1.一種高產(chǎn)耐熱蛋白酶及蟲草素的蛹蟲草菌株篩選及誘變方法，該方法包括：
（1）將野生蛹蟲草的一小塊子座置于蟲草活化固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)至產(chǎn)生菌絲；
（2）將菌絲轉(zhuǎn)接到新的PDA斜面培養(yǎng)基上，長出新的菌株，將菌株轉(zhuǎn)接到蛋白酶篩選固體培養(yǎng)基上24~28℃靜置培養(yǎng)3~4天，得到產(chǎn)生水解圈的純化蛹蟲草菌株；
（3）將步驟（2）中的純化蛹蟲草菌株進行出草試驗得到蟲草含量較高的菌株；
（4）將步驟（3）中的蟲草含量較高的菌株進行誘變，通過篩選得到一株蟲草素含量和蛋白酶活力較高的蛹蟲草菌株。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，步驟（1）中的野生蛹蟲草為2015年8月在山東省沂南縣沂蒙山采集野生蛹蟲草，采集地為土質(zhì)疏松、腐殖質(zhì)豐富的樹林中，環(huán)境溫度20~28℃，空氣濕度為70~80%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，步驟（3）中的出草試驗先通過罐頭瓶接種，罐頭瓶中裝有40~50g大米、80~120ml營養(yǎng)液，然后將罐頭瓶置于人工氣候箱中培養(yǎng)，23~26℃下先進行暗培養(yǎng)7～15天，待菌絲長滿培養(yǎng)基后，在罐頭瓶封口膜上打通通氣孔并轉(zhuǎn)入光照培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度調(diào)整為16~22℃，光照強度為：300～500Lux，空氣相對濕度60～80％，培養(yǎng)40～60天，待子實體不再生長，表面形成粒狀子囊殼、即子座成熟。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，步驟（4）中的誘變方法包括：
步驟1菌株活化培養(yǎng)
將蟲草含量較高的菌株到PDA固體斜面培養(yǎng)基進行活化培養(yǎng)，25-28℃恒溫靜置培養(yǎng)4～5天，按照如上方法菌株活化2次；
步驟2菌株菌絲體制備
從活化好的菌絲固體平板培養(yǎng)基上取1cm2菌絲塊接種到裝有40 mL PDA菌絲培養(yǎng)基的250mL錐形瓶中，24-28℃，160-200 r/min進行恒溫搖床震蕩培養(yǎng)3～7天；
菌絲液體培養(yǎng)基配方：葡萄糖20～30g、蛋白胨5～8g、20%馬鈴薯浸出液200ml，(NH4)2S04 3～5g、KH2P04 1～2g、MgS04?7H20 1～2g、酵母粉4～6g，加水定容至lL，pH 6.5～7.0，121℃滅菌20min；
步驟3原生質(zhì)體亞硝基胍（NTG）與紫外線復合誘變
原生質(zhì)體的制備：將MgS04?7H20、甘露醇溶解于雙蒸水中并配制成濃度為0.6 mol/L的滲透壓穩(wěn)定劑溶液，高壓滅菌后備用，以0.6mol/L的滲透壓穩(wěn)定劑配制濃度分別為0.5~0.6%和0.8~1.2%(W/V)的蝸牛酶及纖維素酶溶液，并用0.22nm微孔濾膜過濾，按照2:1的體積比混合備用，用滲透壓穩(wěn)定溶液將無菌濾紙過濾后的菌絲體洗滌3次，按照每100mg制備好的濕菌絲對應(yīng)加入1~1.5mL混合酶液的比例，向菌絲體中加入酶液并置于25~28℃搖床上50r/min緩緩震蕩孵育3~6h，酶解后用無菌棉花柱過濾除去菌絲，濾液3000~4000r/min離心5~8min，溫和地沉淀原生質(zhì)體，棄去上清，將原生質(zhì)體懸于滲透壓穩(wěn)定劑中并適當稀釋備用，原生質(zhì)體亞硝基胍（NTG）與紫外線復合誘變：用丙酮試劑將亞硝基胍溶液配制成終濃度為1~2 mg/mL，取1 mL NTG處理液與稀釋成一定濃度的1 mL原生質(zhì)體懸液混合，于旋轉(zhuǎn)式搖床，轉(zhuǎn)速50~80r/min，26℃處理10~60min后，將處理液3000~4000r/min離心5~10min，棄去上清，用pH6.5，0.1 mol/L的無菌磷酸緩沖液洗滌菌體2~3次，終止反應(yīng)，然后將洗滌后的原生質(zhì)體稀釋后取懸浮液4mL在30W紫外燈下，照射距離30cm條件下，緩緩磁力攪拌下照射20s~60s，接著原生質(zhì)體再生培養(yǎng)；
步驟4原生質(zhì)體再生培養(yǎng)
將經(jīng)亞硝基胍和紫外線誘變后的生長較快的菌落再次接到新的原生質(zhì)體再生培養(yǎng)基上，相同條件下培養(yǎng)，得到第一代誘變菌株，按照以上條件培養(yǎng)三次，得到第三代誘變菌株，將獲得的第三代菌株接到蛋白酶篩選固體培養(yǎng)基上，25～28℃，培養(yǎng)3～7天，挑選水解圈大菌株保藏，進一步復篩；
其中，原生質(zhì)體再生培養(yǎng)基配方為：20%的馬鈴薯浸提液200ml，葡萄糖20～30g，蛋白胨4～8g，酵母粉4～6g，KH2P04 1-～2g，MgS04?7H20 0.5～1g，瓊脂粉15g，維生素B1 0.02g，補充去離子水至1000 mL，pH6.5～7.0，121℃滅菌20min；培養(yǎng)條件為：25～28℃避光恒溫培養(yǎng)5-8d；
步驟5發(fā)酵復篩培養(yǎng)
將步驟4中再生培養(yǎng)基上的菌株接種到裝有30～50mL液體種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，24～28℃ 160～200r/min搖床震蕩培養(yǎng)3～6天；然后按照6～10%的接種量以上培養(yǎng)好的種子液到裝有100～200ml液體發(fā)酵培養(yǎng)基的1000ml三角瓶中；溫度為26～32℃，搖床轉(zhuǎn)速調(diào)整為180～210 r/min，發(fā)酵3~5天，通過篩選得到一株蟲草素含量和蛋白酶活力較高的菌株；
液體種子培養(yǎng)基配方：20%的馬鈴薯浸提液200ml，葡萄糖20～30g，蛋白胨4～8g，酵母粉4～6g，KH2P04 1～2g，MgS04?7H20 0.5～1g，補充去離子水至1000 mL，pH6.5～7.0，121℃滅菌20min；
液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方：可溶性淀粉20～30g、葡萄糖10～20g、大豆蛋白胨10-～15、硫酸銨5～8g、酵母提取物5-～8g、KH2P04 1～2g、MgS04?7H20 0.5～1g、ZnS04?7H20 0.05～0.1 g、FeS04?7H20 0.02～0.05g、VB1 0.1～0.5g，加水定容至1L，pH 6.5～7.0，121℃滅菌20min，23～26℃，160～180r/min搖床震蕩培養(yǎng)4～8天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，步驟（1）中蟲草活化固體培養(yǎng)基制備方法：取蔗糖10~20g，蛋白胨2~5g，酵母粉1~2g，20%的馬鈴薯浸提液1000ml，瓊脂粉15g，pH6.0~7.0，121℃滅菌20min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，步驟（2）中取20%馬鈴薯浸提液200ml、蔗糖10~20g、蛋白胨5~10g、酵母粉5~10g、磷酸二氫鉀1.0~2g、瓊脂15g，補充去離子水至1000ml制成PDA斜面培養(yǎng)基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述營養(yǎng)液配方為：葡萄糖8~15g，蛋白胨5~7g，KH2P04 2~3g，酵母膏1~2g，MgS04 0.5~1 g，VBl 5~10mg，20％馬鈴薯浸汁100ml，蠶蛹粉2~8 g，pH5～7，補充自來水至1000 mL。
8. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的蛋白酶篩選固體培養(yǎng)基配方：20%馬鈴薯浸提液200ml，干酪素5~15g，蔗糖10~20g，KH2P04 1~2g，MgS04?7H20 0.5~1g，瓊脂粉15g，pH6.5，補充去離子水至1000ml，121℃滅菌20min，培養(yǎng)基滅菌后充分搖勻，隨著搖動，在60~70℃下倒入平板中。
9.根據(jù)權(quán)利要求4或5或6或7或8的20%的馬鈴薯浸提液的制備方法：去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水800ml，大火煮沸后改為小火，繼續(xù)煮30min，中間添加去離子水并攪拌，防止鍋底焦糊，冷卻后，過濾，收集濾液，添加去離子水至1000ml，即得到20%的馬鈴薯浸提液。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，步驟（4）中得到的蛹蟲草菌株，該蛹蟲草菌株為蛹蟲草(Cordyceps militaris)的一個菌株，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏編號為：CGMCC No. 13179。