本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及牛蒡石斛基制備靈芝菌絲體的方法。

背景技術(shù)：

靈芝，是祖國中醫(yī)藥寶庫中的珍品，素有"仙草"之美譽。古今藥理與臨床研究均證明，靈芝確有防病治病、延年益壽之功效。東漢時期的《神農(nóng)本草經(jīng)》、明代著名醫(yī)藥學(xué)家李時珍的《本草綱目》，都對靈芝的功效有詳細并極為肯定的記載?，F(xiàn)代藥理學(xué)與臨床實踐進一步證實了靈芝的藥理作用，并證實靈芝多糖是靈芝扶正固本、滋補強壯、延年益壽的主要成分。現(xiàn)在，靈芝作為藥物已正式被國家藥典收載，同時它又是國家批準的新資源食品，無毒副作用，可以藥食兩用。

隨著技術(shù)研究不斷的深入，通過生物深層發(fā)酵技術(shù)獲得了全新的靈芝產(chǎn)品——靈芝菌絲體。靈芝菌絲體是由靈芝孢子萌發(fā)形成菌絲，而靈芝子實體是通過菌絲不斷地分解，吸收養(yǎng)份，在合適的光照，空氣，溫度等其它條件配合時形成的。子實體成熟后彈射孢子粉，也就形成了靈芝的生活史，靈芝子實體所需要的構(gòu)成物質(zhì)，有一半以上的營養(yǎng)物質(zhì)來源于菌絲體中的貯存養(yǎng)份。經(jīng)過相關(guān)部門檢測：靈芝菌粉具有靈芝相同的有效成分，其中粗多糖及靈芝多糖和蛋白質(zhì)的含量遠遠高于天然靈芝。所開發(fā)出來的菌絲體產(chǎn)品用于失眠健忘、身體虛弱、神經(jīng)衰弱等作用效果和破壁靈芝孢子粉差不多；對于治療高血壓、冠心病、糖尿病、癌癥、有顯著效果，所以靈芝菌絲體被冠名為“健康長壽食品”。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的在于提供一種在保有靈芝菌絲體原有的使用營養(yǎng)價值外，進一步增加其功效，提高機體免疫功能、護肝利膽、降低血糖、久服輕身耐老延緩衰老的牛蒡石斛基制備靈芝菌絲體的方法。

本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的，牛蒡石斛基制備靈芝菌絲體的方法，其特征在于：該靈芝菌絲體是以牛蒡和石斛為主要原料，制備成牛蒡石斛培養(yǎng)基；然后將牛蒡石斛培養(yǎng)基滅菌后接入靈芝菌種，培養(yǎng)至長滿靈芝菌絲，烘干后，即得到靈芝菌絲體；具體制備步驟按如下進行：

步驟1）制備牛蒡石斛粉，將烘干后的牛蒡和石斛按重量比1:0.5-0.8，稱取混合后粉碎成60-100目，制成牛蒡石斛粉；

步驟2）制備牛蒡石斛培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中各組分及其質(zhì)量分數(shù)為：牛蒡石斛粉，10--20%；蛋白胨，1%--5%；麥芽糖，0.5--1%；葡萄糖溶液，1--2%；酵母膏，1%；kh2po4，0.1--0.3%；vb1，0.1%；蒸餾水補足至100%；

所述牛蒡石斛培養(yǎng)基制備方法：先向牛蒡石斛粉中倒入葡萄糖溶液，充分振蕩均勻后，再加入酵母膏和部分蒸餾水，在25℃發(fā)酵12h，得到發(fā)酵液；利用離心機，進行離心，得到牛蒡石斛發(fā)酵液，再依次加入蛋白胨、麥芽糖、kh2po4和vb1，調(diào)節(jié)ph至4.5-5.5，121℃滅菌20min，即得到牛蒡石斛培養(yǎng)基；

步驟3）接種靈芝菌種，在無菌環(huán)境下把靈芝菌種接入牛蒡石斛培養(yǎng)基中，接入固體靈芝菌種時，要接入6-8的點的固體菌種，接入靈芝液體菌種時，要接入以培養(yǎng)基重量是10-12%的液體菌種；

步驟4）菌絲培養(yǎng)：將接好種的培養(yǎng)容器移到培養(yǎng)室避光培養(yǎng)，在溫度是26--29℃，相對濕度為60--65％的環(huán)境下培養(yǎng)8--10天，培養(yǎng)基內(nèi)長滿靈芝菌絲；

步驟5）烘干，在溫度30-45℃的環(huán)境下，將長滿靈芝菌絲的培養(yǎng)基烘至含水量3-6%，即得到靈芝菌絲體。

進一步優(yōu)化的，所述步驟2）制備牛蒡石斛培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中各組分及其質(zhì)量分數(shù)為：牛蒡石斛粉，15%；蛋白胨，3%；麥芽糖，0.5%；葡萄糖溶液，2%；酵母膏，1%；kh2po4，0.3%；vb1，0.1%；蒸餾水補足至100%。

進一步優(yōu)化的，所述步驟4）菌絲培養(yǎng)：將接好種的培養(yǎng)容器移到培養(yǎng)室避光培養(yǎng)，在溫度是27℃，相對濕度為62％的環(huán)境下培養(yǎng)10天，培養(yǎng)基內(nèi)長滿靈芝菌絲。

本發(fā)明有益技術(shù)效果：本發(fā)明制備的靈芝菌絲體不僅對用于失眠健忘、身體虛弱、神經(jīng)衰弱以及對于治療高血壓、冠心病、糖尿病、癌癥、有顯著效果，而且還含有石斛和牛蒡具有的藥用功效，具體表現(xiàn)在養(yǎng)肝護肝、滋陰養(yǎng)顏以及在臨床上常用于惡性腫瘤的輔助治療，具有能改善腫瘤患者的癥狀，減輕放化療引起的的副作用，增強免疫功能，提高生存質(zhì)量。

具體實施方式

下面通過實施例對本發(fā)明作進一步說明，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明白，實施例只是用于解釋本發(fā)明，并不限定對本發(fā)明的保護范圍。

實施例1

牛蒡石斛基制備靈芝菌絲體的方法，該靈芝菌絲體是以牛蒡和石斛為主要原料，制備成牛蒡石斛培養(yǎng)基；然后將牛蒡石斛培養(yǎng)基滅菌后接入靈芝菌種，培養(yǎng)至長滿靈芝菌絲，烘干后，即得到靈芝菌絲體；具體制備步驟按如下進行：

步驟1）制備牛蒡石斛粉，將烘干后的牛蒡和石斛按重量比1:0.5-0.8，稱取混合后粉碎成60-100目，制成牛蒡石斛粉；

步驟2）制備牛蒡石斛培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中各組分及其質(zhì)量分數(shù)為：牛蒡石斛粉，10；蛋白胨，1%；麥芽糖，1%；葡萄糖溶液，2%；酵母膏，1%；kh2po4，0.1；vb1，0.1%；蒸餾水補足至100%；

所述牛蒡石斛培養(yǎng)基制備方法：先向牛蒡石斛粉中倒入葡萄糖溶液，充分振蕩均勻后，再加入酵母膏和部分蒸餾水，在25℃發(fā)酵12h，得到發(fā)酵液；利用離心機，進行離心，得到牛蒡石斛發(fā)酵液，再依次加入蛋白胨、麥芽糖、kh2po4和vb1，調(diào)節(jié)ph至4.5-5.5，121℃滅菌20min，即得到牛蒡石斛培養(yǎng)基；

步驟3）接種靈芝菌種，在無菌環(huán)境下把靈芝菌種接入牛蒡石斛培養(yǎng)基中，接入固體靈芝菌種時，要接入6-8的點的固體菌種，接入靈芝液體菌種時，要接入以培養(yǎng)基重量是10-12%的液體菌種；

步驟4）菌絲培養(yǎng)：將接好種的培養(yǎng)容器移到培養(yǎng)室避光培養(yǎng)，在溫度是29℃，相對濕度為65％的環(huán)境下培養(yǎng)8天，培養(yǎng)基內(nèi)長滿靈芝菌絲；

步驟5）烘干，在溫度30-45℃的環(huán)境下，將長滿靈芝菌絲的培養(yǎng)基烘至含水量3-6%，即得到靈芝菌絲體。

實施例2

牛蒡石斛基制備靈芝菌絲體的方法，該靈芝菌絲體是以牛蒡和石斛為主要原料，制備成牛蒡石斛培養(yǎng)基；然后將牛蒡石斛培養(yǎng)基滅菌后接入靈芝菌種，培養(yǎng)至長滿靈芝菌絲，烘干后，即得到靈芝菌絲體；具體制備步驟按如下進行：

步驟1）制備牛蒡石斛粉，將烘干后的牛蒡和石斛按重量比1:0.5-0.8，稱取混合后粉碎成60-100目，制成牛蒡石斛粉；

步驟2）制備牛蒡石斛培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中各組分及其質(zhì)量分數(shù)為：牛蒡石斛粉，15%；蛋白胨，3%；麥芽糖，0.5%；葡萄糖溶液，2%；酵母膏，1%；kh2po4，0.3%；vb1，0.1%；蒸餾水補足至100%。

所述牛蒡石斛培養(yǎng)基制備方法：先向牛蒡石斛粉中倒入葡萄糖溶液，充分振蕩均勻后，再加入酵母膏和部分蒸餾水，在25℃發(fā)酵12h，得到發(fā)酵液；利用離心機，進行離心，得到牛蒡石斛發(fā)酵液，再依次加入蛋白胨、麥芽糖、kh2po4和vb1，調(diào)節(jié)ph至4.5-5.5，121℃滅菌20min，即得到牛蒡石斛培養(yǎng)基；

步驟3）接種靈芝菌種，在無菌環(huán)境下把靈芝菌種接入牛蒡石斛培養(yǎng)基中，接入固體靈芝菌種時，要接入6-8的點的固體菌種，接入靈芝液體菌種時，要接入以培養(yǎng)基重量是10-12%的液體菌種；

步驟4）菌絲培養(yǎng)：將接好種的培養(yǎng)容器移到培養(yǎng)室避光培養(yǎng)，在溫度是26℃，相對濕度為60％的環(huán)境下培養(yǎng)10天，培養(yǎng)基內(nèi)長滿靈芝菌絲；

步驟5）烘干，在溫度30-45℃的環(huán)境下，將長滿靈芝菌絲的培養(yǎng)基烘至含水量3-6%，即得到靈芝菌絲體。

實施例3

牛蒡石斛基制備靈芝菌絲體的方法，該靈芝菌絲體是以牛蒡和石斛為主要原料，制備成牛蒡石斛培養(yǎng)基；然后將牛蒡石斛培養(yǎng)基滅菌后接入靈芝菌種，培養(yǎng)至長滿靈芝菌絲，烘干后，即得到靈芝菌絲體；具體制備步驟按如下進行：

步驟1）制備牛蒡石斛粉，將烘干后的牛蒡和石斛按重量比1:0.5-0.8，稱取混合后粉碎成60-100目，制成牛蒡石斛粉；

步驟2）制備牛蒡石斛培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中各組分及其質(zhì)量分數(shù)為：牛蒡石斛粉，20%；蛋白胨，5%；麥芽糖，1%；葡萄糖溶液，2%；酵母膏，1%；kh2po4，0.1；vb1，0.1%；蒸餾水補足至100%；

所述牛蒡石斛培養(yǎng)基制備方法：先向牛蒡石斛粉中倒入葡萄糖溶液，充分振蕩均勻后，再加入酵母膏和部分蒸餾水，在25℃發(fā)酵12h，得到發(fā)酵液；利用離心機，進行離心，得到牛蒡石斛發(fā)酵液，再依次加入蛋白胨、麥芽糖、kh2po4和vb1，調(diào)節(jié)ph至4.5-5.5，121℃滅菌20min，即得到牛蒡石斛培養(yǎng)基；

步驟3）接種靈芝菌種，在無菌環(huán)境下把靈芝菌種接入牛蒡石斛培養(yǎng)基中，接入固體靈芝菌種時，要接入6-8的點的固體菌種，接入靈芝液體菌種時，要接入以培養(yǎng)基重量是10-12%的液體菌種；

步驟4）菌絲培養(yǎng)：將接好種的培養(yǎng)容器移到培養(yǎng)室避光培養(yǎng)，在溫度是27℃，相對濕度為62％的環(huán)境下培養(yǎng)10天，培養(yǎng)基內(nèi)長滿靈芝菌絲。

步驟5）烘干，在溫度30-45℃的環(huán)境下，將長滿靈芝菌絲的培養(yǎng)基烘至含水量3-6%，即得到靈芝菌絲體。