技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
一種基因敲除減毒單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，缺失hly基因，其保藏編號(hào)為：CCTCC?M?2016523。還提供了上述減毒單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的制備方法，以EGD?e基因組為模板擴(kuò)增hly基因的上游片段P1/P2、下游片段P3/P4；然后進(jìn)行單酶切，產(chǎn)物使用連接酶連接，得到的上下游連接產(chǎn)物與pMD19?T?Vector連接；將連有同源臂的pMD19?T?Vector與pKSV7質(zhì)粒使用限制性內(nèi)切酶SmaI和SalI進(jìn)行雙酶切，產(chǎn)物使用連接酶連接，將陽(yáng)性克隆的質(zhì)粒抽提后進(jìn)行SmaI和SalI限制性內(nèi)切酶雙酶切，獲得hly基因缺失的Lm減毒菌株。通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，hly基因敲除后，Lm的毒性下降。

技術(shù)研發(fā)人員：謝曼曼;劉箐;孫靜娟;馬俊飛;馬蘭
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海理工大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：2017.03.23
技術(shù)公布日：2017.08.18