1.一種美容用表皮干細胞生長因子制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟A:將表皮干細胞置于細胞培養(yǎng)基進行傳代培養(yǎng);
步驟B:選擇對數(shù)生長期的表皮干細胞,經(jīng)1000rpm和5分鐘離心處理以去處細胞培養(yǎng)基,獲得經(jīng)離心分離的表皮干細胞;
步驟C:將經(jīng)離心分離的表皮干細胞使用生理鹽水洗滌并稀釋至1*107/ml;
步驟D:將經(jīng)生理鹽水稀釋的表皮干細胞置于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中無營養(yǎng)條件培養(yǎng)6小時,提取表皮干細胞分泌的表皮干細胞生長因子。
2.根據(jù)權利要求1所述的美容用表皮干細胞生長因子制備方法,其特征在于,在上述步驟A中,所述表皮干細胞采用以下步驟制備:
步驟A.1:獲取角朊細胞懸液;
步驟A.2:分離角朊細胞懸液獲得表皮干細胞。
3.根據(jù)權利要求2所述的美容用表皮干細胞生長因子制備方法,其特征在于,在上述步驟A.1中,所述角朊細胞懸液采用以下步驟制備:
步驟A.1.1:分離包皮的表皮和真皮層,使用胰蛋白酶消化剪碎的表皮以形成混合物;
步驟A.1.2:過濾混合物獲得細胞懸液,將細胞懸液重懸獲得角朊細胞懸液。
4.根據(jù)權利要求2所述的美容用表皮干細胞生長因子制備方法,其特征在于,在上述步驟A.2中,將角朊細胞懸液置于預先包被IV型膠原蛋白的六孔板,以分離角朊細胞懸液并且獲得貼壁的表皮干細胞。
5.根據(jù)權利要求1所述的美容用表皮干細胞生長因子制備方法,其特征在于,所述表皮干細胞生長因子包括成纖維細胞生長因子、干細胞生長因子、血管內(nèi)皮生長因子和表皮生長因子。
6.根據(jù)權利要求1所述的美容用表皮干細胞生長因子制備方法,其特征在于,在上述步驟D中,還可提取表皮干細胞分泌的膠原蛋白。