本實用新型涉及一種試劑盒，具體為一種斑馬魚“基因組編輯”載體構建的試劑盒，屬于生物技術領域。

背景技術：

基因組編輯(Genome Editing)技術是利用核酸酶與RNA核酸序列對生物體基因組進行剪切的技術，包括第一代的ZFN鋅指酶技術，第二代的TALEN技術，以及第三代的CRISPR Cas9技術。目前第三代的CRISPR Cas9技術已經成為基因組編輯的主流技術。

CRISPR Cas9是細菌(Bacteria)與古細菌(archaea)中免疫系統(tǒng)的重要組成部分，主要包含具有DNA酶活性的Cas9蛋白，以及CrRNA與TracrRNA，能夠結合并剪切外源噬菌體的DNA。利用經序列優(yōu)化過的Cas9酶以及改造過SgRNA(兼具CrRNA與TracrRNA功能)，可以對斑馬魚的基因組進行定點的基因敲除或基因敲入(基因敲入時需提供供體)。CRISPR Cas9技術可以快速高效地編輯斑馬魚基因組，在基因功能研究、疾病模型構建、基因治療、生物遺傳育種等諸多方面具有重要的應用價值。

技術實現要素：

本實用新型要解決的技術問題是克服現有的缺陷，提供一種斑馬魚“基因組編輯”載體構建的試劑盒。

為了解決上述技術問題，本實用新型提供了如下的技術方案：

本實用新型提供一種斑馬魚“基因組編輯”載體構建的試劑盒，包括第一EP管、凹槽、本體、第二EP管、第三EP管、第四EP管、襯墊和容器孔，所述本體上部設有四個所述凹槽，四個所述凹槽內部分別設有所述第一EP管、所述第二EP管、所述第三EP管和所述第四EP管，內壁底部均設有所述襯墊，所述襯墊上設有所述容器孔，所述第一EP管、所述第二EP管、所述第三EP管和所述第四EP管內部分別裝有pHMG-SgRNAz線性化質粒、pHMG-SgRNAz測序引物、 pHMG-SgRNAzG的參照質粒和pHMG-Cas9z線性化質粒。

作為本實用新型的一種優(yōu)選技術方案，所述容器孔設置有4個，且分別均勻排布在四個所述襯墊上。

作為本實用新型的一種優(yōu)選技術方案，所述襯墊和所述凹槽螺栓連接。

本實用新型所達到的有益效果是：該種斑馬魚“基因組編輯”載體構建的試劑盒，通過第一EP管、第二EP管、第三EP管和第四EP管，能夠使得對斑馬魚基因組進行編輯工作變得更加簡易高效。用戶只需要根據目的基因設計合成SgRNA序列，經簡單克隆后即可獲得表達SgRNA的載體，能夠對目的基因進行定點基因組編輯。

附圖說明

附圖用來提供對本實用新型的進一步理解，并且構成說明書的一部分，與本實用新型的實施例一起用于解釋本實用新型，并不構成對本實用新型的限制。

在附圖中：

圖1是本實用新型的整體結構示意圖；

圖中標號：1、第一EP管；2、凹槽；3、本體；4、第二EP管；5、第三EP管；6、第四EP管；7、襯墊；8、容器孔。

具體實施方式

以下結合附圖對本實用新型的優(yōu)選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優(yōu)選實施例僅用于說明和解釋本實用新型，并不用于限定本實用新型。

實施例：如圖1所示，本實用新型提供一種斑馬魚“基因組編輯”載體構建的試劑盒，包括第一EP管1、凹槽2、本體3、第二EP管4、第三EP管5、第四EP管6、襯墊7和容器孔8，本體3上部設有四個凹槽2，四個凹槽2內部分別設有第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6，內壁底部均設有襯墊7，襯墊7上設有容器孔8，通過第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6，能夠使得對斑馬魚基因組進行編輯工作變得更加簡易高效。用戶只需要根據目的基因設計合成SgRNA序列，經簡單克隆后即可獲得表達SgRNA的載體，能夠對目的基因進行定點基因組編輯。第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6內部分別裝有pHMG-SgRNAz線性化質粒、pHMG-SgRNAz測序引物、pHMG-SgRNAzG的參照質粒和pHMG-Cas9z線性化質粒，可快速獲得表 達SgRNA的載體，能夠對目的基因進行定點基因組編輯。

容器孔8設置有4個，且分別均勻排布在四個襯墊7上，保證試劑盒的整體美觀，而且方便操作。

襯墊7和凹槽2螺栓連接，使襯墊7更牢固穩(wěn)定。

本實用新型在使用時，第一EP黃1的pHMG-SgRNAz線性化質粒的濃度為0.5μg/μl，共20μl，第二EP管4的pHMG-SgRNAzGFP的參照質粒的濃度為0.5μg/μl，共20μl，第三EP管5的pHMG-SgRNAz測序引物為10μM，共20μl，第四EP管6的pHMG-Cas9z線性化質粒的濃度為0.5μg/μl，共20μl，經過反應和一些加熱冷卻措施后，可獲得表達SgRNA的載體，能夠對目的基因進行定點基因組編輯以及測序鑒定插入片段是否正確。

該種斑馬魚“基因組編輯”載體構建的試劑盒，通過第一EP管1、第二EP管4、第三EP管5和第四EP管6，能夠使得對斑馬魚基因組進行編輯工作變得更加簡易高效。用戶只需要根據目的基因設計合成SgRNA序列，經簡單克隆后即可獲得表達SgRNA的載體，能夠對目的基因進行定點基因組編輯。

最后應說明的是：以上所述僅為本實用新型的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本實用新型，盡管參照前述實施例對本實用新型進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本實用新型的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本實用新型的保護范圍之內。