1.一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒，其特征在于：包括1對(duì)特異性引物和1條與引物對(duì)配合
使用的特異探針，其核苷酸序列分別為：
F：5’-TCCCCTCTGCTGGCGAAAAGT-3’
R：5’-AGCGTTCGTGGTCAACTATCGATTG-3’
P：FAM- TCTGTGCAACTTTGGTGTATTCGCAG -BHQ1。
2.一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒在制備弓形蟲檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒，由微滴數(shù)字PCR檢測(cè)試劑和若干個(gè)微滴發(fā)生卡組裝而成，其特征在于：微滴數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)試劑盒，包含弓形蟲檢測(cè)試劑；包括：溶液A：ddPCR預(yù)混液一支，0.9mL,其中包含500μL的2×ddPCR Supermix for Probes，上/下游引物分別為90μL(濃度為10μM)，特異性探針為30μL(濃度為10μM)，ddH2O 190μL ；
溶液B：微滴發(fā)生油一支，7mL；
溶液C：質(zhì)控液一支，3.5mL；
溶液D：陽(yáng)性對(duì)照模板一支，40μL；
溶液F：ddH2O一支，1mL；
使用基因組DNA為陽(yáng)性模板，使用0.01MpH8.0的Tris-EDTA緩沖液稀釋后冷凍保存；陽(yáng)性對(duì)照制劑按400μL定量分裝；使用ddH2O為陰性對(duì)照。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒，其特征在于所述試劑盒的檢測(cè)方法程序如下 ：
1）制備ddPCR反應(yīng)液，總體積20μL，向擴(kuò)增管中加入下列反應(yīng)物：溶液A：18μL；模板：2μL；陰性對(duì)照：以ddH2O代替模板，同樣條件下擴(kuò)增；
2）取微滴發(fā)生卡置于卡托中固定，用8道可調(diào)移液器將20μL反應(yīng)液加入到微滴發(fā)生卡中間一排的8個(gè)孔內(nèi)，不足8個(gè)樣品時(shí)用20μL溶液C補(bǔ)足；
3）在微滴發(fā)生卡最底下一排8個(gè)孔中各加入70μL溶液B，不能有空孔，蓋上膠墊密封；
4）將帶有卡托的微滴發(fā)生卡輕且平穩(wěn)的放置于微滴生成儀中，開始生成微滴；
5）微滴生成于微滴發(fā)生卡最上面一排孔內(nèi)，緩慢吸取40μL，再打入96孔板相應(yīng)位置孔內(nèi)；
6）在96孔PCR儀內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，升降溫速度為2.5℃/sec；
7）將完成PCR的96孔板放入plate holder中組裝好，之后輕且平穩(wěn)的放入微滴讀取儀中；
8）打開QuantaSoft軟件進(jìn)行檢測(cè)和定量分析。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒的檢測(cè)方法，其特征在于所述檢測(cè)程序2）中使用8道可調(diào)移液器，加樣時(shí)槍頭接近孔一側(cè)底部，與側(cè)壁呈大約15°角，緩慢打出液體，打出一部分后慢慢提升槍頭位置再打出余下液體，不要將槍按至超過(guò)第一檔位置以免引入氣泡。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒的檢測(cè)方法，其特征在于所述檢測(cè)程序5）中微滴發(fā)生卡最底下一排8個(gè)孔中采用8道可調(diào)移液器加樣時(shí)，槍頭接近微滴發(fā)生卡底部，緩慢吸出液體，轉(zhuǎn)移至96孔板時(shí)，不貼壁，緩慢打入孔內(nèi)，避免破壞生成的微滴。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種基于數(shù)字PCR絕對(duì)定量檢測(cè)弓形蟲的試劑盒的檢測(cè)方法，其特征在于所述程序6）中的PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件為：
(1) 預(yù)變性：溫度94℃，10min；
(2) 變性：溫度94℃，15s，退火：溫度60℃，1min，共40個(gè)循環(huán)；
(3)結(jié)束反應(yīng)：溫度98℃，10min。