本發(fā)明涉及一種板藍(lán)根植物蛋白的提取方法。

背景技術(shù)：

近年來，SARS、禽流感、以及甲型H1N1流感病毒在我國乃至世界范圍頻繁爆發(fā)，對人的生命安全和社會經(jīng)濟(jì)造成極大損害。

長期以來，人們通過疫苗來預(yù)防病毒，且取得了良好效果，但疫苗只有與病毒亞型相配時才會有效。病毒變異快且爆發(fā)具有不可預(yù)測性，而疫苗研究和生產(chǎn)相對滯后。

針對疫苗的這種弊端，人們開始廣泛研究抗病毒藥物，以此來對抗病毒。西藥抗病毒藥物具有見效快、療效高、作用準(zhǔn)確等特點(diǎn)，但每類藥物均具有針對性，只針對某種特定的病毒起作用，因病毒抗原易變異性因素，導(dǎo)致一些制作抗病毒藥物的化學(xué)藥物的應(yīng)用也有一定局限性。許多中藥具有抑制病毒復(fù)制、阻止病毒致細(xì)胞病變等功效，中藥通過調(diào)節(jié)免疫功能、改善肺循環(huán)、鎮(zhèn)痛抗炎等綜合作用，進(jìn)而抑制或者殺滅病毒，具有良好的防治病毒的作用。

從傳統(tǒng)中藥中充分挖掘和尋找抗病毒活性物質(zhì)也是近年研究的熱點(diǎn)之一。板藍(lán)根具有可靠的抗病毒作用，為家庭常備藥物。板藍(lán)根為十字花科植物菘藍(lán)(Isatis indigotica)的干燥根，具有清熱解毒、涼血利咽之功效，常用于治療流感、腮腺炎、溫病發(fā)熱、流行性乙型腦炎、肝炎等病毒感染性疾病。板藍(lán)根成分復(fù)雜，其物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制的不明確，生產(chǎn)工藝仍然比較落后。因此，需要對板藍(lán)根中的具有抗病毒效用的植物蛋白的提取工藝進(jìn)行進(jìn)一步地研究，以擴(kuò)大對板藍(lán)根中的植物蛋白的應(yīng)用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對上述技術(shù)問題，本發(fā)明設(shè)計開發(fā)了一種提取效率更高的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：

一種板藍(lán)根植物蛋白的提取方法，包括：

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為300～350μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10～15倍，在50～60℃下浸泡5～6小時，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2～3倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4～6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟一中，將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟二中，向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50～60℃下浸泡5～6小時，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟二中，向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟二中，向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟五中，用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，再用PH值為8～9的氨水對陽離子交換樹脂進(jìn)行洗脫，將水洗脫以及氨水洗脫的洗脫液都留存下來，進(jìn)行冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

本發(fā)明所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法通過精確設(shè)計提取工藝，所提取的植物蛋白在提純物的質(zhì)量百分比在94％以上，提高了植物蛋白的提取效率，有助于擴(kuò)大其在抗病毒方面的應(yīng)用性。

具體實施方式

下面對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。

本發(fā)明提供一種板藍(lán)根植物蛋白的提取方法，包括：

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為300～350μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10～15倍，在50～60℃下浸泡5～6小時，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2～3倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4～6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

本發(fā)明所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法通過精確設(shè)計提取工藝，所提取的植物蛋白在提純物的質(zhì)量百分比在94％以上，提高了植物蛋白的提取效率，有助于擴(kuò)大其在抗病毒方面的應(yīng)用性。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟一中，將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟二中，向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50～60℃下浸泡5～6小時，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟二中，向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000～4000rpm下離心處理3～5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500～5500rpm下離心處理20～25分鐘。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟二中，向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘。

優(yōu)選的是，所述的板藍(lán)根植物蛋白的提取方法中，所述步驟五中，用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，再用PH值為8～9的氨水對陽離子交換樹脂進(jìn)行洗脫，將水洗脫以及氨水洗脫的洗脫液都留存下來，進(jìn)行冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

實施例一

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為300～310μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為4，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94％。

實施例二

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為300～320μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的15倍，在60℃下浸泡6小時，之后在4000rpm下離心處理5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的3倍，之后再置于5500rpm下離心處理25分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.2％。

實施例三

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為340～350μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的15倍，在60℃下浸泡6小時，之后在4000rpm下離心處理5分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的3倍，之后再置于5500rpm下離心處理25分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.5％。

實施例四

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.3％。

實施例五

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～325μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5.5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.3％。

實施例六

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3500rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理22分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.2％。

實施例七

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在55℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的3倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.3％。

實施例八

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4550rpm下離心處理24分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.2％。

實施例九

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為310～320μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在55℃下浸泡6小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的3倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.1％。

實施例十

步驟一、將板藍(lán)根藥材粉碎成粒徑為320～330μm的板藍(lán)根顆粒；

步驟二、向板藍(lán)根顆粒中加入水，水的加入量為板藍(lán)根顆粒的10倍，在50℃下浸泡5小時，之后在3000rpm下離心處理3分鐘，然后再補(bǔ)充水，補(bǔ)充的水量為板藍(lán)根顆粒的2倍，之后再置于4500rpm下離心處理20分鐘；

步驟三、取上清液，超濾，取濾液，冷凍干燥，得到粗蛋白；

步驟四、將粗蛋白用水溶解，調(diào)節(jié)至pH值為6，得到粗蛋白溶液；

步驟五、用陽離子交換樹脂對處理粗蛋白溶液，用水反復(fù)洗脫，留取洗脫液冷凍干燥，得到精制的板藍(lán)根植物蛋白。

最終，植物蛋白在提純物中所占的質(zhì)量百分比為94.5％。

對比例

采用現(xiàn)有工藝對板藍(lán)根植物蛋白進(jìn)行提取，植物蛋白在提純物中的質(zhì)量百分比僅占到87％。

盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)。