)施例屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。在實(shí)施例中，所述從積雪草中提取積雪草甙的工藝，包括以下步驟：s1：將積雪草進(jìn)行粉碎并過(guò)40-60目篩子，制得積雪草粉末；s2：向步驟s1制得的積雪草粉末中加入其重量6-8倍70％-80％的乙醇，在水浴條件下回流提取2-3次，每次提取時(shí)長(zhǎng)為1.2-1.6h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4-4.6，溫度控制為56-62℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.5-1h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5-5.4倍體積的42-50℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2-3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:4-5.2(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％-80％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4-4.6，溫度控制為56-62℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.4-0.7h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為6-10℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為12-15mpa，萃取溫度為40-45℃，萃取時(shí)間為28-35min，制得積雪草甙液體；s7：將步驟s6制得的積雪草甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為3-8℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為40-45℃下真空干燥至含水率≤1％，制得積雪草甙。實(shí)施例1一種從積雪草中提取積雪草甙的工藝，包括以下步驟：s1：將積雪草進(jìn)行粉碎并過(guò)50目篩子，制得積雪草粉末；s2：向步驟s1制得的積雪草粉末中加入其重量7倍76％的乙醇，在水浴條件下回流提取2次，每次提取時(shí)長(zhǎng)為1.5h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.3，溫度控制為60℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.7h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.3倍體積的46℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:4.8(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)75％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4.3，溫度控制為60℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.6h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為8℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為14mpa，萃取溫度為43℃，萃取時(shí)間為32min，制得積雪草甙液體；s7：將步驟s6制得的積雪草甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為6℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為43℃下真空干燥至含水率為1％，制得積雪草甙。實(shí)施例2一種從積雪草中提取積雪草甙的工藝，包括以下步驟：s1：將積雪草進(jìn)行粉碎并過(guò)40目篩子，制得積雪草粉末；s2：向步驟s1制得的積雪草粉末中加入其重量6倍70％的乙醇，在水浴條件下回流提取2次，每次提取時(shí)長(zhǎng)為1.2h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4，溫度控制為56℃，通過(guò)活性炭脫色除雜1h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5倍體積的42℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行2次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:4(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)70％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4，溫度控制為56℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.7h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為6℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為12mpa，萃取溫度為40℃，萃取時(shí)間為35min，制得積雪草甙液體；s7：將步驟s6制得的積雪草甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為3℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為40℃下真空干燥至含水率為0.8％，制得積雪草甙。實(shí)施例3一種從積雪草中提取積雪草甙的工藝，包括以下步驟：s1：將積雪草進(jìn)行粉碎并過(guò)40目篩子，制得積雪草粉末；s2：向步驟s1制得的積雪草粉末中加入其重量8倍80％的乙醇，在水浴條件下回流提取3次，每次提取時(shí)長(zhǎng)為1.5h，提取完全后合并提取液，調(diào)節(jié)提取液的ph值至4.6，溫度控制為62℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.5h，過(guò)濾后制得一次脫色液；s3：將步驟s2制得的一次脫色液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.4倍體積的50℃的水進(jìn)行溶解，采用無(wú)水乙酸乙酯溶劑進(jìn)行萃取3次，繼續(xù)用無(wú)水乙酸乙酯進(jìn)行3次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5.2(w/v)，制得結(jié)晶粗品；s4：將步驟s3制得的粗晶經(jīng)80％的乙醇溶解，調(diào)節(jié)溶液的ph值至4.6，溫度控制為62℃，通過(guò)活性炭脫色除雜0.4h，過(guò)濾后制得二次脫色液；s5：將步驟s4制得的二次脫色液真空減壓濃縮后，在溫度為10℃下結(jié)晶，制得重結(jié)晶粗品；s6：將步驟s5制得的重結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為15mpa，萃取溫度為45℃，萃取時(shí)間為28min，制得積雪草甙液體；s7：將步驟s6制得的積雪草甙液體進(jìn)行真空減壓濃縮后，在溫度為8℃下進(jìn)行結(jié)晶，所述晶體在溫度為45℃下真空干燥至含水率為0.9％，制得積雪草甙。對(duì)比例1，采用“一種積雪草甙及其制備方法(專(zhuān)利號(hào)：zl200810303151.9)”的實(shí)施例1-3的方法制備積雪草甙。對(duì)實(shí)施例1-3和對(duì)比例1制得的積雪草甙的純度進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下表所示。實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目純度(％)實(shí)施例198.12實(shí)施例298.02實(shí)施例398.61對(duì)比例195.62-96.03由以上表可知，本發(fā)明的方法制得的積雪草甙的純度在98.02％以上，均高于現(xiàn)有技術(shù)制得的積雪草甙的純度，且能作為定性、定量的對(duì)照品。以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明，對(duì)于所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書(shū)確定的專(zhuān)利保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12