本發(fā)明屬于從蠅蛆中提取分離有效成分的方法，具體涉及一種蠅蛆蛋白和蠅蛆油的提取分離方法。
背景技術：
：蠅蛆是一種營養(yǎng)成分全面、動物必需氨基酸含量較高的新型蛋白質來源。張廷軍(1999)報道，蠅蛆含粗蛋白59％～65％、脂肪2.6％～12.0％；與魚粉相比，其必需氨基酸總量、蛋氨酸含量和賴氨酸含量分別是魚粉的2.3、2.7和2.6倍，其中必需氨基酸總量達43.30％，超過世界糧食與農業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織(fao/who)提出的參考值(40％)。梅寧安等(2002)研究表明，蠅蛆風干物中粗蛋白含量為53.4％，高于國產魚粉平均水平(45.0％)，略低于秘魯魚粉水平(60.4％)；蠅蛆幼蟲風干物粗脂肪也高達12.7％，且含16種主要氨基酸。賈生福和馬彥彪(2007)研究表明，鮮蛆含蛋白質18.6％，脂肪5.0％，碳水化合物和鹽3.5％，水分71.4％，維生素b2(核黃素3mg/100g，胡蘿卜素0.4mg/100g)；干蠅蛆、蛹和蠅尸的粗蛋白質含量分別為60.8％、58.2％和64.2％，粗脂肪分別為17.1％、14.5％和6.5％，灰分分別為9.2％，8.1％和7.5％，均超過國產魚粉和豆餅的含量。斯琴高娃等(2008)測出蠅蛆蛋白質含量為56.18％，17種氨基酸含量比豆粕和豆餅高，接近于魚粉，銅、鐵、錳、鋅、鈷、硒、碘等7種必需微量元素含量也比進口魚粉高。胡金偉等(2009)也發(fā)現，烘干蠅蛆蛋白含量與魚粉相近，氨基酸質量比豆粕高、接近于魚粉。白鋼和張翼翔(2010)研究表明，蠅蛆粗蛋白含量62.52％，必需氨基酸含量(色氨酸未測)占總氨基酸的47.72％，必需氨基酸與非必需氨基酸總量的比值為0.91，均高于參考模式(40.00％，0.60)；粗脂肪含量18.05％，亞油酸及亞麻酸等必需脂肪酸含量分別為24.21％和0.68％，不飽和脂肪酸含量58.50％；總糖含量2.87％；維生素a、d、e含量分別為727.8、131.0μg/100g和10.04mg/100g；fe、zn、se、ca含量分別為268、159、8.90mg/kg和0.31％。目前，關于蠅蛆提取物的應用研究也越來越多，研究發(fā)現蠅蛆提取物如蛋白質、油脂、脂肪酸等等具有很好的保健作用：如增強免疫力、抗腫瘤、抗疲勞、抗氧化、預防感冒、改善睡眠、改善生長發(fā)育、輔助降糖等，因此，提取蠅蛆中的有效成分并將其應用于制備保健產品是一項十分重大以及有意義的工作。技術實現要素：本發(fā)明的目的是提供一種同時從蠅蛆中分離提純蠅蛆蛋白和蠅蛆油的方法，該方法能有效的將有效成分進行提取和保留，并且提取率高，獲得的產品純度高。為解決上述問題，本發(fā)明采用的技術方案為：一種蠅蛆蛋白和蠅蛆油的提取分離方法，包括如下步驟：(1)將新鮮蠅蛆經過消毒清洗干凈后，置于粉碎機中加入一定量的水進行粉碎得到蠅蛆漿料；(2)將步驟(1)的漿料升溫至50-60℃，并加入堿性蛋白酶進行水解一定的時間，待到漿料ph降到8.5左右時加入胰蛋白酶進行水解一段時間，之后待到漿料ph降至7.5左右時加入中性蛋白酶繼續(xù)進行水解一段時間，酶解結束后，調節(jié)ph為4.5-6.5之后離心得到酶解液、乳化層及殘渣；(3)將步驟(2)離心得到的酶解液先進行滅酶處理，然后進行濃縮后進行噴霧干燥即得蠅蛆蛋白質；(4)將步驟(2)中乳化層及殘渣先置于微波爐中，控制溫度70-80℃，加熱10-20min，干燥至含水率在12％以下；然后置于亞臨界萃取設備萃取罐中并加入溶劑，在溫度約為30-40℃的條件下，連續(xù)提取3-5次，每次提取時間約為15min；(5)提取完成后進行固液分離，液相產品導入分離罐中，抽真空至壓力為零使溶劑不斷汽化與被萃取物分離，制得蠅蛆油。其中，所述步驟(2)中堿性蛋白酶為2790堿性蛋白酶，所述中性蛋白酶為as1398中性蛋白酶；所述步驟(2)中蛋白酶的添加量均為步驟(1)漿料的1-2wt％。所述步驟(2)中酶解結束后用0.1m的鹽酸調節(jié)ph至4.5-6.5。所述步驟(4)中的提取溶劑為乙烷或丁烷。所述步驟(4)中溶劑的加入量使得步驟(2)中乳化層及殘渣與溶劑的重量體積比為0.5-1kg/l。另外，本發(fā)明還要求保護所述提取分離方法提取分離得到的蠅蛆蛋白質和蠅蛆油。本發(fā)明的技術效果為：本發(fā)明的方法實現了蠅蛆蛋白和蠅蛆油的同時分離提取，一方面采取蛋白酶解法進行酶解，并根據酶解反應的環(huán)境而采用不同類別的水解酶，利于控制蛋白質的水解程度并由此獲得高含量的蛋白質，其蛋白質的收率達到28％以上；另一方面，本發(fā)明對乳化層及殘渣同時進行亞臨界提取，能夠最大程度將蠅蛆中的蠅蛆油進行提取出來，蠅蛆油的提取率達到27％以上，并且工藝簡單，成本低廉，為蠅蛆的深加工和資源的利用提供了一條新的途徑。具體實施方式下面結合實施例對本發(fā)明的技術方案做進一步的闡述：實施例1一種蠅蛆蛋白和蠅蛆油的提取分離方法，包括如下步驟：(1)將新鮮蠅蛆經過消毒清洗干凈后，置于粉碎機中加入一定量的水進行粉碎得到蠅蛆漿料；(2)將步驟(1)的漿料升溫至55℃，并加入2790堿性蛋白酶進行水解一定的時間，待到漿料ph降到8.5左右時加入胰蛋白酶進行水解一段時間，之后待到漿料ph降至7.5左右時加入as1398中性蛋白酶繼續(xù)進行水解一段時間，酶解結束后，用0.1m的鹽酸調節(jié)ph為5.5之后離心得到酶解液、乳化層及殘渣；所述步驟蛋白酶的添加量均為步驟(1)漿料的1.5wt％；(3)將步驟(2)離心得到的酶解液先進行滅酶處理，然后進行濃縮后進行噴霧干燥即得蠅蛆蛋白質；(4)將步驟(2)中乳化層及殘渣先置于微波爐中，控制溫度75℃，加熱15min，干燥至含水率在12％以下；然后置于亞臨界萃取設備萃取罐中并加入溶劑丁烷，在溫度約為35℃的條件下，連續(xù)提取4次，每次提取時間約為15min；所述溶劑的加入量使得乳化層及殘渣與溶劑的重量體積比為0.8kg/l；(5)提取完成后進行固液分離，液相產品導入分離罐中，抽真空至壓力為零使溶劑不斷汽化與被萃取物分離，制得蠅蛆油。實施例2一種蠅蛆蛋白和蠅蛆油的提取分離方法，包括如下步驟：(1)將新鮮蠅蛆經過消毒清洗干凈后，置于粉碎機中加入一定量的水進行粉碎得到蠅蛆漿料；(2)將步驟(1)的漿料升溫至50℃，并加入2790堿性蛋白酶進行水解一定的時間，待到漿料ph降到8.5左右時加入胰蛋白酶進行水解一段時間，之后待到漿料ph降至7.5左右時加入as1398中性蛋白酶繼續(xù)進行水解一段時間，酶解結束后，用0.1m的鹽酸調節(jié)ph為5.0之后離心得到酶解液、乳化層及殘渣；所述步驟蛋白酶的添加量均為步驟(1)漿料的1.2wt％；(3)將步驟(2)離心得到的酶解液先進行滅酶處理，然后進行濃縮后進行噴霧干燥即得蠅蛆蛋白質；(4)將步驟(2)中乳化層及殘渣先置于微波爐中，控制溫度70℃，加熱18min，干燥至含水率在12％以下；然后置于亞臨界萃取設備萃取罐中并加入溶劑丁烷，在溫度約為30℃的條件下，連續(xù)提取3次，每次提取時間約為15min；所述溶劑的加入量使得乳化層及殘渣與溶劑的重量體積比為0.6kg/l；(5)提取完成后進行固液分離，液相產品導入分離罐中，抽真空至壓力為零使溶劑不斷汽化與被萃取物分離，制得蠅蛆油。實施例3一種蠅蛆蛋白和蠅蛆油的提取分離方法，包括如下步驟：(1)將新鮮蠅蛆經過消毒清洗干凈后，置于粉碎機中加入一定量的水進行粉碎得到蠅蛆漿料；(2)將步驟(1)的漿料升溫至60℃，并加入2790堿性蛋白酶進行水解一定的時間，待到漿料ph降到8.5左右時加入胰蛋白酶進行水解一段時間，之后待到漿料ph降至7.5左右時加入as1398中性蛋白酶繼續(xù)進行水解一段時間，酶解結束后，用0.1m的鹽酸調節(jié)ph為6.0之后離心得到酶解液、乳化層及殘渣；所述步驟蛋白酶的添加量均為步驟(1)漿料的1.8wt％；(3)將步驟(2)離心得到的酶解液先進行滅酶處理，然后進行濃縮后進行噴霧干燥即得蠅蛆蛋白質；(4)將步驟(2)中乳化層及殘渣先置于微波爐中，控制溫度80℃，加熱15min，干燥至含水率在12％以下；然后置于亞臨界萃取設備萃取罐中并加入溶劑丁烷，在溫度約為40℃的條件下，連續(xù)提取5次，每次提取時間約為15min；所述溶劑的加入量使得乳化層及殘渣與溶劑的重量體積比為1.0kg/l；(5)提取完成后進行固液分離，液相產品導入分離罐中，抽真空至壓力為零使溶劑不斷汽化與被萃取物分離，制得蠅蛆油。實施例4一種蠅蛆蛋白和蠅蛆油的提取分離方法，包括如下步驟：(1)將新鮮蠅蛆經過消毒清洗干凈后，置于粉碎機中加入一定量的水進行粉碎得到蠅蛆漿料；(2)將步驟(1)的漿料升溫至58℃，并加入2790堿性蛋白酶進行水解一定的時間，待到漿料ph降到8.5左右時加入胰蛋白酶進行水解一段時間，之后待到漿料ph降至7.5左右時加入as1398中性蛋白酶繼續(xù)進行水解一段時間，酶解結束后，用0.1m的鹽酸調節(jié)ph為6.5之后離心得到酶解液、乳化層及殘渣；所述步驟蛋白酶的添加量均為步驟(1)漿料的1.0wt％；(3)將步驟(2)離心得到的酶解液先進行滅酶處理，然后進行濃縮后進行噴霧干燥即得蠅蛆蛋白質；(4)將步驟(2)中乳化層及殘渣先置于微波爐中，控制溫度75℃，加熱15min，干燥至含水率在12％以下；然后置于亞臨界萃取設備萃取罐中并加入溶劑丁烷，在溫度約為35℃的條件下，連續(xù)提取5次，每次提取時間約為15min；所述溶劑的加入量使得乳化層及殘渣與溶劑的重量體積比為0.7kg/l；(5)提取完成后進行固液分離，液相產品導入分離罐中，抽真空至壓力為零使溶劑不斷汽化與被萃取物分離，制得蠅蛆油。對實施例1-4所提取的蠅蛆蛋白質的性能進行評價測定：1.提取蛋白質的含量：采用凱式定氮法測定。2.收率：提取的蛋白質重量/蠅蛆初重×100％。表1：實施例1-4所提取蛋白質的性能測試結果：實施例1實施例2實施例3實施例4蛋白質含量％94.493.892.993.7收率％29.428.928.529.2從上表1可以看出，本發(fā)明的提取工藝所提取的蛋白質的蛋白質含量和收率均達到了較高水平。表2：實施例1-4所提取蠅蛆油的理化性能測試結果：蠅蛆油提取率：提取的蠅蛆油重量/蠅蛆初重×100％。實施例1實施例2實施例3實施例4蠅蛆油提取率％28.527.728.127.2酸價(mgkoh/g)0.840.820.860.85過氧化值(meq/kg)4.254.314.284.19碘值(g/100g)82.983.381.682.4皂化值(mgkoh/g)182.42183.67181.98182.25由表2可以看出本發(fā)明蠅蛆油提取率達到27％以上，且得到的油脂酸價、過氧化值、碘值、皂化值均較好。最后應說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內。當前第1頁12