本發(fā)明涉及采用雙功能和單功能化合物作為活性劑，用于降低受試者血液或血清中尿酸的藥物組合物和方法。

背景

痛風(fēng)折磨超過800萬美國受試者，并且與血液中尿酸(ua)的慢性升高有關(guān)。該病狀的發(fā)病率在過去十年中增加了一倍。當(dāng)ua超出溶解極限時，其形成停留于關(guān)節(jié)和腎內(nèi)的結(jié)晶，導(dǎo)致嚴(yán)重疼痛、破壞性關(guān)節(jié)炎和腎衰竭。慢性痛風(fēng)的治療需要集中于于減少ua產(chǎn)生或增加其排泄的長期(如果不是終生的話)療法。用于痛風(fēng)初始療法的護理標(biāo)準(zhǔn)是別嘌醇，一種抑制關(guān)鍵產(chǎn)生酶黃嘌呤氧化酶(xo)的藥物。于2009年上市的(非布索坦；takeda)具有與xo抑制劑類似的活性，但療效略微更高并且安全性有所改進。黃嘌呤氧化酶抑制劑在超過90％的痛風(fēng)患者中用作初始療法；然而，在低于三分之一的患者中達到了治療目標(biāo)，藥物有多種副作用，并且常見的是過敏癥(對于別嘌醇尤其如此)?？紤]到大多數(shù)患者實際上沒有響應(yīng)，繼續(xù)使用經(jīng)過很多個月施用的無效治療以便測定可能響應(yīng)的患者的低百分比意味著患者的沉重負擔(dān)以及全球醫(yī)療保健系統(tǒng)的巨大開支，此外，高失敗比例導(dǎo)致很多患者變得不依從療法并且因此發(fā)展痛風(fēng)的慢性并發(fā)癥，尤其是破壞性關(guān)節(jié)炎和腎功能不全的風(fēng)險增加。

自2000年以來，稱為轉(zhuǎn)運蛋白的蛋白的生物學(xué)迅速發(fā)展已經(jīng)提供了一系列新的藥物靶標(biāo)。酶urat1是高能力腎轉(zhuǎn)運蛋白，其重新吸收最初通過腎從血液過濾到尿液中的大多數(shù)ua。某些尿酸鹽轉(zhuǎn)運蛋白的抑制劑可預(yù)防此類再吸收，并從而增加ua排泄?，F(xiàn)在已知若干種藥物抑制urat1，包括苯溴馬隆(已批準(zhǔn)但是sanofi于2003年在美國撤回)、丙磺舒以及目前處于后期開發(fā)的研究藥物雷西納得(astrazeneca)。

這些藥物均為單功能的。也就是說，它們僅抑制降低血液中ua水平的兩種平衡途徑之一(即，減少產(chǎn)生或增加排泄)。別嘌醇是通過抑制黃嘌呤氧化酶減少ua產(chǎn)生的藥物的實例，但是別嘌醇對腎排泄沒有影響。與預(yù)期的一樣，別嘌醇不會影響urat1或其他腎尿酸鹽轉(zhuǎn)運蛋白的活性。苯溴馬隆、雷西納得和丙磺舒主要經(jīng)由urat1的抑制而增加ua排泄(即，它們促進尿酸尿)，但是這些藥劑對ua產(chǎn)生沒有影響，因為它們對黃嘌呤氧化酶沒有實質(zhì)影響。由于黃嘌呤氧化酶抑制是高尿酸血癥治療的首要、優(yōu)選和主要形式，促進尿酸尿的藥劑通常在二線使用并且通常僅與黃嘌呤氧化酶抑制劑聯(lián)用而不是作為單一藥劑使用。

作為潛在的細胞毒性抗癌藥物，已經(jīng)評價了巴比妥酸鹽的非鎮(zhèn)靜5-甲酰苯胺衍生物，包括麥爾巴隆(merbarone)(5-(n-苯基甲酰胺基)-2-硫代-巴比妥酸)。隨后，發(fā)現(xiàn)用麥爾巴隆進行臨床治療與血液中ua水平的顯著降低有關(guān)。盡管存在這些發(fā)現(xiàn)，麥爾巴隆的細胞毒性活性將完全排除其作為慢性終生ua代謝病癥治療的用途，因為這種用途的安全性(主要是其遺傳毒性潛力)將對人體健康的其他方面構(gòu)成嚴(yán)重風(fēng)險。只有在遺傳毒性活性可以與各種降尿酸活性在化學(xué)上分開的情況下，此類臨床用途才將有可能。本發(fā)明人之前已經(jīng)描述了麥爾巴隆的許多非遺傳毒性降尿酸衍生物。

對于可以降低血液中ua水平并且為罹患痛風(fēng)的患者提供更好治療的新藥存在迫切需要。ua降低被普遍認(rèn)為對痛風(fēng)和其他高尿酸血癥的患者有益，并且減少的血清ua被國際藥物管理機構(gòu)(例如，美國食品藥品管理局(u.s.foodanddrugadministration)[fda]、歐洲藥品管理局(europeanmedicinesagency)[ema]等)認(rèn)可作為這些疾病的商用藥物批準(zhǔn)的終點。如前所述，可以克服黃嘌呤氧化酶抑制劑有限的臨床活性的藥物是可用的或目前正在研究，但是僅作為聯(lián)合使用的“補充(add-on)”。本發(fā)明涉及的新型化合物可提供升高的ua水平的當(dāng)前療法以及ua代謝病癥諸如痛風(fēng)的治療的替代方案。這些化合物中的某些具有雙功能活性的特殊優(yōu)勢(即，通過抑制黃嘌呤氧化酶減少ua產(chǎn)生并且通過抑制腎尿酸鹽轉(zhuǎn)運蛋白增加ua排泄)，這使得它們適合用作初始療法以及用作單一藥劑而不是“補充”療法。此外，化合物中的某些具有與現(xiàn)有技術(shù)藥物諸如麥爾巴隆相比降低的毒性。

概要

在第一方面，本發(fā)明涉及具有由式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

其中

x是o或s；

w存在或不存在，并且如果存在則是一個或多個羥基部分，r¹oh，或至少一個羥基部分和r¹oh；

z存在或不存在，并且如果存在則是–so2n(r²)2、-r¹co2h、–nr²so2r³、–nr²so2n(r²)2或–nr²c(o)n(r²)2；

其中r¹是烷基；

其中每個r²獨立地是h、烷基或芳基，各自任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；

其中每個r³獨立地是烷基或芳基，各自任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；并且

其中每個x^a獨立地選自o或s，

條件是w和z的至少一個存在，并且如果w存在且z不存在，則w不是4′-羥基；

在一個或多個具體實施方案中，具有由式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物是選自由以下組成的組以下的化合物：

其中x是o或s、w不存在并且z是–so2nh2的化合物；

其中x是o或s、w不存在并且z是–nhso2ch3的化合物；

其中x是o或s、w不存在并且z是–nhso2cf3的化合物；

其中x是o或s、z不存在并且w是-oh和-ch2oh的化合物；和

其中x是o或s、w不存在并且z是–ch2co2h的化合物。

其中x是o或s、w不存在并且z是的化合物。

在第二方面，本發(fā)明涉及具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

其中

x為o或s；并且

每個z獨立地存在或不存在，并且如果存在則獨立地選自一個或多個鹵素原子、-cn、-cf3，-or²、-c(o)r²、sr²、-s(o)fr³其中f是1或2、-n(r²)2、-no2、-co2r²、-oco2r³、oc(o)r²、-con(r²)2、-nr²c(o)r²、-so2n(r²)2、-nr²so2r³、–nr²so2n(r²)2或–nr²c(o)n(r²)2、烷基、芳基、烯基和炔基；

其中每個r²獨立地是h、烷基或芳基；

其中每個r³獨立地是烷基或芳基，任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；并且

其中a、b、c、d和e各自獨立地是碳或氮，條件是a、b、c、d和e的至少一個是氮并且z不與氮直接連接，除了當(dāng)z是-c(o)r²、-s(o)fr³、-co2r³、-con(r²)2、-so2n(r²)2、烷基、芳基、烯基或炔基時，z可通過替代nh基團的氫而任選地連接至a、b、c、d或e處的氮。

在一個或多個具體實施方案中，具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物是選自由以下組成的組的化合物：

其中x是o；w和z不存在；b、c和d是n；e是nh；并且a是c的化合物，及其互變異構(gòu)體；

其中x是s；w和z不存在；b、c和d是n；e是nh；并且a是c的化合物，及其互變異構(gòu)體；和

其中x是o或s；w和z不存在；a、c、d和e是n；并且b是ch的化合物。

在第三方面，本發(fā)明涉及具有由式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

其中

x為o或s；并且

每個z獨立地存在或不存在，并且如果存在則獨立地選自由以下組成的組：一個或多個鹵素原子、-cn、-cf3、-or²、-c(o)r²、sr²、-s(o)fr³其中f是1或2、-n(r²)2、-no2、-co2r²、-oco2r³、oc(o)r²、-con(r²)2、-nr²c(o)r²、-so2(nr²)2、-nr²so2r³、–nr²so2n(r²)2或–nr²c(o)n(r²)2、烷基、芳基、烯基和炔基；

其中每個r²獨立地是h、烷基或芳基；

其中每個r³獨立地是烷基或芳基，任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；并且

其中a、b和c各自獨立地是碳或氮，條件是a、b和c的至少一個是氮并且z不與氮直接連接，除了當(dāng)z是-c(o)r²、-s(o)fr³、-co2r³、-con(r²)2、-so2n(r²)2、烷基、芳基、烯基或炔基時，z可通過替代nh基團的氫而任選地連接至a、b或c的氮。

在一個或多個具體實施方案中，具有由式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物是其中x是o；兩個z均不存在；a和c是n；并且b是nh的化合物及其互變異構(gòu)體。

在具有由式(i)、式(ii)或式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的任一個的某些實施方案中，烷基部分可各自獨立地是c1-c6，芳基部分可各自獨立地是c6-c10，烯基部分可各自獨立地是c2-c6，并且炔基部分可各自獨立地是c2-c6。

本發(fā)明的另一方面涉及用于降低受試者血液或血清中尿酸水平的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效降低血液或血清尿酸水平的量的具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合。在該實施方案的變型中，所述方法包括向有需要的受試者施用有效降低血液或血清尿酸水平的量的根據(jù)如上所述式(i)、式(ii)、式(iii)的化合物或其組合的具體實施方案的化合物。

本發(fā)明該方面的變型涉及用于預(yù)防受試者血液或血清中尿酸水平升高的方法，所述方法包括向有需要的受試者施用有效預(yù)防血液或血清尿酸水平升高的量的具有由式(i)、式(ii)或式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合。在該方面的具體實施方案中，用于預(yù)防受試者血液或血清中尿酸水平升高的方法包括向有需要的受試者施用有效降低血液或血清尿酸水平的量的根據(jù)如上所述式(i)、式(ii)、式(iii)的化合物或其組合的具體實施方案的一種化合物(向有需要的受試者)。

在這些方法的某些實施方案中，將具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合施用于患有痛風(fēng)、高尿酸血癥、腎病、關(guān)節(jié)炎、腎結(jié)石、腎衰竭、尿石病，鉛中毒，甲狀旁腺功能亢進，銀屑病，先天性遺傳代謝缺陷、結(jié)節(jié)病或心血管疾病的受試者，以降低尿酸水平。在具體實施方案中，向患有痛風(fēng)或高尿酸血癥的受試者施用藥物以降低尿酸水平。在其它實施方案中，向患有痛風(fēng)、高尿酸血癥、腎病、關(guān)節(jié)炎、腎結(jié)石、腎衰竭、尿石病、鉛中毒、甲狀旁腺功能亢進、銀屑病、先天性遺傳代謝缺陷、結(jié)節(jié)病或心血管疾病的受試者施用如上所述的根據(jù)式(i)、式(ii)、式(iii)化合物的具體實施方案的化合物或組合，以降低尿酸水平。

在前述方法中任一種的某些實施方案中，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合通過注射、輸注、鼻內(nèi)、直腸內(nèi)或口服施用而施用。在其它實施方案中，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合通過注射、輸注或口服施用而施用。

在前述方法中任一種的某些實施方案中，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合在使得能夠控釋的制劑中施用?？蒯屩苿┽尫呕钚猿煞指徛蜓娱L其體內(nèi)作用的持續(xù)時間。在具體實施方案中，控釋制劑是口服控釋制劑。在前述方法中任一種的其它實施方案中，根據(jù)如上所述式(i)、式(ii)、式(iii)的化合物或組合的具體實施方案的化合物在使得能夠控釋的制劑中施用。

在前述方法中任一種的某些實施方案中，與施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合之前的血液或血清尿酸水平相比，血液或血清尿酸水平降低至少約25％。在具體實施方案中，受試者的血液或血清尿酸水平與施用之前的水平相比降低至少約50％。在具體實施方案中，即使在1.500mg/m²/天或更低的每日劑量下尿酸水平仍降低約75％。

在前述方法中任一種的某些實施方案中，向受試者施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合直至每日四次，每日一次，每周一次、兩次或三次或者每月一次。在前述方法中任一種的其它實施方案中，向受試者施用根據(jù)如上所述式(i)、式(ii)、式(iii)的化合物或組合的具體實施方案的化合物直至每日四次，每日一次，每周一次、兩次或三次或者每月一次。

本發(fā)明的第四方面涉及用于治療與血液或血清中升高的尿酸有關(guān)或由血液或血清中升高的尿酸導(dǎo)致的尿酸代謝病癥的方法，包括向有需要的受試者施用有效降低血液或血清尿酸水平或預(yù)防血液或血清尿酸水平升高的量的具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，從而治療尿酸代謝病癥。一個此類實施方案涉及用于治療與血液或血清中升高的尿酸有關(guān)或由血液或血清中升高的尿酸導(dǎo)致的尿酸代謝病癥的方法，包括向受試者施用根據(jù)如上所述式(i)、式(ii)、式(iii)的化合物或組合的具體實施方案的化合物直至每日四次，每日一次，每周一次、兩次或三次或者每月一次。

本發(fā)明的另一方面提供藥物組合物，其包含具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，以及藥學(xué)上可接受的載體。在具體實施方案中，藥物組合物包含根據(jù)如上所述式(i)、式(ii)、式(iii)的化合物或其組合的具體實施方案的化合物。在藥物組合物的某些實施方案中，藥學(xué)上可接受的載體選自由以下的一種或多種組成的組：溶劑、分散劑、涂層、表面活性劑、防腐劑、醇、多元醇和等滲劑。在前述藥物組合物中任一個的某些實施方案中，組合物被配制用于通過注射、輸注或口服途徑施用。在前述藥物組合物中任一個的某些實施方案中，組合物被配制為溶液、乳液、膠囊或片劑。在前述藥物組合物中任一個的某些實施方案中，出于更緩慢釋放活性成分或延長其體內(nèi)作用持續(xù)時間的目的，組合物被配制用于具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合的控釋。

本發(fā)明的另一方面涉及用于合成上文討論的化合物的方法，如下文更詳細討論。

附圖簡述

圖1說明了用于制備具有由當(dāng)w不存在時的式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的一般合成方案。

圖2說明了用于制備具有由當(dāng)w＝oh時的式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的一般合成方案。

圖3說明了用于制備具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的一般合成方案。

圖4說明了用于制備具有由式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的一般合成方案。

圖5說明了用于制備具有由式(iia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖6說明了用于制備具有由式(iib)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖7說明了用于制備具有由式(iic)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖8說明了用于制備具有由式(iiia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖9說明了用于制備具有由式(ic)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖10說明了用于制備具有由式(ib)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖11說明了用于制備具有由式(ia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖12說明了用于制備具有由式(id)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖13說明了用于制備具有由式(ie)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖14說明了用于制備具有由式(iid)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖15說明了用于制備具有由式(iie)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖16說明了用于制備具有由式(if)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖17說明了用于制備具有由式(ih)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖18說明了用于制備具有由式(ig)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖19說明了用于制備具有由式(iif)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的示例性合成方案。

圖20說明了用于制備具有由當(dāng)z是時的式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的一般合成方案。

詳述

在描述本發(fā)明的幾個示例性實施方案之前，應(yīng)該理解，本發(fā)明不受以下描述中所闡述的構(gòu)造或工藝步驟的細節(jié)限制。本發(fā)明能夠存在其它實施方案并且能以各種方式實施或進行。

在本說明書中提及“一個實施方案”、“某些實施方案”、“一個或多個實施方案”或“實施方案”意味著結(jié)合所述實施方案加以描述的特定特征、結(jié)構(gòu)、材料或特性包括在本發(fā)明的至少一個實施方案中。因此，在本說明全文中的不同位置出現(xiàn)的諸如“在一個或多個實施方案中”、“在某些實施方案中”、“在一個實施方案中”或“在實施方案中”等短語未必是指同一個本發(fā)明實施方案。此外，在一個或多個實施方案中，特定的特征、結(jié)構(gòu)、材料或特性可以用任何合適的方式組合。

如本文所使用，關(guān)于所公開化合物的術(shù)語“雙功能”意指化合物抑制腎轉(zhuǎn)運蛋白(包括但不限于urat1)和黃嘌呤氧化酶。任一靶的抑制效價可以變化，但是一般而言對于黃嘌呤氧化酶和腎轉(zhuǎn)運蛋白(諸如urat1)低于約100μm的ic50被認(rèn)為是雙功能。對于黃嘌呤氧化酶和urat1低于約50μm的ic50被認(rèn)為是特別有活性的雙功能化合物，低于10μm的ic50被認(rèn)為是非常有效的雙功能化合物。

如本文所使用，關(guān)于所公開化合物的術(shù)語“單功能”意指化合物抑制尿酸排泄涉及的尿酸代謝途徑中的酶，所述酶是腎轉(zhuǎn)運蛋白(包括但不限于urat1)，或者是尿酸產(chǎn)生涉及的酶(包括但不限于黃嘌呤氧化酶)，但不是兩者。單個靶的抑制效價可以變化，但是一般而言對于黃嘌呤氧化酶或urat1的一個大于約100μm的ic50，以及對于黃嘌呤氧化酶或urat1的另一個低于約100μm的ic50被認(rèn)為是單功能。對于黃嘌呤氧化酶或urat1的一個低于約50μm的ic50，以及對于黃嘌呤氧化酶或urat1的另一個大于約100μm的ic50被認(rèn)為是特別有活性的單功能化合物。對于黃嘌呤氧化酶或urat1的一個低于約10μm的ic50，以及對于黃嘌呤氧化酶或urat1的另一個大于約100μm的ic50被認(rèn)為是非常有效的單功能化合物。

如本文所使用，術(shù)語“治療”是指降低升高的血液或血清中的尿酸水平，優(yōu)選地，通過將水平降低至正常、低-正?；騺?正常范圍，整體目標(biāo)是緩解活動性疾病的癥狀和/或預(yù)防活動性疾病的復(fù)發(fā)。例如，用于治療升高的血清尿酸的典型“治療目標(biāo)”是水平≤6.0mg/dl?！吧叩摹蹦蛩崴揭话闶侵父?正常以及超過-正常尿酸水平，因為長期升高的水平可導(dǎo)致需要另外治療的病狀。

如本文所使用，術(shù)語“預(yù)防”血液或血清中尿酸水平的升高是指在受試者中保持正?；蛑委熒峡山邮艿难夯蜓逯心蛩崴?，否則所述受試者會發(fā)生尿酸水平的增加；整體目標(biāo)是預(yù)防癥狀的發(fā)展或復(fù)發(fā)和/或預(yù)防活動性疾病的復(fù)發(fā)。應(yīng)當(dāng)理解，預(yù)防尿酸水平升高是下面討論的維持療法的目標(biāo)。

本文所使用的巴比妥環(huán)上位置的編號按照warrell慣例(美國專利no.4,880,811)。還應(yīng)理解，盡管本文公開的化合物一般通過特定化學(xué)結(jié)構(gòu)來說明，但化合物的公開意圖包括它們的互變異構(gòu)體。巴比妥環(huán)中互變異構(gòu)體的代表性實例包括下文描述的結(jié)構(gòu)，以及式i、ii和iii的取代基上任何另外的互變異構(gòu)體：

本文所述的化合物符合以下治療領(lǐng)域的某些需要：降低血液中的尿酸水平和治療與升高的血液或血清中尿酸水平有關(guān)或由升高的血液或血清中尿酸水平導(dǎo)致的尿酸代謝病癥?；衔镏械哪承┦莡rat1或黃嘌呤氧化酶的有效單功能抑制劑?；衔镏械哪承┦莡rat1和黃嘌呤氧化酶的雙功能抑制劑。

本發(fā)明化合物改進的生物活性特征以及它們的效價使得這些化合物成為有用的新藥，用于降低血液中的尿酸水平，以及用于治療與升高的血液或血清中尿酸水平有關(guān)或由升高的血液或血清中尿酸水平導(dǎo)致的尿酸代謝病癥，包括痛風(fēng)。特別重要的是，雙功能化合物的優(yōu)勢可以有效地用作單一療法，用于降低血液中的尿酸水平，用于治療尿酸代謝病癥，以及具體地用于治療痛風(fēng)。

在第一方面，本發(fā)明涉及具有由式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

其中

x是o或s；

w存在或不存在，并且如果存在則是一個或多個羥基部分，r¹oh，或至少一個羥基部分和r¹oh；并且

z存在或不存在，并且如果存在則是–so2n(r²)2、r¹co2h、–nr²so2r³、-nr²so2nr²或–nr²c(o)nr²，

其中r¹是烷基；

其中每個r²獨立地是h、烷基或芳基，各自任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；

其中每個r³獨立地是烷基或芳基，各自任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；并且

其中每個x^a獨立地選自o或s，

條件是w和z的至少一個存在，并且如果w存在且z不存在，則w不是4′-羥基；

具有由式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的具體實施方案包括以下化合物：

1.其中x是o、w不存在并且z是–so2nh2的化合物，例如具有由式(ia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-氨磺酰苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-氨磺酰苯基))氨甲?；捅韧姿?。

2.其中x是o、w不存在并且z是–nhso2ch3的化合物，例如具有由式(ib)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-n-(4-(甲基亞磺酰氨基)苯基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(甲基亞磺酰氨基)苯基))氨甲?；捅韧姿帷?/p>

3.其中x是o、w不存在并且z是–nhso2cf3的化合物，例如具有由式(ic)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(三氟甲基亞磺酰氨基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(三氟甲基亞磺酰氨基)苯基))氨甲酰基巴比妥酸。

4.其中x是o、z不存在并且w是4′-羥基和5′-ch2oh的化合物，例如具有由式(id)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-n-(4-羥基-3-(羥甲基)苯基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-羥基-3’-(羥甲基)苯基))氨甲?；捅韧姿?。

5.其中x是o；w不存在并且z是–ch2co2h的化合物，例如具有由式(ie)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

2-(4-(6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺基)苯基)乙酸或5-(n-(4’-羧甲基苯基))氨甲?；捅韧姿?。

6.其中x是o、w不存在并且z是5-酮-1,2,4-噁二唑的化合物，例如具有由式(if)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(5’-氧代-4’,5’-二氫-1’,2’,4’-噁二唑-3’-基)苯基))氨甲酰基巴比妥酸。

7.其中x是s、w不存在并且z是5-酮-1,2,4-噁二唑的化合物，例如具有由式(ig)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-4-氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(5’-氧代-4’,5’-二氫-1’,2’,4’-噁二唑-3’-基)苯基))氨甲酰基-2-硫代巴比妥酸。

8.其中x是o、w不存在并且z是5-酮異噁唑的化合物，例如具有由式(ih)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫異噁唑-3-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(5’-氧代-4’,5’-二氫異噁唑-3’-基)苯基))氨甲酰基巴比妥酸。

具有由式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物可一般如圖1(當(dāng)w不存在時)或圖2(當(dāng)w＝oh時)或圖20(當(dāng)x＝酮-噁二唑時)所示制備。圖1所示工藝的中心在于：將適合的活化側(cè)鏈與巴比妥酸(x＝o)或硫代巴比妥酸(x＝s)偶聯(lián)，以直接生成式(i)的化合物。有多種方式可以生成活化側(cè)鏈，包括生成相應(yīng)的芳基胺的氨基甲酸對硝基苯酯或產(chǎn)生胺相應(yīng)的異氰酸酯。氨基甲酸對硝基苯酯可通過胺與氯甲酸4-硝基苯酯反應(yīng)來制備。異氰酸酯可通過標(biāo)準(zhǔn)方法，諸如相應(yīng)的芳基胺與1,1’-羰基二咪唑或類似試劑反應(yīng)或通過相應(yīng)的羧酸與疊氮磷酸二苯酯反應(yīng)來制備。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到除了這些方法以外，還有多種方法可以活化胺從而與巴比妥酸(x＝o)或硫代巴比妥酸(x＝s)反應(yīng)。

當(dāng)w存在時(w＝oh)式(i)的化合物的一般合成工藝顯示于圖2。其按照如圖1所示基本上相同的順序，除了在某些情況下苯酚的保護(w＝oh)，諸如苯酚的二芐醚或乙酸酯可能是必需的。將適合的活化側(cè)鏈與巴比妥酸(x＝o)或硫代巴比妥酸(x＝s)偶聯(lián)之后，可通過標(biāo)準(zhǔn)方法(諸如乙酸酯的水解裂解或二芐醚的還原)去除保護基。在某些情況下苯酚的保護(w＝oh)可能不是必需的，如圖12所示。

當(dāng)x是5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑環(huán)時，由式(i)表示的化合物的合成也一般如圖1所示進行。然而，5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑環(huán)將如圖20所示最初構(gòu)建。5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑環(huán)的合成工藝也描述于kohara等人，j.med.chem，39，5228(1996)。

在第二方面，本發(fā)明涉及的化合物是具有由式(i)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的變型，其中苯基被取代或未取代的四唑取代。這些化合物具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)：

其中

x為o或s；并且

每個z獨立地存在或不存在，并且如果存在則獨立地選自一個或多個鹵素原子、-cn、-cf3、-or²、-c(o)r²、sr²、-s(o)fr³其中f是1或2、-n(r²)2、-no2、-co2r²、-oco2r³、oc(o)r²、-con(r²)2、-nr²c(o)r²、-so2(nr²)2、-nr²so2r³、-nr²so2n(r²)2、-nr²c(o)n(r²)2、烷基、芳基、烯基和炔基；

其中每個r²獨立地是h、烷基或芳基；

其中每個r³獨立地是烷基或芳基，任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；并且

其中a、b、c、d和e各自獨立地是碳或氮，條件是a、b、c、d和e的至少一個是氮并且z不與氮直接連接，除了當(dāng)z是-c(o)r²、-s(o)fr³、-co2r³、-con(r²)2、-so2n(r²)2、烷基、芳基、烯基或炔基時，z可通過替代nh基團的氫而任選地連接至a、b、c、d或e處的氮。應(yīng)理解，z向氮的直接連接需要z直接連接的a、b、c、d或e氮呈nh的形式，從而氫可以被z替代。

具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的具體實例包括以下化合物：

1.其中x是o；兩個z均不存在；b、c和d是n；e是nh；并且a是c的化合物，例如具有由式(iia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(4-(2h-四唑5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(2’h-四唑5’-基)苯基))氨甲酰基巴比妥酸。

2.其中x是s；兩個z均不存在；b、c和d是n；e是nh，并且a是c的化合物，例如具有由式(iib)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(4-(2h-四唑5-基)苯基)-6-羥基-4-氧代-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(2’h-四唑5’-基)苯基))氨甲?；?2-硫代巴比妥酸。

3.其中x是o；兩個z均不存在；a、c、d和e是n；并且b是ch的化合物，例如具有由式(iic)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(4-(1h-四唑1-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(1’h-四唑1’-基)苯基))氨甲?；捅韧姿?。

4.其中x是o；兩個z均不存在；c是n；e是nh；a、b和d是ch的化合物；例如具有由式(iid)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(4-(1h-咪唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(1’h-咪唑-5’-基)苯基))氨甲酰基巴比妥酸。

5.其中x是o，兩個z均不存在；c和d是n；e是nh；a和b是c的化合物，例如具有由式(iie)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(4-(1h-1,2,3-三唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(1’h-1’,2’,3’-三唑-5’-基)苯基))氨甲?；捅韧姿帷?/p>

6.其中x是s，兩個z均不存在；c和d是n；e是nh；a和b是c的化合物，例如具有由式(iif)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(4-(1h-1,2,3-三唑-5-基)苯基)-6-羥基-4-氧代-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(4’-(1’h-1’,2’,3’-三唑-5’-基)苯基))氨甲?；?2-硫代巴比妥酸。

具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物一般可根據(jù)圖3中所示的合成方案制備。具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物包括其中b、c、d或e中的一個可作為n-h存在的化合物。在此類情況下，可以用適合的保護基(諸如thp)保護該官能團。一旦適合的中間體受到保護，即可完成其向適合活化的轉(zhuǎn)化，類似于圖1描述的順序。當(dāng)oh存在時(w＝oh)，具有由式(ii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物一般可如圖2中所示制備。將適合的活化側(cè)鏈與巴比妥酸(x＝o)或硫代巴比妥酸(x＝s)偶聯(lián)之后，可通過標(biāo)準(zhǔn)方法去除保護基，諸如酸的水溶液以去除thp基團。在b、c、d或e沒有n-h的情況下，不必采用保護基，因為與巴比妥酸(x＝o)或硫代巴比妥酸(x＝s)偶聯(lián)之后直接生成式(ii)的化合物。應(yīng)理解，式(ii)的化合物可作為互變異構(gòu)體存在。應(yīng)理解，式(ii)中所示的結(jié)構(gòu)涵蓋所有可能的互變異構(gòu)體。

在第二方面，本發(fā)明涉及的化合物是具有結(jié)構(gòu)由式(i)表示的化合物的變型，其中苯基被苯并三唑替代。這些化合物具有由式(iii)表示的結(jié)構(gòu)：

其中

x為o或s；并且

每個z獨立地存在或不存在，并且如果存在則獨立地選自一個或多個鹵素原子、-cn、-cf3、-or²、-c(o)r²、sr²、-s(o)fr³其中f是1或2、-n(r²)2、-no2、-co2r²、-oco2r³、oc(o)r²、-con(r²)2、-nr²c(o)r²、-so2(nr²)2、-nr²so2r³、-nr²so2n(r²)2、-nr²c(o)n(r²)2、烷基、芳基、烯基和炔基；

其中每個r²獨立地是h、烷基或芳基；

其中每個r³獨立地是烷基或芳基，任選地被一個或多個鹵素原子或or²取代；并且

a、b和c各自獨立地是碳或氮，條件是a、b和c的至少一個是氮并且z不與氮直接連接，除了當(dāng)z是-c(o)r²、-s(o)fr³、-co2r³、-con(r²)2、烷基、芳基、烯基或炔基時，z可通過替代nh基團的氫而任選地連接至a、b或c處的氮。應(yīng)理解，z向氮的直接連接需要z直接連接的a、b或c氮呈nh的形式，從而氫可以被z替代。

應(yīng)理解，式(iii)中苯并三唑基團的五元環(huán)可作為多種互變異構(gòu)體存在。所有互變異構(gòu)體均意圖被包括在上面顯示的式(iii)的結(jié)構(gòu)中。

具有由式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的具體實例包括以下化合物：

1.其中x是o；兩個z均不存在；a和c是n；并且b是nh的化合物，例如具有由式(iiia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物：

n-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺或5-(n-(1’h-苯并[d][1’,2’,3’]三唑-6’-基))氨甲?；捅韧姿?。

具有由式(iiia)表示的結(jié)構(gòu)的化合物在上文顯示為苯并三唑基團的五元環(huán)的b互變異構(gòu)體。應(yīng)理解，(iiia)中顯示的結(jié)構(gòu)式意圖涵蓋互變異構(gòu)體a和c以及上面顯示的具體互變異構(gòu)體。

具有由式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物一般可如圖4所示合成。這些化合物包括其中a、b或c中的一個作為n-h存在的化合物。在此類情況下，可以用適合的保護基(諸如thp)保護該官能團，不過這并不總是必須的。適合的活化側(cè)鏈與巴比妥酸(x＝o)或硫代巴比妥酸(x＝s)的偶聯(lián)如圖3所示化合物的合成所描述進行。

如本文所公開，對具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合的參考意圖包括屬于通用結(jié)構(gòu)的所有化合物以及上面討論的這些化合物(式(ia-h)、式(iia-f)和式(iiia)以及它們的互變異構(gòu)體)的具體實施方案。

在第一方面，本發(fā)明提供用于降低受試者血液或血清中尿酸水平的方法，包括向受試者施用有效降低血液或血清尿酸水平的量的具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合。應(yīng)理解，用于降低尿酸水平的所有此類方法均對應(yīng)于具有由式(i)、式(ii)、式(iii)、式(iv)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，其用于醫(yī)學(xué)用途；以及具有由式(i)、式(ii)或式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，其用于治療升高的尿酸水平。通常，當(dāng)受試者血液中的尿酸水平升高，即，在正常或超過正常水平的范圍上限時將施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合。本領(lǐng)域技術(shù)人員將進一步認(rèn)識到，也考慮在達到正常尿酸水平之后繼續(xù)施用以便保持尿酸水平在正常范圍以內(nèi)，并且降低由于之前持續(xù)的高尿酸血癥可能已經(jīng)出現(xiàn)的尿酸的整體身體負擔(dān)。因此，用于預(yù)防血液或血清中尿酸水平升高的方法也是本發(fā)明的方面。應(yīng)理解，用于預(yù)防尿酸水平升高的所有此類方法均對應(yīng)于具有由式(i)、式(ii)或式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，其用于醫(yī)學(xué)用途；以及具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，其用于預(yù)防升高的尿酸水平。

血液中的正常尿酸水平一般在4.3mg/dl至8.0mg/dl范圍內(nèi)。在某些實施方案中，向血液尿酸水平為至少約6mg/dl的受試者施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合。施用可持續(xù)直至達到約6.0mg/dl或更低的血液尿酸水平；然而，一般認(rèn)為保持尿酸代謝病癥患者的尿酸水平低于該目標(biāo)是有益的。

在某些實施方案中，本發(fā)明提供治療由血液或血清中升高的尿酸水平導(dǎo)致或與血液或血清中升高的尿酸水平有關(guān)的尿酸代謝病癥(高尿酸血癥)的方法。治療此類病癥的方法包括向有需要的受試者施用有效降低血清尿酸水平的量的具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，從而治療受試者的尿酸代謝病癥。這些病癥與血液或血清中升高的尿酸水平有關(guān)或由血液或血清中升高的尿酸水平導(dǎo)致，并且包括痛風(fēng)、高尿酸血癥、腎病、關(guān)節(jié)炎、腎結(jié)石、腎衰竭、尿石病、鉛中毒、甲狀旁腺功能亢進、銀屑病、先天性遺傳代謝缺陷、結(jié)節(jié)病和心血管疾病，所述升高的尿酸水平是在正?；虺^正常的范圍上限。這些藥物尤其可用于治療痛風(fēng)和腎病(包括急性尿酸腎病、慢性尿酸鹽腎病和尿酸腎結(jié)石)。此外，用化療治療一些癌癥導(dǎo)致大量尿酸釋放到血液中，這可能會損傷腎。根據(jù)本發(fā)明的方法，也可以治療、預(yù)防或改善化療引起的高尿酸血癥，尤其是稱為“腫瘤溶解綜合征”的病癥。向患有高尿酸血癥的受試者(諸如患有痛風(fēng)、腎病，或存在由于化療引起升高的尿酸水平的風(fēng)險的受試者)施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合可通過降低血液中的尿酸水平，或者預(yù)防或控制其增加的水平來治療、預(yù)防或改善這些病癥。在具體實施方案中，通過施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合治療的尿酸代謝病癥是痛風(fēng)。應(yīng)理解，用于治療由升高的血液或血清中尿酸水平導(dǎo)致或與升高的血液或血清中尿酸水平有關(guān)的尿酸代謝病癥(高尿酸血癥)的所有此類方法對應(yīng)于具有由式(i)、式(ii)或式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，其用于醫(yī)學(xué)用途；以及具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，其用于治療由升高的血液或血清中尿酸水平導(dǎo)致或與升高的血液或血清中尿酸水平有關(guān)的尿酸代謝病癥。

向受試者施用的具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合的劑量可以是足以達到施用時程期間期望的血液或血清中尿酸水平降低的任何劑量。在某些實施方案中，施用約20至約1,500mg/m²/天的每日劑量。在其它實施方案中，施用約20至約500mg/m²/天、約20至約250mg/m²/天、約20至約150mg/m²/天或約20至約100mg/m²/天的每日劑量。在其它實施方案中，施用約50至約1,500mg/m²/天的每日劑量。在其它實施方案中，施用約50至約500mg/m²/天、約50至約150mg/m²/天、約50至約100mg/m²/天或約20至約100mg/m²/天的每日劑量。

在前述方法中任一種的某些實施方案中，經(jīng)胃腸外、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)、直腸內(nèi)或口服向受試者施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合。特別有用的施用途徑包括注射、輸注或口服施用。每個劑量施用的藥物的量是足以達到血液或血清中尿酸水平降低的量，以便在治療過程中預(yù)防血液或血清中尿酸水平的升高，或者治療或預(yù)防尿酸代謝病癥。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，基于患者的身體組成或患者對治療的降尿酸響應(yīng)的劑量個體化可能在醫(yī)學(xué)上是必需或需要的。

可以在一個時間段內(nèi)向受試者間歇地或連續(xù)地施用藥物，以便達到期望的血液或血清中尿酸水平的降低，或治療尿酸代謝病癥。例如，劑量可以間歇地每天多次施用，或以每日，每周一次、兩次或三次，或每月間隔施用。在具體的實例中，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合可通過經(jīng)24小時連續(xù)靜脈輸注向受試者施用，持續(xù)約五天?？蛇x地，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，可通過靜脈輸注經(jīng)約1小時至約5小時向受試者施用，持續(xù)約連續(xù)五天。在具體的實例中，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合可通過肌肉內(nèi)注射或通過靜脈輸注經(jīng)約10分鐘向受試者施用，持續(xù)約連續(xù)五天。在進一步的具體實施方案中，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合可通過每日團注注射向受試者施用，持續(xù)約五天?？梢愿淖?nèi)魏吻笆龇桨钢械氖┯脮r間段以達到期望的尿酸水平降低，包括約2天、約3天、約4天、約一周或約兩周的施用，或在重復(fù)的治療周期中更長的時間段，并且這些治療可以以每2至10周的間隔重復(fù)。

除了連續(xù)靜脈輸注或團注注射以外，具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合可以向受試者口服施用。在該實施方案中，如上所述量的口服劑量可以每天一次、兩次、三次或四次施用而施用，持續(xù)1、2、3、4或5天以達到期望的尿酸水平降低。在進一步的實施方案中，如上所述的口服劑量可以每天一次或者每天一次、兩次、三次或四次施用而施用，持續(xù)一周或兩周以達到期望的尿酸水平降低。

應(yīng)當(dāng)理解，需要降低血液或血清中尿酸水平或需要治療尿酸代謝病癥的受試者初始將接受更積極的治療，以達到期望的尿酸水平降低。初始療法和尿酸水平降低至正?；騺?正常水平之后，受試者可以在一個時間段內(nèi)或終生接受進一步治療，以保持血液或血清中尿酸的正?；騺?正常水平并且預(yù)防初始治療之后的尿酸水平升高。維持或預(yù)防方案可包括在必要時或需要時降低劑量和/或更低頻率施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，以保持血液或血清中正常或亞-正常的尿酸水平。例如，在維持方案中藥物可以每日、每周、每月或者在治療階段期間尿酸水平升高的時候間歇地施用。此類維持方案將用于保持正?；騺?正常尿酸水平持續(xù)延長的時間段，以及降低受試者發(fā)展由長期高尿酸血癥導(dǎo)致或與長期高尿酸血癥有關(guān)的尿酸代謝病癥的終生風(fēng)險。尿酸水平從超過正?；蚋哒５秸；騺?正常的初始降低，以及正常或亞-正常尿酸水平的維持均為尿酸代謝病癥的治療中所包括的特征。預(yù)計在某些實施方案中，典型的患者將需要變化持續(xù)時間的每日治療，并且此類每日治療可以間歇地提供，持續(xù)終生或延長的時間。

在前述方法中任一種的某些實施方案中，與施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合之前的尿酸水平相比，受試者的血液或血清尿酸水平降低至少25％。在某些進一步實施方案中，受試者的血液或血清尿酸水平與施用之前的水平相比降低50％或更多。在具體實施方案中，即使在500mg/m²/天或更低的每日劑量下尿酸水平仍降低約75％。

在本發(fā)明的第二方面，提供了用于治療與血液或血清中升高的尿酸有關(guān)或由血液或血清中升高的尿酸引起的尿酸代謝病癥的方法，包括向有需要的受試者施用有效降低血液或血清尿酸水平的量的具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，從而治療尿酸代謝病癥。涉及給藥、施用途徑、初始療法和維持療法的用于治療尿酸代謝病癥的方法的具體實施方案如上所述，用于降低血液或血清中的尿酸水平。尿酸水平的初始降低通常是迅速的，經(jīng)常在1-3天內(nèi)發(fā)生。尿酸水平降低至正?；騺?正常水平之后，繼續(xù)維持或預(yù)防治療導(dǎo)致升高的尿酸的至少一個癥狀的可檢測的改進，例如炎癥減少、疼痛減少、畸形發(fā)展減緩、腎結(jié)石發(fā)展減少、腫瘤溶解綜合征的預(yù)防或心血管疾病的改進。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，非常需要預(yù)防由于血清尿酸水平升高復(fù)發(fā)的復(fù)發(fā)癥狀從而需要延長治療，以使患者利益最大化。

在對應(yīng)于前述方法的實施方案中，本發(fā)明涉及使用本文公開的化合物或其組合，用于降低有需要的受試者血液或血清中的尿酸水平，預(yù)防受試者血液或血清中尿酸水平的升高，或治療由高尿酸血癥導(dǎo)致或與高尿酸血癥有關(guān)的尿酸代謝病癥。所公開的治療或預(yù)防方法的每一個(包括施用途徑、劑量和所施用的化合物)也適用于化合物的此類用途。

本發(fā)明的另一方面提供藥物組合物，其包含具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合，以及藥學(xué)上可接受的載體。在藥物組合物的某些實施方案中，組合物被配制為溶液或片劑。藥物的溶液或分散體可在水或鹽水中制備。在藥物組合物的某些實施方案中，藥學(xué)上可接受的載體是選自由以下一種或多種組成的組：溶劑、分散劑、涂層(例如，卵磷脂)、表面活性劑(例如，羥丙纖維素)、防腐劑(例如，對羥基苯甲酸酯、苯酚、硫柳汞、山梨酸、氯丁醇)、乳液、醇(例如，乙醇)、多元醇(例如，甘油、丙二醇)和等滲劑(例如，糖、氯化鈉)。

在前述藥物組合物的某些實施方案中，組合物被配制用于具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合的控釋。在前述方法的某些實施方案中，以控釋形式施用具有由式(i)、式(ii)、式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物或其組合?？蒯尳M合物可包含引起活性成分更緩慢釋放或延長其體內(nèi)作用持續(xù)時間的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。控釋組合物的實例包括延遲活性成分(例如，單硬脂酸鋁、明膠、天然或合成親水膠)的吸收的藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑?？蛇x地，藥物組合物的控釋可采用諸如泵、植入物或透皮貼片的裝置。

在前述藥物組合物的某些實施方案中，組合物被配制用于改進的口服生物利用度或體內(nèi)延長的釋放。例如，微乳、粒度降低和絡(luò)合技術(shù)可用于改進化合物的溶出速率或平衡溶解度。用于改進口服生物利用度或延釋的其他適合的化學(xué)和物理方法對于本領(lǐng)域技術(shù)人員也將是已知的。

實施例

實施例1：n-(4-(2h-四唑5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(a7，式(iia)，參考圖5中所示的合成方案)。

步驟1.5-(4-硝基苯基)-2-(四氫-2h-吡喃-2-基)-2h-四唑(a2)：在0℃和氮氣下，向化合物a1(1.91g，10.0mmol)和對甲苯磺酸吡啶鎓(0.250g，1.00mmol)在無水二氯甲烷(100ml)中的攪拌溶液經(jīng)10min逐滴添加3,4-二氫吡喃(0.910ml，15.0mmol)。完成添加之后，將反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度，并攪拌18h。隨后，在減壓下濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用100％二氯甲烷洗脫，以得到呈淡黃色固體的化合物a2(2.38g，87％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ8.44(d,j＝9.0hz,2h),8.35(d,j＝9.1hz,2h),6.28(dd,j＝7.6,3.3hz,1h),3.90–3.81(m,2h),2.42–2.28(m,1h),2.26–2.14(m,1h),2.10–1.97(m,1h),1.86–1.70(m,1h),1.70–1.60(m,2h)。

步驟2.4-(2-(四氫-2h-吡喃-2-基)-2h-四唑5-基)苯胺(a3)：將化合物a2(1.38g，5.00mmol)和10％鈀碳(50％濕潤，0.300g)在乙醇(50ml)和乙酸乙酯(50ml)中的混懸液在1個大氣壓的氫氣和環(huán)境溫度下攪拌18h。隨后，將反應(yīng)混合物經(jīng)短的硅藻土墊過濾，并將濾液在減壓下濃縮。將所獲得的殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用0％至100％二氯甲烷/乙酸乙酯洗脫，以得到呈無色油狀物的化合物a3(1.08g，88％)：¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.00(d,j＝8.7hz,2h),6.97(d,j＝6.8hz,2h),6.02(dd,j＝7.9,2.8hz,1h),4.60–3.60(brs,2h),4.08–3.99(m,1h),3.85–3.76(m,1h),2.56–2.43(m,1h),2.21–2.11(m,2h),1.86–1.68(m,3h)。

步驟3.(4-(2-(四氫-2h-吡喃-2-基)-2h-四唑5-基)苯基)氨基甲酸4-硝基苯酯(a4)：在0℃和氮氣下，向氯甲酸4-硝基苯酯(0.440g，2.18mmol)在無水二氯甲烷(10ml)中的攪拌溶液經(jīng)30min逐滴添加化合物a3(0.540g，2.18mmol)和吡啶(0.180ml，2.30mmol)在無水二氯甲烷(20ml)中的溶液。完成添加之后，將反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度，并攪拌3h。此時，添加另一份氯甲酸4-硝基苯酯(0.050g，0.250mmol)和吡啶(0.090ml，1.20mmol)，并將混合物在環(huán)境溫度下再攪拌15h。隨后，在減壓下濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物用二乙醚(50ml)和二氯甲烷(10ml)的混合物處理，超聲處理5min，然后攪拌0.5h。將所得到的固體通過真空過濾收集，隨后用二乙醚(25ml)和水(50ml)洗滌，并在40℃和高真空下干燥，以得到呈白色固體的化合物a4(0.270g，30％)。濃縮二乙醚洗滌濾液。將所得到的殘余物用水(50ml)研磨，過濾，并在40℃和高真空下干燥，以得到第二批呈白色固體的化合物a4(0.245g，28％)?；衔颽4：¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.31(d,j＝9.3hz,2h),8.21(d,j＝8.7hz,2h),7.59(d,j＝8.6hz,2h),7.42(d,j＝9.2hz,2h),7.14(brs,1h),6.06(dd,j＝7.8,2.7hz,1h),4.07–4.03(m,1h),3.86–3.80(m,1h),2.56–2.47(m,1h),2.25–2.14(m,2h),1.88–1.66(m,3h)。

步驟4.6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(2-(四氫-2h-吡喃-2-基)-2h-四唑5-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺三乙胺鹽(a6)：在55℃和氮氣下，向巴比妥酸a5(0.084g，0.660mmol)在無水1,4-二噁烷(5ml)中的攪拌混懸液中添加三乙胺(90ul，0.660mmol)。在55℃下攪拌10min之后，經(jīng)5min逐滴添加化合物a4(0.270g，0.660mmol)在無水1,4-二噁烷(2ml)中的溶液。完成添加之后，將混合物在85℃下加熱4h。隨后，過濾熱的混合物，將濾餅用1,4-二噁烷(4×10ml)洗滌，并在減壓下干燥，以得到呈白色固體的化合物a6(0.117g，35％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.31(s,1h),9.62(brs,2h),9.15–8.85(brs,1h),7.94(d,j＝8.7hz,2h),7.70(d,j＝8.7hz,2h),6.16(dd,j＝8.0,3.2hz,1h),3.96–3.72(m,2h),3.08(q,j＝7.0hz,6h),2.40–2.24(m,1h),2.18–1.97(m,2h),1.83–1.70(m,1h),1.70–1.57(m,2h),1.17(t,j＝7.3hz,9h)；apcims,m/z398[m–h]^-。

步驟5.n-(4-(2h-四唑5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(a7，式(iia))：將化合物a6(0.218g，0.436mmol)在1.25m氯化氫的甲醇溶液(10ml)中的混懸液在55℃下加熱3h。隨后，過濾熱的混合物，將濾餅用甲醇(3×5ml)和水(4×10ml)洗滌，并在高真空和45℃下干燥，以得到呈白色固體的化合物a7(0.120g，88％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.60–11.30(brs,2h),11.80(s,1h),8.07(d,j＝8.7hz,2h),7.80(d,j＝8.7hz,2h)；apcims,m/z314[m–h]^-。

實施例2：n-(4-(2h-四唑5-基)苯基)-6-羥基-4-氧代-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(b3，式(iib)，參考圖6中所示的合成方案)。

步驟1.6-羥基-4-氧代-n-(4-(2-(四氫-2h-吡喃-2-基)-2h-四唑5-基)苯基)-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺三乙胺鹽(b2)：在55℃和氮氣下，向硫代巴比妥酸b1(0.086g，0.600mmol)在無水1,4-二噁烷(3ml)中的攪拌混懸液添加三乙胺(82ul，0.600mmol)。攪拌10min之后，經(jīng)5min逐滴添加化合物a4(0.245g，0.597mmol)在無水1,4-二噁烷(2ml)中的溶液。然后，將混合物在85℃下加熱3h。隨后，將反應(yīng)混合物濃縮至原始體積的大約一半。將所得到的固體通過真空過濾收集，用1,4-二噁烷(4×10ml)洗滌，并在高真空下干燥，以得到呈白色固體的化合物b2(0.029g，12％)。將1,4-二噁烷洗滌濾液濃縮至約3ml體積，將所得到的固體通過真空過濾收集，用冷1,4-二噁烷(3×1ml)洗滌并在高真空下干燥，以得到第二批呈灰白色固體的化合物b2(0.136g，44％)?；衔颾2：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.12(s,1h),10.98(brs,2h),9.10–8.85(brs,1h),7.96(d,j＝8.6hz,2h),7.72(d,j＝8.7hz,2h),6.17(dd,j＝7.9,3.1hz,1h),3.93–3.73(m,2h),3.11(q,j＝7.2hz,6h),2.40–2.25(m,1h),2.20–1.98(m,2h),1.85–1.70(m,1h),1.70–1.58(m,2h),1.17(t,j＝7.3hz,9h)；apcims,m/z414[m–h]^-。

步驟2.n-(4-(2h-四唑5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(b3，式iib)：將化合物b2(0.160g，0.385mmol)在1.25m氯化氫的甲醇溶液(10ml)中的混懸液在50℃下攪拌6h。隨后，過濾熱的混合物，將濾餅用甲醇(3×5ml)洗滌，并在高真空和45℃下干燥，以得到呈白色固體的化合物b3(0.093g，90％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.30–12.70(brs,2h),11.62(s,1h),8.07(d,j＝8.7hz,2h),7.81(d,j＝8.8hz,2h)；apcims,m/z330[m–h]^-。

實施例3：n-(4-(1h-四唑-1-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(e4，式(iic)，參考圖7中所示的合成方案)。

步驟1和2.n-(4-(1h-四唑1-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺咪唑鹽(e3)：在環(huán)境溫度和氮氣下，向化合物c2(0.535g，3.30mmol)在無水dmso(4ml)中的攪拌溶液添加化合物e1(0.484g，3.00mmol)。然后，將反應(yīng)混合物攪拌1h，以得到化合物e2在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣下向巴比妥酸a5(0.384g，3.00mmol)在無水1,4-二噁烷(12ml)中的混懸液添加三乙胺(0.303g，3.00mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌5min。然后，向該混合物添加化合物e2在dmso中的溶液。將所得到的混合物加熱至85℃，持續(xù)3h。冷卻至環(huán)境溫度后，將所得到的固體通過真空過濾收集，用1,4-二噁烷(3×25ml)和meoh(3×25ml)洗滌，并真空干燥，以得到呈黃色固體的化合物e3(0.801g，70％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.22(s,1h),10.01(s,1h),8.58(s,1h),7.82–7.76(m,4h),7.46(s,2h)；esimsm/z314[m–h]^-。

步驟3.n-(4-(1h-四唑1-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(e4，式iic)：將化合物e3(0.400g，1.04mmol)在1m氯化氫的甲醇溶液(8ml)中的混懸液在環(huán)境溫度下攪拌4h。隨后，過濾混合物，將濾餅用甲醇(3×15ml)和水(3×15ml)洗滌，并在高真空和45℃下干燥，以得到呈淡黃色固體的化合物e4(0.215g，65％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.20–11.20(brs,2h),11.67(s,1h),10.09(s,1h),7.93(d,j＝8.9hz,2h),7.81(d,j＝9.0hz,2h)；apcims,m/z314[m–h]^-。

實施例4：n-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(g4，式(iiia)，參考圖8中所示的合成方案)。

步驟1和2.n-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺咪唑鹽(g3)：在環(huán)境溫度和氮氣下，向化合物c2(1.78g，11.0mmol)在無水dmso(5ml)中的溶液添加化合物g1(1.34g，10.0mmol)。然后，將反應(yīng)混合物攪拌1h，以得到化合物g2在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣下向巴比妥酸a5(1.28g，10.0mmol)在無水1,4-二噁烷(35ml)中的混懸液添加三乙胺(1.01g，10.0mmol)。添加之后，將混合物攪拌20min。然后，向該混合物經(jīng)30min逐滴添加化合物g2在dmso中的溶液。將所得到的混合物加熱至85℃，持續(xù)3h。隨后，過濾熱的反應(yīng)混合物。將濾餅用1,4-二噁烷(4×25ml)和meoh(3×20ml)洗滌并真空干燥，以得到呈棕褐色固體的化合物g3(2.31g，65％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.25(s,1h),8.69(s,1h),8.42(s,1h),7.86(d,j＝8.9hz,1h),7.52(s,2h),7.17(dd,j＝8.9,1.4hz,1h)；esimsm/z287[m–h]^-。

步驟3.n-(1h-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(g4)：將化合物g3(0.779g，2.19mmol)在1m氯化氫的甲醇溶液(10ml)中的混懸液在環(huán)境溫度下攪拌4h。隨后，過濾混合物，將濾餅用甲醇(4×20ml)和水(2×20ml)洗滌，并在高真空和45℃下干燥，以得到呈灰白色固體的化合物g4(0.422g，86％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.50–11.10(brs,2h),11.71(s,1h),8.20(s,1h),7.97(d,j＝8.6hz,1h),7.41(d,j＝8.6hz,1h)；apcims,m/z287[m–h]^-。

實施例5：6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(三氟甲基亞磺酰氨基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(i5，式ic，參考圖9中所示的合成方案)

步驟1.n-(4-氨基苯基)-1,1,1-三氟甲磺酰胺(i2)：在0℃和氮氣下，向化合物i1(3.24g，30.0mmol)和三乙胺(4.55g，45.0mmol)在無水二氯甲烷(350ml)中的攪拌溶液經(jīng)1.5h逐滴添加(cf3so2)2o(8.46g，30.0mmol)在無水二氯甲烷(50ml)中的溶液。完成添加之后，將反應(yīng)物升溫至環(huán)境溫度，并攪拌18h。隨后，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷(300ml)稀釋，用飽和nahco3水溶液(300ml)洗滌，經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮。將殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用0％至10％meoh/ch2cl2洗脫，以得到呈黃色固體的化合物i2(2.35g，47％)：apcims，m/z241[m+h]⁺。

步驟2.(4-(三氟甲基亞磺酰氨基)苯基)氨基甲酸4-硝基苯酯(i3)：在0℃和氮氣下，向氯甲酸4-硝基苯酯(2.12g，10.5mmol)在無水thf(30ml)中的攪拌溶液經(jīng)10min逐滴添加化合物i2(2.40g，9.99mmol)和吡啶(1.19g，15.0mmol)在無水thf(20ml)和無水dmf(15ml)中的溶液。完成添加之后，將反應(yīng)物經(jīng)3h緩慢升溫至環(huán)境溫度，并在環(huán)境溫度下攪拌18h。隨后，將反應(yīng)混合物用etoac(150ml)稀釋，用鹽水(150ml)洗滌，經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮。將殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用10％至50％etoac/己烷洗脫，以得到呈黃色固體的化合物i3(2.35g，52％)：apcims，m/z404[m–h]^-。

步驟3.6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(三氟甲基亞磺酰氨基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺三乙胺鹽(i4)：在55℃和氮氣下，向巴比妥酸a5(0.590g，4.57mmol)在無水1,4-二噁烷(10ml)中的攪拌混懸液中添加三乙胺(0.460g，4.57mmol)。在55℃下攪拌20min之后，經(jīng)10min逐滴添加化合物i3(1.85g，4.57mmol)在無水1,4-二噁烷(10ml)中的溶液。完成添加之后，將混合物在85℃下加熱2h。隨后，過濾熱的混合物，將濾餅用1,4-二噁烷(2×10ml)洗滌，并在高真空下干燥，以得到呈白色固體的化合物i4(1.58g，70％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.44(s,1h),11.35–10.80(brs,2h),9.20–8.80(brs,1h),7.23(d,j＝8.8hz,2h),6.96(d,j＝8.8hz,2h),3.09(q,j＝7.3hz,6h),1.17(t,j＝7.3hz,9h)；apcims,m/z393[m–h]^-。

步驟4.6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(三氟甲基亞磺酰氨基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(i5，式ic)：將化合物i4(0.800g，0.436mmol)在1.25m氯化氫的甲醇溶液(10ml)中的混懸液在環(huán)境溫度下攪拌3h。隨后，將反應(yīng)混合物過濾，將濾餅用甲醇(3×10ml)和水(3×10ml)洗滌，并在高真空和45℃下干燥，以得到呈白色固體的化合物i5(0.203g，32％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.50–11.60(brs,3h),11.52(s,1h),7.58(d,j＝8.7hz,2h),7.28(d,j＝8.7hz,2h)；esims,m/z393[m–h]^-。

實施例6：6-羥基-n-(4-(甲基亞磺酰氨基)苯基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(k3，式(ib)，參考圖10中所示的合成方案).

步驟1.n-(4-氨基苯基)甲烷磺酰胺(k1).在0℃和氮氣下，向化合物i1(3.24g，30.0mmol)和三乙胺(4.55g，45.0mmol)在無水二氯甲烷(300ml)中的攪拌溶液經(jīng)1.5h逐滴添加ch3so2cl(3.44g，30.0mmol)在無水二氯甲烷(50ml)中的溶液。完成添加之后，將反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度，并攪拌18h。隨后，將反應(yīng)混合物用二氯甲烷(100ml)稀釋，用飽和nahco3水溶液(200ml)洗滌，經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮。將殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用0％至10％meoh/ch2cl2洗脫，以得到呈黃色固體的化合物k1(3.90g，70％)：apcims，m/z187[m+h]⁺。

步驟2和3.6-羥基-n-(4-(甲基亞磺酰氨基)苯基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(k3，式ib)：在0℃和氮氣下，向氯甲酸4-硝基苯酯(2.02g，10.0mmol)在無水thf(40ml)中的攪拌溶液經(jīng)15min逐滴添加化合物k1(1.86g，10.0mmol)和吡啶(1.03g，13.0mmol)在無水thf(15ml)和無水dmf(15ml)中的溶液。完成添加之后，將反應(yīng)物經(jīng)2h緩慢升溫至環(huán)境溫度，并在環(huán)境溫度下攪拌18h，以得到化合物k2在thf和dmf中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣下向巴比妥酸a5(1.29g，10.1mmol)在無水1,4-二噁烷(20ml)中的混懸液添加三乙胺(2.53g，25.0mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌10min。然后，向該混合物經(jīng)25min逐滴添加化合物k2在thf和dmf中的溶液。將所得到的混合物加熱至85℃，持續(xù)4.5h。冷卻至環(huán)境溫度之后，添加0.1n鹽酸(500ml)。將混合物攪拌20min并過濾。將濾餅用水(2×50ml)洗滌，并在高真空和50℃下干燥，以得到呈淺綠色固體的化合物k3(2.12g，62％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.30–11.60(brs,2h),11.46(s,1h),9.78(s,1h),7.50(d,j＝8.7hz,2h),7.23(d,j＝8.7hz,2h),2.99(s,3h)；apcims,m/z339[m–h]^-。

實施例7：6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-氨磺酰苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(n3，式ia，參考圖11中所示的合成方案).

步驟1和2.6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-氨磺酰苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(n3，式ia)：在環(huán)境溫度和氮氣下，向化合物c2(1.62g，10.0mmol)在無水1,4-二噁烷(30ml)中的溶液經(jīng)10min逐滴添加化合物n1(1.72g，10.0mmol)在無水1,4-二噁烷(30ml)中的溶液。然后將反應(yīng)混合物攪拌2.5h，以得到化合物n2在1,4-二噁烷中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣下向巴比妥酸a5(1.28g，10.0mmol)在無水1,4-二噁烷(30ml)中的混懸液添加三乙胺(1.02g，10.0mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌15min。然后，向該混合物經(jīng)30min逐滴添加化合物n2在1,4-二噁烷中的溶液。將所得到的混合物加熱至85℃，持續(xù)4.5h。隨后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，用0.1n鹽酸(500ml)稀釋，并過濾。將濾餅與1,4-二噁烷(150ml)混合并加熱至回流，持續(xù)1h。過濾熱的混懸液。將濾液冷卻至環(huán)境溫度，并且將沉淀通過真空過濾收集并在高真空和45℃下干燥，以得到呈灰白色固體的化合物n3(0.435g，13％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.20–11.60(brs,2h),11.70(s,1h),7.83(d,j＝8.7hz,2h),7.73(d,j＝8.7hz,2h),7.36(s,2h)；apcims,m/z325[m–h]^-。

實施例8：6-羥基-n-(4-羥基-3-(羥甲基)苯基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(d5，式id，參考圖12中所示的合成方案)。

步驟1.2-(羥甲基)-4-硝基苯酚(d2)：在0℃和氮氣下，向硼烷thf絡(luò)合物溶液(1m，10.9ml，10.9mmol)經(jīng)5min逐滴添加化合物d1(1.00g，5.46mmol)在無水thf(50ml)中的溶液。完成添加之后，將反應(yīng)混合物升溫至環(huán)境溫度，并攪拌18h。隨后，通過在0℃下緩慢添加1n鹽酸(25ml)猝滅反應(yīng)。將所得到的混合物在環(huán)境溫度下攪拌2h，然后用叔丁基甲基醚萃取(3×50ml)。將合并的萃取物經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮，以得到呈黃色固體的化合物d2(0.923g，定量)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.14(s,1h),8.21(d,j＝2.9hz,1h),8.03(dd,j＝8.9,3.0hz,1h),6.94(d,j＝8.9hz,1h),5.36(brs,1h),4.51(s,2h)。

步驟2：4-氨基-2-(羥甲基)苯酚(d3)：在環(huán)境溫度下，將化合物d2(0.494g，2.92mmol)和10％鈀碳(50％濕潤，0.200g)在乙醇(20ml)中的混懸液在1個大氣壓的氫氣下攪拌4h。隨后，將反應(yīng)混合物經(jīng)短的硅藻土墊過濾。將濾液在減壓下濃縮。將所得到的殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用0％至10％meoh/ch2cl2洗脫，以得到呈灰白色固體的化合物d3(0.256g，63％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ8.22(s,1h),6.58(d,j＝2.8hz,1h),8.03(d,j＝8.3hz,1h),6.27(dd,j＝8.3,2.8hz,1h),4.81(t,j＝5.7hz,1h),4.37(d,j＝5.7hz,2h),4.36(brs,2h)。

步驟3和4.6-羥基-n-(4-羥基-3-(羥甲基)苯基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(d5，式id)：在環(huán)境溫度和氮氣下，向化合物c2(0.175g，1.08mmol)在無水dmso(4ml)中的溶液添加化合物d3(0.100g，0.719mmol)。然后，將反應(yīng)混合物攪拌40min，以得到化合物d4在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣下向巴比妥酸a5(0.092g，0.719mmol)在無水1,4-二噁烷(2ml)中的混懸液添加三乙胺(0.073g，0.719mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌5min。然后，向該混合物添加化合物d4在dmso中的溶液。將所得到的混合物加熱至85℃，持續(xù)2h。冷卻至環(huán)境溫度之后，緩慢添加0.5n鹽酸(8ml)。將混合物攪拌1h并過濾。將濾餅用水(2×10ml)洗滌并真空干燥，以得到粗產(chǎn)物(0.107g)，其通過c-18反相柱色譜法進一步純化，用0％至60％乙腈/水洗脫，以得到呈灰白色固體的化合物d5(0.038g，18％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.50(brs,2h),11.39(s,1h),9.54(s,1h),7.39(d,j＝2.5hz,1h),7.22(dd,j＝8.6,2.7hz,1h),6.78(d,j＝8.6hz,1h),5.09(s,1h),4.47(s,2h)；esimsm/z292[m–h]^-。

實施例9：2-(4-(6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺基)苯基)乙酸的制備(圖13中顯示為c4，式ie，參考圖13中所示的合成方案)。

步驟1.2-(4-異氰酰苯基)乙酸叔丁酯(c2).在氮氣氣氛下，向c1(700mg，3.38mmol)在無水二氯甲烷(30ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(30ml)的冰冷溶液中，直接向二氯甲烷層添加三光氣(401mg，1.35mmol)在無水二氯甲烷(5ml)中的溶液。完成添加之后，繼續(xù)在0℃下攪拌1h。隨后，在減壓下濃縮有機層，以得到呈棕色油狀物的化合物c2(859mg，定量)：¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.23–7.20(m,2h),7.05–7.02(m,2h),3.49(s,2h),1.43(s,9h)。

步驟2.2-(4-(6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯三乙胺鹽(c3).在55℃和氮氣氣氛下，向巴比妥酸a5(423mg，3.30mmol)在無水1,4-二噁烷(8ml)中的混懸液添加三乙胺(0.46ml，3.3mmol)。30min之后，經(jīng)15min逐滴添加化合物c2(770mg，3.30mmol)在無水1,4-二噁烷(5ml)中的溶液。將所得到的混合物加熱至80℃，持續(xù)3h。將固體通過真空過濾從熱的反應(yīng)混合物收集，用1,4-二噁烷(10ml)、甲醇(1ml)、乙腈(5ml)沖洗并干燥，以得到呈灰白色固體的化合物c3(425mg，30％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ11.94(s,1h),9.55(brs,2h),7.44(dd,j＝6.5,1.5hz,2h),7.08(d,j＝8.5hz,2h),3.07–3.05(m,6h),1.39(s,9h),1.16(t,j＝7.5hz,9h)。

步驟3.2-(4-(6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺基)苯基)乙酸(c4，rlbn1040，式ie).將化合物c3(425mg，1.18mmol)在tfa(5ml)中的混懸液在環(huán)境溫度下攪拌2h。隨后，向白色漿液添加乙腈(5ml)，并通過真空過濾收集固體。用水(10ml)和乙腈(10ml)洗滌濾餅。將固體在高真空和50℃下干燥，以得到呈白色固體的化合物c4(257mg，71％)：¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.32(brs,1h),12.00(brs,1h),11.50(s,1h),11.35(brs,1h),7.46(dd,j＝6.5,2.0hz,2h),7.28(d,j＝8.5hz,2h),3.57(s,2h)；esims,m/z304[m–h]^–。

實施例10：n-(4-(1h-咪唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(圖14中顯示為d4，式iid，參考圖14中所示的合成方案)。

步驟1和2.n-(4-(1h-咪唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺咪唑鹽(d3).在0–5℃和氮氣氣氛下，向化合物d1(515mg，3.24mmol)在無水dmso(3ml)中的攪拌溶液一次性添加1,1'-羰基二咪唑(162mg，3.56mmol)。然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌1.25h，以得到化合物d2在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣下向巴比妥酸a5(415mg，3.24mmol)在無水1,4-二噁烷(10ml)中的混懸液添加三乙胺(0.44ml，3.24mmol)。25min之后，經(jīng)0.5h逐滴添加化合物d2在dmso中的溶液。將反應(yīng)混合物加熱至80℃，持續(xù)3h。通過真空過濾趁熱收集所得到的固體。將濾餅用溫?zé)岬?,4-二噁烷(4×25ml)、甲醇(3×20ml)洗滌并真空干燥，以得到呈棕褐色/粉色固體的粗品d3(681mg，56％)，該粗品未經(jīng)進一步純化即用于下一步：esimsm/z312[m–h]^–。

步驟3.n-(4-(1h-咪唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(d4，rlbn1041，式iid).將化合物d3(400mg，1.05mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(4ml)中的混懸液加熱至95℃，持續(xù)1h。隨后，過濾反應(yīng)混合物，將濾餅用溫?zé)岬膎,n-二甲基甲酰胺(2×5ml)、甲醇(2×10ml)、水(3×5ml)洗滌，并在真空下干燥。將固體懸浮于0.25nhcl(100ml)中并加熱至90℃，持續(xù)2h。隨后，將反應(yīng)混合物趁熱過濾，并用水(2×15ml)洗滌。將固體在高真空和50℃下干燥，以得到呈灰白色固體的化合物d4(136mg，41％)：¹hnmr(300mhz,tfa-d)δ8.81(s,1h),7.82–7.74(m,4h),7.71(s,1h)；esims,m/z314[m+h]⁺。

實施例11：n-(4-(1h-1,2,3-三唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(圖15中顯示為e6，式iie，參考圖15中所示的合成方案)。

步驟1.5-(4-硝基苯基)-1h-1,2,3-三唑(e2).在氬氣氣氛下，向e1(1.00g，6.80mmol)在n,n-二甲基甲酰胺/甲醇(9:1，14ml)中的攪拌溶液添加碘化銅(i)(650mg，3.41mmol)和疊氮基三甲基硅烷(1.4ml，10mmol)。將黃色混懸液加熱至100℃，持續(xù)3.5h。隨后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度并且在減壓下濃縮。將殘余物用乙酸乙酯研磨，并通過真空過濾收集固體。將殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用5–50％乙酸乙酯/己烷洗脫，以得到呈淡黃色固體的化合物e2(900mg，70％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ15.45(brs,1h),8.65(brs,1h),8.34–8.31(m,2h),8.17–8.14(m,2h)。

步驟2.5-(4-硝基苯基)-1h-1,2,3-三唑-1-甲酸叔丁酯(e3).向化合物e2(490mg，2.58mmol)在1,4-二噁烷(5ml)和1nnaoh(2ml)中的攪拌溶液添加二碳酸二叔丁酯(619mg，2.84mmol)。攪拌過夜之后，將反應(yīng)混合物用2nhcl調(diào)至ph＝6，并用乙酸乙酯萃取。將有機層用水、鹽水洗滌，經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮，以得到呈淡黃色固體的e3(657mg，88％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ8.86(s,1h),8.40–8.33(m,2h),8.30–8.23(m,2h),1.65(s,9h)。

步驟3.4-(1i-1,2,3-三唑-5-基)苯胺(e4).將e4(655mg，2.26mmol)在乙醇(60ml)中的混懸液加熱至70℃。向所得到的金色溶液中添加氯化錫(ii)(1.70g，9.03mmol)。將反應(yīng)混合物在70℃下攪拌1h。隨后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度并且在減壓下濃縮。將殘余物用乙酸乙酯(75ml)稀釋，并傾入5％nahco3水溶液中。形成膠狀固體，并通過過濾除去。將有機層分離，并在減壓下濃縮。將殘余物通過快速柱色譜在硅膠上純化，用5–20％甲醇/二氯甲烷洗脫，以得到呈黃色固體的化合物e4(234mg，40％)：¹hnmr(500mhz,cd3od)δ7.92(brs,1h),7.53(brs,2h),6.76(d,j＝8.5hz,2h)。

步驟4和5.n-(4-(1h-1,2,3-三唑-5-基)苯基)-6-羥基-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(e6，rlbn1042，式iie).在氮氣氣氛下，向化合物e4(75mg，0.47mmol)在無水dmso(0.5ml)中的攪拌溶液一次性添加1,1'-羰基二咪唑(114mg，0.703mmol)。然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌20min，以得到化合物e5在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣氣氛下，向巴比妥酸a5(60mg，0.47mmol)在無水1,4-二噁烷(1.5ml)中的混懸液添加三乙胺(66μl，0.73mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌15min。然后，向該混合物添加化合物e5在dmso中的溶液。將所得到的混合物加熱至80℃，持續(xù)0.5h。隨后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并添加0.5nhcl(4ml)。通過真空過濾收集所得到的固體。將固體用甲醇研磨，并通過真空過濾再次收集。然后將固體在水(2ml)和1nhcl(0.25ml)中在50℃下攪拌0.5h。隨后，將固體收集，用水和乙腈沖洗。將固體在50℃下真空干燥，以得到呈灰白色固體的e6(74mg，50％)：¹hnmr(500mhz,tfa-d)δ8.69(s,1h),7.98–7.85(m,4h)；esimsm/z313[m–h]^–。

實施例12：6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(圖16中顯示為f7，式if，參考圖16中所示的合成方案).

步驟1.(4-氰基苯基)甲酸叔丁酯(f2).在40℃下向攪拌的二碳酸二叔丁酯(6.8g，31mmol)添加化合物f1(3.5g，29mmol)。將反應(yīng)混合物加熱至85℃，持續(xù)2.5h。隨后，添加另外的二碳酸二叔丁酯(950mg，4.3mmol)，并且持續(xù)加熱4h。將物質(zhì)通過快速柱色譜在硅膠上純化，用0–25％乙酸乙酯/己烷洗脫，以得到呈白色固體的化合物f2(4.3g，68％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ9.87(s,1h),7.72–7.69(m,2h),7.64–7.61(m,2h),1.49(s,9h)。

步驟2.(4-(n'-羥基甲脒基)苯基)甲酸叔丁酯(f3).向鹽酸羥胺(6.90g，98.6mmol)在dmso(30ml)中的溶液添加三乙胺(13.7ml，98.6mmol)。將所得到的固體通過過濾除去，并用四氫呋喃沖洗。將濾液在減壓下濃縮以除去四氫呋喃。向其中添加于dmso(20ml)中的f2(4.30g，19.7mmol)，并將溶液在氮氣氣氛下加熱至75℃。3.5h之后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度并用水(50ml)稀釋。將混合物用乙酸乙酯(25ml)萃取，并將有機層用1nhcl(30ml)萃取。將水層用1nnaoh堿化至ph＝10，并用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。將合并的有機萃取物用水(20ml)、鹽水(20ml)洗滌，經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮，以得到呈灰白色固體的化合物f3(3.5g，70％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ9.45(s,1h),9.42(s,1h),7.56–7.53(m,2h),7.43(d,j＝8.5hz,2h),5.68(s,2h),1.47(s,9h)。

步驟3.(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)甲酸叔丁酯(f4).在氮氣氣氛下，將f3(1.0g，4.0mmol)和吡啶(0.35ml，4.4mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(8ml)中的溶液在冰/水浴中冷卻。向其中逐滴添加氯甲酸2-乙基己酯(0.78ml，4.0mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌40min。隨后，通過添加水(20ml)猝滅反應(yīng)混合物。將混合物用乙酸乙酯(30ml)萃取。將有機層用鹽水(10ml)洗滌，經(jīng)無水na2so4干燥，過濾，并在減壓下濃縮。向殘余物添加二甲苯(10ml)，并將混合物加熱至回流。45min之后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度。將所得到的固體通過真空過濾收集，用二氯甲烷沖洗，并干燥以提供呈灰白色固體的化合物f4(688mg，62％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ12.78(brs,1h),9.75(s,1h),7.71–7.68(m,2h),7.62(d,j＝8.5hz,2h),1.49(s,9h)。

步驟4.3-(4-氨基苯基)-1,2,4-噁二唑-5(4i)-酮鹽酸鹽(f5)。將化合物f4溶解于1nhcl的甲醇溶液(15ml)和4nhcl的1,4-二噁烷溶液(15ml)，并加熱至50℃。0.5h之后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度并在減壓下濃縮。將殘余物用二氯甲烷研磨，并通過真空過濾收集固體。將固體在50℃下真空干燥，以得到呈淺橙色固體的f5(1.1g，84％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ12.49(s,1h),7.48–7.45(m,2h),6.65(d,j＝8.5hz,2h),4.7(brs,2h)。

步驟5和6.6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(f7，rlbn1043，式if).在氮氣氣氛下，向1,1'-羰基二咪唑(213mg，1.31mmol)和咪唑(7.0mg，0.094mmol)在dmso(1ml)中的攪拌溶液經(jīng)15min逐滴添加于無水dmso(1ml)中的化合物f5(200mg，0.94mmol)。然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌10min，以得到化合物f6在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣氣氛下，向巴比妥酸a5(120mg，0.94mmol)在無水1,4-二噁烷(3ml)中的混懸液添加三乙胺(0.13ml，0.94mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌10min。然后，向該混合物經(jīng)25min逐滴添加化合物f6在dmso中的溶液。將所得到的混合物加熱至80℃，持續(xù)45min。隨后，在混懸液仍然熱的時候通過真空過濾收集固體。將固體用1,4-二噁烷(5ml)、甲醇(2ml)和乙腈(10ml)沖洗。將固體在0.5nhcl(30ml)中加熱至80℃，然后在混懸液仍然熱的時候收集固體。將固體用水沖洗，然后在50℃下真空干燥，以得到呈淡黃色固體的f7(151mg，48％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ12.92(brs,1h),11.73(s,1h),7.84–7.82(m,2h),7.77–7.74(m,2h)；esimsm/z330[m–h]^–。

實施例13：6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫異噁唑-3-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(圖17中顯示為g5，式ih，參考圖17中所示的合成方案)。

步驟1.6-羥基-5-(1h-咪唑-1-羰基)嘧啶-2,4(1h,3h)-二酮(g1)。將a5(500mg，3.90mmol)、1,1'-羰基二咪唑(633mg，3.90mmol)和咪唑(25mg，0.39mmol)在乙腈(10ml)中的混合物在密封管中加熱至85℃。4h之后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度。將沉淀通過真空過濾收集，并用乙腈沖洗。將固體真空干燥，以得到呈黃色固體的g1(985mg)，其不經(jīng)進一步純化即使用。(樣品溶解于甲醇中，lc-ms分析顯示對應(yīng)于甲酯的esimsm/z185[m–h]^–峰。)

步驟2.3-(4-氨基苯基)-3-氧代丙酸乙酯(g3).將化合物g2(3.50g，14.8mmol)和10％鈀碳(50％濕潤，350mg)在乙酸乙酯(80ml)中的混懸液在1個大氣壓的氫氣和環(huán)境溫度下攪拌1.5h。隨后，將反應(yīng)混合物經(jīng)短的硅藻土墊過濾，并將濾液在減壓下濃縮。將物質(zhì)通過快速柱色譜在硅膠上純化，用5–50％乙酸乙酯/己烷洗脫，以得到呈白色固體的化合物g3(889mg，30％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ7.65–7.63(m,2h),6.57–6.54(m,2h),6.16(s,2h),3.92(s,2h),4.09(q,j＝7.0hz,2h),1.18–1.13(m,3h)。

步驟3.3-(4-氨基苯基)異噁唑-5(2h)-酮(g4).將g3(1.30g，6.27mmol)和鹽酸羥胺(1.30g，18.8mmol)在水(7ml)和乙醇(7ml)中的混合物加熱至100℃。0.5h之后，將反應(yīng)混合物在冰/水浴中冷卻。通過真空過濾收集所得到的固體，以得到呈淡黃色固體的g4(254mg，23％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6，對映異構(gòu)體的混合物)δ12.25(brs,0.5h),7.38(m,2h),6.62–6.59(m,2h),5.85(brs,2h),5.43(s,0.5h),417(s,1h)。

步驟4.6-羥基-2,4-二氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫異噁唑-3-基)苯基)-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(g5，rlbn1044，式ih).在密封管中合并1,4-二噁烷中的g1(425mg，1.91mmol，純度約30％)和g4(75mg，0.43mmol)。將黃色漿液在85℃下加熱1h，然后冷卻至環(huán)境溫度。將固體通過真空過濾收集，并用1,4-二噁烷沖洗。接下來，將固體用0.5nhcl(20ml)在85℃下研磨，并在漿液仍然熱的時候收集固體。將固體用溫水沖洗，然后在50℃下真空干燥，以得到呈黃色固體的g5(33mg，23％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6，互變異構(gòu)體的混合物)δ12.05(brs,1h),11.70–11.35(m,1.6h),7.78–7.69(m,4h),5.72(s,0.55h),4.31(s,0.85h)；esimsm/z329[m–h]^–。

實施例14：6-羥基-4-氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(圖18中顯示為h2，式ig，參考圖18中所示的合成方案).

步驟1和2.6-羥基-4-氧代-n-(4-(5-氧代-4,5-二氫-1,2,4-噁二唑-3-基)苯基)-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(h2，rlbn1045，式ig).在氮氣氣氛下，向1,1'-羰基二咪唑(298mg，1.84mmol)和咪唑(9.0mg，0.13mmol)在dmso(1ml)中的攪拌溶液中，經(jīng)15min逐滴添加于無水dmso(1ml)中的化合物f5(280mg，1.31mmol)。然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌10min，以得到化合物f6在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣氣氛下，向6-羥基-2-硫代-2,3-二氫嘧啶-4(1h)-酮h1(189mg，1.31mmol)在無水1,4-二噁烷(3ml)中的混懸液添加三乙胺(0.18ml，1.3mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌20min。然后，向該混合物經(jīng)25min逐滴添加化合物f6在dmso中的溶液。添加另外的1,4-二噁烷(4ml)，并將所得到的混合物加熱至85℃，持續(xù)1.5h。隨后，在混懸液仍然熱的時候通過真空過濾收集固體。將固體用1,4-二噁烷(5ml)、甲醇(2ml)和乙腈(10ml)沖洗。將固體在0.25nhcl(15ml)中加熱至80℃，然后在混懸液仍然熱的時候收集固體。將固體用水(10ml)沖洗，然后在50℃下真空干燥，以得到呈灰白色固體的h2(113mg，25％)：¹hnmr(500mhz,dmso-d6)δ12.92(brs,1h),11.64(s,1h),7.84–7.82(m,2h),7.79–7.76(m,2h)；esimsm/z346[m–h]^–。

實施例15：n-(4-(1h-1,2,3-三唑-5-基)苯基)-6-羥基-4-氧代-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺的制備(圖19中顯示為i1，式iif，參考圖19中所示的合成方案)。

步驟1和2.n-(4-(1h-1,2,3-三唑-5-基)苯基)-6-羥基-4-氧代-2-硫代-1,2,3,4-四氫嘧啶-5-甲酰胺(i1，rlbn1046，式iif).在氮氣氣氛下，向1,1'-羰基二咪唑(191mg，1.18mmol)和咪唑(6.0mg，0.084mmol)在dmso(1ml)中的攪拌溶液經(jīng)10min逐滴添加于無水dmso(1ml)中的化合物e4(135mg，0.842mmol)。然后將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌10min，以得到化合物e5在dmso中的溶液，將該溶液直接用于后續(xù)步驟。

在單獨的燒瓶中，在55℃和氮氣氣氛下，向6-羥基-2-硫代-2,3-二氫嘧啶-4(1h)-酮h1(121mg，0.839mmol)在無水1,4-二噁烷(3ml)中的混懸液添加三乙胺(0.12ml，0.84mmol)。完成添加之后，將混合物攪拌20min。然后，向該混合物經(jīng)20min逐滴添加化合物e5在dmso中的溶液。將所得到的混合物加熱至80℃，持續(xù)0.5h。隨后，將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，并在減壓下濃縮以除去1,4-二噁烷。將所得到的溶液逐滴添加至快速攪拌著的0.5nhcl(80ml)。然后將固體在水(2ml)和1nhcl(0.25ml)中在50℃下攪拌0.5h。將固體收集，用水(20ml)和乙腈(20ml)沖洗。將固體在85℃和0.25nhcl中研磨，并在混懸液仍然熱的時候通過真空過濾收集固體。將固體用水沖洗，然后在50℃下真空干燥，以得到呈灰白色固體的i1(44mg，30％)：¹hnmr(500mhz,tfa-d)δ8.84(s,1h),8.14–8.01(m,4h)；esimsm/z329[m–h]^–。

實施例16：生物活性測定.

在兩種測定中評價具有由式(i)、式(ii)和式(iii)表示的結(jié)構(gòu)的化合物的生物活性：黃嘌呤氧化酶活性和urat1活性。

對黃嘌呤氧化酶活性的標(biāo)準(zhǔn)基于熒光的測定(mchalea，grimesh,coughlanmp:intjbiochem.10:317-9,1979)略作修改，用來測定黃嘌呤氧化酶抑制。測定別嘌醇和dpi的最佳抑制濃度之后將它們用作所有實驗的對照，將該程序內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)化。在多孔平板中，使用3倍稀釋范圍內(nèi)10個濃度的每種化合物以一式三份對測試化合物進行實驗。

在細胞攝取測定中，使用含穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的urat-1/cho細胞的96孔平板評價urat1(slc22a12)活性。使用³h-乳清酸鹽作為測試轉(zhuǎn)運劑，在液體閃爍計數(shù)儀中對其進行測量，使用苯溴馬隆作為陽性對照，并使用dmso和未轉(zhuǎn)染的cho細胞作為陰性對照(solvobiotechnology,boston,ma)。一般對7個濃度(0.01至150μm范圍)進行測定，生成半對數(shù)圖(乳清酸鹽的相對轉(zhuǎn)運百分比對比時間)以測定觀察到50％抑制的濃度(即，ic50)。

這些測定的結(jié)果顯示于下表：

呈現(xiàn)估計值；proc.eular摘要#thu0357，2008

^*如本文所述的urat1測定

除了式(id)之外，式(i)化合物是相對較弱的xo抑制劑，因此未針對urat1進行測試，因為此類化合物不可視為非常有效的雙功能抑制劑。然而，式(id)被證明是非常有效的雙功能化合物，以低于10μm的ic50抑制urat1和xo兩者。相比之下，大多數(shù)式ii和式iii化合物(除了式(iic)之外)顯示為xo和urat1的有效的雙功能抑制劑。

式(ig)和式(if)化合物結(jié)構(gòu)的差別分別僅僅在于c2處的硫和氧部分。式(ig)化合物是弱的urat1抑制劑和可接受的xo抑制劑，但是式(if)化合物針對兩種靶都是活性的。這表明，與麥爾巴隆一樣，含硫化合物可被代謝為雙功能含氧化合物。

式(iif)和式(iie)化合物(分別為c2硫和氧)特別有效，以納摩爾濃度抑制xo和urat1。這些化合物針對urat1比雷西納得有效2至30倍，且比別嘌醇有效3至50倍。式(iif)化合物的xo抑制與非布索坦相當(dāng)，且urat1抑制與苯溴馬隆相當(dāng)。

如本文所定義，盡管大多數(shù)式ii和iii化合物是有效的，但對每個酶抑制的相對可變性不同。該可變性允許智能選擇展現(xiàn)出對一種或另一種酶靶更高或更低抑制的藥學(xué)上可接受的產(chǎn)品。例如，xo的更大抑制可視為對于主要代謝缺陷是尿酸過量產(chǎn)生的患者是優(yōu)選的。相反，urat1的更大抑制可視為對于主要代謝缺陷是尿酸排泄不足的患者是優(yōu)選的。然而，應(yīng)注意，幾乎所有高尿酸血癥患者均將受益于血清尿酸降低，并且雙功能化合物預(yù)計在此類患者中可以產(chǎn)生有益效應(yīng)。從業(yè)人員在本公開指導(dǎo)下將能夠基于該領(lǐng)域的技術(shù)水平選擇適于特殊用途的特定化合物。

相比之下，別嘌醇具有對于xo來說在約2.0至約5.0μm范圍內(nèi)的ic50以及對于urat1來說>300μm的ic50。雷西納得具有對于xo來說>300μm的ic50，以及對于urat1來說在18至53μm范圍內(nèi)的ic50。因此，這些化合物均不可被視為雙功能，因為兩者均為影響尿酸的產(chǎn)生或排泄的僅僅一種酶的選擇性抑制劑。相比之下，本發(fā)明的化合物不僅是雙功能的，而且多個化合物實質(zhì)上是xo和urat1的更有效的抑制劑。

盡管在很多臨床情況下，需要用對xo和urat1兩者都非常有效的藥物治療高尿酸血癥，還可以設(shè)想本發(fā)明的特定化合物用于治療高尿酸血癥的選擇可基于所治療的高尿酸血癥患者的表型(即，尿酸過量產(chǎn)生和尿酸排泄不足對于患者特定疾病的相對貢獻)。當(dāng)尿酸過量產(chǎn)生占優(yōu)勢時，使用實質(zhì)上對xo比urat1更有效的根據(jù)本發(fā)明的化合物可能是適合的(例如，式(iia))。當(dāng)尿酸的排泄不足占優(yōu)勢時，使用實質(zhì)上對urat1比xo更有效的根據(jù)本發(fā)明的化合物可能是適合的(例如，式(iiia)。盡管尚未完全理解這兩種途徑的遺傳學(xué)，測定兩者各自對特定患者高尿酸血癥貢獻程度的化學(xué)測試已經(jīng)公開，并且預(yù)計可用于測定患者的疾病表型以便選擇適合的藥物。

雖然已經(jīng)參考特定實施方案描述了本發(fā)明，但是應(yīng)理解這些實施方案僅僅是為了說明本發(fā)明的原理和應(yīng)用。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員將顯而易見，可對本發(fā)明的方法和裝置做出各種修改和變化而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。因此，本發(fā)明意在包括在所附權(quán)利要求及其等同物的范圍之內(nèi)的修改和變化。