本發(fā)明涉及青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864菌株在促進蔬菜生長中的應用,屬蔬菜栽培
技術領域:
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背景技術:
:我國是一個人口眾多的農(nóng)業(yè)大國,但目前我國人均耕地只有1.43畝,不足世界平均水平的一半。在促進糧食增產(chǎn)豐收的過程中,化肥起到了重要的作用。但是近年來,由于化肥(一般多是無機化合物)的不合理施用導致了土壤酸化、板結(jié),肥力下降,作物品質(zhì)變劣,江河湖泊富營養(yǎng)化,環(huán)境惡化等。因此,在農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展形勢下,尋找新的肥源,尤其是生物肥源,顯得尤為重要。促進植物生長菌(plantgrowthpromotingbacteria)是生活在土壤或附生于植物根際、根表、莖葉的一類能夠促進植物生長的微生物。植物促生菌通常是通過固氮、溶磷、溶鐵,產(chǎn)生植物激素(生長素、赤霉素、細胞分裂素和乙烯)供給植物利用從而促進植物生長,或者是通過產(chǎn)生一些抗生素來抵抗植物病原菌侵染,間接促進植物生長。青霉屬真菌是土壤微生物群落的一大組成部分,存在于幾乎所有的農(nóng)業(yè)土壤中。它們在植物病原真菌的生物防治、產(chǎn)生促進植物生長的化合物及釋放有機物和無機物中的磷離子中起著重要作用。文獻報道青霉屬一些真菌能夠分泌有機酸,如penicilliumradicum在降解cahpo4、ca3(po4)2等無機磷的過程中產(chǎn)生葡萄糖酸,penicilliumbilaii在降解ca3(po4)2時主要產(chǎn)生草酸和檸檬酸,這些酸可降低培養(yǎng)介質(zhì)的ph,使不溶性的磷轉(zhuǎn)為可溶性磷,促進植物對磷的吸收。目前,北美的磷酸鹽促溶菌penicilliumbilaiae和澳大利亞的促生菌penicilliumradicum已經(jīng)被制備成了商品化菌劑。青霉菌penicilliumoxalicum也是一種有效的生防菌,通過誘導番茄植株產(chǎn)生抗性,能有效減少由尖孢鐮刀菌引起的番茄枯萎病的發(fā)病率。低溫環(huán)境對適溫或喜溫植物在整個生長過程中會產(chǎn)生不良影響,會造成植株矮小、生長遲緩、葉片萎蔫、黃化、植株局部壞死、坐果率低、產(chǎn)量降低和品質(zhì)下降等不良影響。在冬春季生產(chǎn)中,低溫逆境是限制農(nóng)作物生長的主要不利條件。目前,關于利用青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864提高植物抗冷性方面以及促進植物生長的研究尚未見報道。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864菌株在促進蔬菜生長中的應用。本發(fā)明的目的通過以下技術方案實現(xiàn):本發(fā)明使用的真菌是青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864,菌株ymf1.00864已于2013年4月1日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心;保藏單位地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所;保藏號:cgmccno.7407。本發(fā)明的青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864菌株在促進蔬菜生長中的應用。與現(xiàn)有技術相比,本發(fā)明有以下的有益效果:本發(fā)明的青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864發(fā)酵液能使蔬菜的莖干粗壯,葉片更肥大、舒展,顏色更鮮綠,對蔬菜的促生作用十分明顯。具體實施方式以下結(jié)合實施例,詳細說明本發(fā)明。實施1:青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864(pe)的培養(yǎng)青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864發(fā)酵液的培養(yǎng)條件為:將在pda固體培養(yǎng)基中的青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864常規(guī)活化3天,在無菌條件下,將2cm2大小的菌塊接種于裝有250mlpdb培養(yǎng)基的500ml三角瓶中,28℃,160r·min-1搖床培養(yǎng)7d。以上所用到的培養(yǎng)基為:pda固體培養(yǎng)基:去皮馬鈴薯200g,切成小塊后煮沸30min,4層紗布過濾,在濾液中加入20g葡萄糖,加水定容至1l,加入1.5%(m/v)的瓊脂,121℃滅菌20分鐘后待用;pdb液體培養(yǎng)基:去皮馬鈴薯200g,切成小塊后煮沸30min,4層紗布過濾,在濾液中加入20g葡萄糖,加水定容至1l,121℃滅菌20分鐘后待用。實施2:高溫真菌堆肥處理的培養(yǎng)基的制備及幼苗的培養(yǎng)將在pda固體培養(yǎng)基中的thermomycesdupontiym3-4常規(guī)活化3天,在無菌條件下,將2cm2大小的菌塊接種于裝有250mlpdb培養(yǎng)基的500ml三角瓶中,培養(yǎng)條件為45℃,160r·min-1振蕩培養(yǎng)7d,之后將發(fā)酵液與腐殖土混勻并進行堆肥處理(1g腐殖土質(zhì)地為黑色壤土,加入發(fā)酵液量為0.086ml,于45℃培養(yǎng)箱放置15d)。幼苗的培養(yǎng):以葉菜類(小青菜或小白菜)和茄果類(番茄)或不同品種種子為材料。其中:1)茄科番茄(lycopersicumesculentum,購自北京綠東方農(nóng)業(yè)技術研究所);2)十字花科植物小青菜(上海四月慢,購于宿州市種子公司);3)小白菜(四季小白菜,購自云南滇種業(yè)有限公司)。將上述選擇的種子用溫水(沸水:冷水/3:2,v/v)侵泡4h,放在濕潤的濾紙上,28℃黑暗條件下催芽。當種子露白時將種子播到裝有滅菌腐殖質(zhì)的育苗盤中。實施3青霉(penicilliumsp.)ymf1.00864(pe)對農(nóng)作物幼苗生長的促進作用幼苗長至4葉1心時取長勢一致的幼苗移栽于裝有300g高溫真菌堆肥處理的培養(yǎng)基質(zhì)(腐殖質(zhì):蛭石:細沙/7:2:1,v/v/v)的塑料杯中(直徑為9cm、高為18cm),每株幼苗加入40ml定根水。24h后,將20ml的pe真菌發(fā)酵原液施入每株幼苗根部,以pdb培養(yǎng)液作為空白對照。每個實驗處理設十個重復。種植時平均溫度為18.0℃—5.8℃。結(jié)果顯示如下表:表1:pe對番茄植株葉長、葉寬和莖粗的影響pe實驗組c對照組增長量葉長/cm5.423.6946.62%葉寬/cm2.251.4060.71%莖粗/mm7.374.7555.26%以上數(shù)據(jù)均為平均值表2:pe對小青菜葉長和葉寬的影響pe實驗組c對照組增長量葉長/cm25.8618.7437.99%葉寬/cm12.207.2368.74%表3:pe對小白菜葉長和葉寬的影響pe實驗組c對照組增長量葉長/cm29.9323.5127.31%葉寬/cm8.645.1268.76%結(jié)果表明:施用青霉(pe)真菌發(fā)酵原液的番茄植株莖干粗壯,以及測試小白菜和小青菜的葉片更肥大、舒展,顏色更鮮綠,對蔬菜的促生作用十分明顯。當前第1頁12