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一種大腸桿菌的破碎方法與流程

文檔序號(hào):11125835閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:所述破碎方法包括以下步驟:

①收集已完成蛋白表達(dá)的大腸桿菌,并在該大腸桿菌中加入蔗糖溶液,混勻,靜置;

②將步驟①中與大腸桿菌混合的蔗糖溶液稀釋,混勻,靜置;

③加入飽和硫酸銨溶液,靜置;

④離心,棄上清;

⑤將步驟④得到的沉淀溶解。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟①中所述的蔗糖溶液的溶度為40%以上,該濃度值為質(zhì)量和體積的比值。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟①中所述的蔗糖溶液的溶度為50%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟①中,所述大腸桿菌與所述蔗糖溶液的比例為:2g:(50~100)mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟②中,將步驟①中混合有大腸桿菌的蔗糖溶液稀釋至濃度為15~25%。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟②中,將步驟①中混合有大腸桿菌的蔗糖溶液稀釋至濃度為20%。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟③中,所述飽和硫酸銨溶液加入至硫酸銨溶液的濃度為30~50%為止,所述的濃度值為質(zhì)量和體積的比值。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟③中,所述飽和硫酸銨溶液加入至硫酸銨溶液的濃度為40%為止。

9.根據(jù)權(quán)利要求1~8中任一項(xiàng)所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟①~③中,所述蔗糖溶液中的溶劑為水、PBS或Tris溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的大腸桿菌的破碎方法,其特征在于:步驟①~③中,所述靜置為在10℃以下靜置0.5~2h;步驟④中,所述離心為在12000r/min下離心15min。

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