1.一種提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,以納塔爾鏈霉菌為主要原料,依次經(jīng)菌株活化、種子培養(yǎng)、發(fā)酵和納他霉素的提取,得到所述納他霉素;其特征在于:納塔爾鏈霉菌發(fā)酵開始前向發(fā)酵培養(yǎng)基中加入大孔吸附樹脂;納塔爾鏈霉菌發(fā)酵12-24h時向發(fā)酵液中添加大豆油,納塔爾鏈霉菌發(fā)酵24-48h時以流加方式向發(fā)酵液中加入纈氨酸和蘇氨酸;
其中,所述大孔吸附樹脂的添加量為每升發(fā)酵培養(yǎng)基中添加80-100g的大孔吸附樹脂,所述大豆油的添加量為每升發(fā)酵液中添加40-50mL的大豆油,所述纈氨酸的添加量為每升發(fā)酵液中添加0.5-0.7g的纈氨酸,所述蘇氨酸的添加量為每升發(fā)酵液中添加0.2-0.5g的蘇氨酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述菌株活化的具體步驟為:以納塔爾鏈霉菌為原料,將納塔爾鏈霉菌培養(yǎng)于固體斜面培養(yǎng)基上,在26-30℃下培養(yǎng)3-9天,得到納塔爾鏈霉菌斜面菌株,4℃以下保藏;
所述固體斜面培養(yǎng)基的配方為:每100mL蒸餾水中含有葡萄糖1-2g,番茄漿1.5-2.5g,燕麥2-3g,瓊脂1.5-2.0g,pH自然。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述種子培養(yǎng)的具體步驟為:將所述納塔爾鏈霉菌斜面菌株接種于液體種子培養(yǎng)基中,26-30℃培養(yǎng)2-3天,得到納塔爾鏈霉菌種子液;
所述液體種子培養(yǎng)基的配方為:每100mL蒸餾水中含有葡萄糖0.8-1g,胰蛋白胨0.2-0.5g,麥芽浸粉0.3-0.5g,氯化鈉0.6-1g,pH為7.0-7.5。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述發(fā)酵的具體步驟為:將所述納塔爾鏈霉菌種子液以2-10%的接種量接到發(fā)酵培養(yǎng)基中,得到發(fā)酵液,培養(yǎng)條件為26-30℃,轉(zhuǎn)速160-200r/min,發(fā)酵3-7天,得到納塔爾鏈霉菌發(fā)酵液;
在納塔爾鏈霉菌發(fā)酵開始前,向發(fā)酵培養(yǎng)基中加入大孔吸附樹脂;在發(fā)酵過程中,在納塔爾鏈霉菌發(fā)酵12-24h時,往發(fā)酵液中添加大豆油;在納塔爾鏈霉菌發(fā)酵24-48h時,往發(fā)酵液中以流加的方式添加纈氨酸和蘇氨酸;
所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為:每1000mL蒸餾水中含有葡萄糖30-45g,酵母浸出粉1-3g,牛肉膏5-15g,pH為7.0-7.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述納他霉素的提取的具體步驟為:采用甲醇提取法,將甲醇與所述納塔爾鏈霉菌發(fā)酵液以體積比為9-10:1的比例混合后,充分混合后離心,離心轉(zhuǎn)速10000r/min,離心時間為10-20min,取上清液,將上清液用0.22um濾膜過濾,所得濾液即為所述納他霉素溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述大孔吸附樹脂為HPD450大孔樹脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述的納塔爾鏈霉菌為納塔爾鏈霉菌屬中的任何菌株。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的提高納他霉素產(chǎn)量的發(fā)酵方法,其特征在于,所述納塔爾鏈霉菌為納塔爾鏈霉菌4.3526。