技術(shù)特征：

1.一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于包括以下步驟：

1)取PCV2病毒培養(yǎng)液，裂解細(xì)胞，得到細(xì)胞裂解液；

2)取步驟1)所得的細(xì)胞裂解液澄清處理，得到病毒澄清液；

3)取步驟2)所得的病毒澄清液濃縮8～12倍，得到病毒濃縮液；

4)取步驟3)所得的病毒濃縮液利用Sepharose 4FF分子篩層析純化系統(tǒng)純化，純化過(guò)程中，先通過(guò)蠕動(dòng)泵以1.56πr²ml/min的流速利用0.9～1.1mol/L PBS溶液進(jìn)行柱平衡至紫外蛋白檢測(cè)儀OD₂₈₀基線平穩(wěn)，而后取步驟3)所得的病毒濃縮液上樣，上樣結(jié)束后利用0.9～1.1mol/L PBS溶液洗脫，收集紫外蛋白檢測(cè)儀OD₂₈₀的第一洗脫峰；

其中r是層析柱半徑，單位是厘米。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟4)純化之前先用無(wú)菌的0.5mol/L的NaOH溶液對(duì)Sepharose 4FF分子篩層析純化系統(tǒng)進(jìn)行循環(huán)沖洗20～30min，再用無(wú)菌1mol/L PBS對(duì)其進(jìn)行循環(huán)沖洗，至PH為6.8～7.2。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟1)具體包括以下操作：取PCV2病毒培養(yǎng)液，反復(fù)凍融3次，固液分離取沉淀，利用PBS溶液洗滌3次，棄去上清，加入細(xì)胞裂解液裂解，固液分離取沉淀，加入細(xì)胞裂解液重懸浮，而后超聲波處理。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟1)所述的固液分離均是在4℃條件下以9500r/min的轉(zhuǎn)速離心20min。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟1)中所述加入細(xì)胞裂解液裂解是：加入4℃預(yù)冷的細(xì)胞裂解液，用槍頭吹吸混勻后，冰浴20min。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟1)所述超聲處理是以振幅為25％的超聲波每次處理10s，每?jī)纱翁幚碇g的時(shí)間間隔30s，超聲處理的總時(shí)間為30min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟2)所述澄清處理是利用孔徑為0.5～0.8μm的濾板實(shí)現(xiàn)的。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟2)中，先利用0.5mol/L NaOH溶液浸泡濾板5min，而后用1mol/L無(wú)菌PBS溶液洗滌至PH為7.0，再澄清處理步驟1)所得的細(xì)胞裂解液。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟3)中對(duì)病毒澄清液的濃縮是利用孔徑為100KD的中空纖維濾膜實(shí)現(xiàn)的。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種豬圓環(huán)病毒2型病毒樣顆粒的純化方法，其特征在于步驟3)中先利用0.5mol/L NaOH溶液浸泡中空纖維濾膜20～30min，而后用1mol/L無(wú)菌PBS溶液洗滌至PH為7.0，再濃縮處理步驟2)所得的病毒澄清液。