本申請是申請日為2012年01月30日的題為“脂肪代謝障礙的治療”的中國專利申請?zhí)?01280006760.2的分案申請。

本發(fā)明涉及開發(fā)用于預(yù)防和治療脂肪代謝障礙的治療性化合物。尤其是，本發(fā)明涉及開發(fā)用于在hiv感染患者(ldhiv)中預(yù)防和治療脂肪代謝障礙的治療性化合物。具體地說，本發(fā)明進(jìn)一步提供了在hiv感染患者(ldhiv)中在治療或預(yù)防或減輕脂肪代謝障礙的癥狀方面有效的合適的組合物。

背景技術(shù)：

脂肪代謝障礙是非?？膳碌募膊〔⒁殉蔀橹饕娜蛐越】祮栴}。它是脂肪代謝的失調(diào)，其引起脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常。此外，脂肪增生包括頸背面脂肪墊的增大(通常被稱為"水牛背")、頸部周圍擴(kuò)張5-10cm、發(fā)生于胸部的肥大、由腹部內(nèi)臟脂肪堆積導(dǎo)致的中央軀干肥胖、對稱和非對稱的脂肪過多癥。脂質(zhì)堆積的一種罕見模式涉及形成自胸部對稱并橫向生長至(laterallyto)腋窩的帶狀組織脂肪過多癥、恥骨上脂肪墊(恥骨脂肪瘤)以及多發(fā)性血管脂肪瘤的發(fā)展。

皮下脂肪萎縮包括來自頰部的皮下脂肪(頰脂墊)的暫時性消瘦和缺失，其產(chǎn)生伴隨突出的鼻唇溝折痕的瘦弱外表。另外的皮下組織從手臂、肩膀、大腿、和臀部處消減(四肢消瘦)，伴隨在這些部位中淺表靜脈的凸出。

代謝異常包括升高的膽固醇和甘油三酯水平和降低的高密度脂蛋白(hdl)膽固醇水平、胰島素抗性、ii型糖尿病、和高乳酸血癥(lacticacademia)。

脂肪代謝障礙普遍與hiv患者相關(guān)，這些患者正接受抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物治療。這些藥物可以包括hiv-1蛋白酶抑制劑(pi)、核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nrti)、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nnrti)、融合抑制劑、進(jìn)入抑制劑-ccr5共受體拮抗劑、hiv整合酶鏈轉(zhuǎn)移抑制劑等。這些藥物會增加患者的生存，但也產(chǎn)生脂肪增生、皮下脂肪萎縮和其它代謝異常。

在hiv感染患者ldhiv中，hiv-1蛋白酶抑制劑(pi)似乎是與脂肪代謝障礙的連接最強(qiáng)物，因為它抑制固醇響應(yīng)元件結(jié)合蛋白(srebp)的成熟，其影響細(xì)胞內(nèi)脂肪酸和葡萄糖代謝以及脂肪細(xì)胞分化(mallonetal,jinfectdis,2005)。此外，pi還下調(diào)過氧化物酶體增生物激活受體γ(pparγ)，一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子，其受到srebp的影響并且是脂肪細(xì)胞分化和功能以及脂肪酸代謝所必要的。

其它因素，如hiv感染的持續(xù)時間、年齡、和性別，也可以有助于ldhiv的發(fā)展的風(fēng)險。ldhiv的分子基礎(chǔ)仍然未知并且沒有可用于ldhiv的特定療法。

逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nrti)如司他夫定、去羥肌苷和齊多夫定通過在脂肪和其它組織中抑制線粒體dna聚合酶-γ可以引起線粒體毒性，并因此干擾呼吸鏈復(fù)合物。結(jié)果是脂肪酸氧化減弱以及甘油三酯和乳酸酯的細(xì)胞內(nèi)積累。

此外，在急性hiv感染中也觀測到脂肪代謝障礙，其也支持病毒直接作用。潛在的宿主危險因素包括年齡、性別、和種族或族裔(ethnicity)。在老年患者中脂肪代謝障礙是更常見的；在女性中脂肪堆積是更常見的；并且在男性中皮下脂肪萎縮是更常見的；并且非西班牙裔黑人患者似乎處于皮下脂肪萎縮的較低風(fēng)險。在aidsclinicaltrialsgroup(actg)研究5005s中的最近的分析指出一種遺傳組成提示了與線粒體dna多態(tài)性相關(guān)的易感性或保護(hù)。hulganetal,jinfectdis,2008描述了對于在hfe187基因座處c/c純合子的患者(n＝71)在48至64周時具有0.6-kg和12.5％的四肢脂肪損失，其中71位患者中的37位(52％)被確診患有臨床皮下脂肪萎縮。通過比較，具有hfe187c/g的雜合子患者具有0.2-kg和6.1％的四肢脂肪增加，其中23位患者中的6位(26％)患有臨床皮下脂肪萎縮(對于所有比較p<0.05)。

已研究了用于降低向心性肥胖的一系列的策略如停止pi治療，但它不是有效的。飲食和運(yùn)動方面的改變已經(jīng)產(chǎn)生了改善，但對于大多數(shù)患者來說堅持生活方式改變的方案是困難的。脂肪抽吸術(shù)可以特別應(yīng)用于頸背面脂肪堆積，即，“水牛背”。

根據(jù)若干研究顯而易見的是，在vat中噻唑烷二酮類并沒有顯示出變化(pathogenesisandtreatmentoflipodystrophy,vol.16,issue4,oct/november,2004)。

在具有上身肥胖和低睪酮水平的老年非hiv感染男性中睪酮回復(fù)(replacement)到生理水平減少了內(nèi)臟脂肪組織(vat)、總脂肪、和腹部脂肪，并改善胰島素敏感性和脂肪分布(profile)。在最近的一項研究中，將具有向心性肥胖(腰圍>100cm)和低睪酮水平(<400ng/dl)的88位hiv感染男性隨機(jī)分組，以透皮凝膠形式接受10g/日的劑量的睪酮或安慰劑，持續(xù)24周(bhasinetal,jclinendocrinolmetab,2007)。睪酮組具有腹部脂肪(–1.5％對+4.3％)、腹部皮下脂肪組織(sat)(–7.2％對+8.1％)、軀干脂肪(–9.9％對+4.6％)、和四肢脂肪(–10.1％對+3.1％)的統(tǒng)計上的顯著減少；在易患皮下脂肪萎縮的群體中后者發(fā)現(xiàn)是潛在的關(guān)注。沒有觀測到在vat中的變化(+0.9％與+2.3％)方面統(tǒng)計上的顯著差異，并且沒有觀測到在血脂水平、空腹血糖水平、胰島素水平、或胰島素抗性上的變化方面的統(tǒng)計上的顯著差異。

如同睪酮一樣，生長激素(gh)具有脂肪氧化和分解脂肪的特性。相當(dāng)大比例的患有向心性肥胖的hiv患者(大約30％-40％)具有受損的gh生物學(xué)狀態(tài)，包括gh大量分泌減少、對gh釋放激素(ghrh)和游離脂肪酸的響應(yīng)降低、和生長激素抑制素(somatostatintone)升高，其抑制gh。一些最近的研究已評估了在具有脂肪堆積的hiv患者中的gh治療。在一項研究中，接收了具有增加的腰臀比和增加的vat測量結(jié)果的325位hiv患者。

雖然，由于它們具有脂肪氧化和分解脂肪的特性，生長激素(gh)和gh釋放激素(ghrh)療法顯示出一些有前途的結(jié)果，然而，它們的用途存在局限性。它們是非腸道療法并且是昂貴的(rhgh)或未得到fda認(rèn)可(替莫瑞林(tesamorelin))。到目前為止，有證據(jù)表明：存在著在它們停止以后減少vat的逐漸減弱的耐久性、關(guān)于rhgh的胰島素抗性的短期增加、以及較小的短期減小。

因為對脂肪代謝障礙具有一些有益效果，最近的研究出版物已經(jīng)示出了使用兩種降脂類藥物：他汀類和纖維酸類藥物，抗逆轉(zhuǎn)錄病毒切換策略，和使用胰島素增敏藥物。然而，對于與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙，沒有單一療法能夠達(dá)到理想的臨床終點(diǎn)。

因此，期望開發(fā)可以克服現(xiàn)有技術(shù)的上述討論的缺點(diǎn)的化合物并且開發(fā)用于與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的療法。

在wo91/19702、wo94/01420、wo94/13650、wo95/03038、wo95/17394、wo96/04260、wo96/04261、wo96/33998、wo97/25042、wo97/36579、wo98/28534、wo99/08501、wo99/16758、wo99/19313、wo99/20614、wo00/23417、wo00/23445、wo00/23451、wo01/53257已經(jīng)披露了降血脂劑(其是ppar調(diào)節(jié)劑)。

wo03009841披露了以下通式的化合物

據(jù)報道，這些化合物是降血脂劑。此文獻(xiàn)還披露了其中披露的一些化合物的鈉鹽和鈣鹽。然而，由于快速降解，難以分離本發(fā)明的化合物的鈉鹽，而鈣鹽則吸收不良，限制了它的功效和進(jìn)一步開發(fā)的可能性。進(jìn)一步，在長期存儲以后還發(fā)現(xiàn)了鈣鹽降解?，F(xiàn)在已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，某些化合物和它們的選定鹽在治療hiv患者的脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常中有效。

本發(fā)明的實施方式

在一個實施方式中，本發(fā)明提供了適用于治療和預(yù)防脂肪代謝障礙的式(i)的化合物。

在一個實施方式中，與脂肪代謝障礙相關(guān)的病癥包括以下癥狀：脂肪增生、皮下脂肪萎縮和其它代謝異常。

在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了式(i)的化合物用于治療和預(yù)防或減輕hiv患者的以下癥狀：脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常。

在又一個實施方式中，本發(fā)明提供了單獨(dú)地或與其它合適適合制劑作為治療劑一起來給予的式(i)的化合物和它們的藥用鹽，用于治療和預(yù)防或減輕脂肪代謝障礙的癥狀。

在又一個實施方式中，本發(fā)明提供了包含式(i)的化合物合適或它們的合適的藥物組合物，用于治療和預(yù)防或減輕脂肪代謝障礙的癥狀。

在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了式(i)的化合物的某些藥用鹽。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了式(i)的化合物和它們的藥用鹽，用于預(yù)防和治療或減輕脂肪代謝障礙的癥狀。本發(fā)明提供了式(i)的化合物和它們的藥用鹽，用于預(yù)防和治療或減輕由hiv感染或由于使用抗逆轉(zhuǎn)錄病毒制劑進(jìn)行治療引起的脂肪代謝障礙的癥狀。這些抗逆轉(zhuǎn)錄病毒制劑可以包括hiv-1蛋白酶抑制劑(pi)、核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nrti)、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nnrti)、融合抑制劑、進(jìn)入抑制劑-ccr5共受體拮抗劑、hiv整合酶鏈轉(zhuǎn)移抑制劑等，或涉及一種或多種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒制劑的聯(lián)合治療。在hiv患者中式(i)的化合物抑制脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常。此外，本發(fā)明還提供了包含式(i)的化合物的合適組合物，在治療或預(yù)防或減輕hiv感染患者(ldhiv)的脂肪代謝障礙的癥狀中有效。

在一個進(jìn)一步的實施方式中，披露了對應(yīng)于式(i)的化合物的某些新鹽，其中m表示k或mg。

具體實施方式

本發(fā)明描述了式(i)的化合物，其適用于治療脂肪代謝障礙或與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙。

其中‘r’選自羥基、羥烷基、?；⑼檠趸?、烷硫基、硫代烷基、芳氧基、芳硫基，并且m⁺表示合適的金屬陽離子如na⁺、k⁺、ca⁺²、mg⁺²、等。

在一個優(yōu)選的實施方式中，‘r’表示硫代烷基、烷氧基或羥烷基；在一個更優(yōu)選的實施方式中，‘r’表示–sch3或-och3基團(tuán)。

在一個實施方式中，提供了包含式(i)的化合物的用于治療脂肪代謝障礙或與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的合適藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物包含式(i)的化合物以及如在下文中定義的用于治療脂肪代謝障礙或與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的合適的賦形劑。

在另一個實施方式中，本發(fā)明提供了用于治療患有脂肪代謝障礙或與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的受試者的方法，該方法包括使用式(i)的化合物或包含它們的合適的藥物組合物來治療需要這種療法的患者。

在進(jìn)一步的實施方式中，本發(fā)明提供了式(i)的化合物或它們的合適的藥物組合物用于治療脂肪代謝障礙或與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的用途。

在一個實施方式中，本發(fā)明提供了式(ia)的化合物的某些新鹽。

其中‘r’選自羥基、羥烷基、?；?、烷氧基、烷硫基、硫代烷基、芳氧基、芳硫基，并且m⁺表示選自k⁺、mg⁺²的合適的金屬陽離子。

在一個優(yōu)選的實施方式中，‘r’表示硫代烷基和烷氧基或羥烷基；在一個更優(yōu)選的實施方式中，‘r’表示–sch3或-och3基團(tuán)。在另一個優(yōu)選的實施方式中，m⁺表示mg⁺²。

所述式(i)的化合物的有效量選自從1mg至500mg、優(yōu)選1mg至250mg、并且更優(yōu)選4mg至50mg。在需要治療的受試者中，通過口服、靜脈內(nèi)、腸道途徑給予式(i)的化合物或它的合適的鹽。

在一個實施方式中，式(i)的化合物對于治療或預(yù)防或減輕脂肪代謝障礙的癥狀有效。在一個優(yōu)選的實施方式中，式(i)的化合物對于治療或預(yù)防或減輕與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的癥狀有效。在這樣的實施方式中，脂肪代謝障礙是脂肪代謝失調(diào)，其引起脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常。

在一個實施方式中，式(1)的化合物治療或防止或減輕脂肪代謝障礙的至少一種癥狀，包括但不限于，作為用于降低和/或控制血糖水平的藥劑、用于控制血脂水平的藥劑例如，作為用于降低和/或控制膽固醇的藥劑、抗氧化劑、食欲抑制劑、抗肥胖劑、益生菌劑或抗炎劑。在另一個實施方式中，式(1)的化合物治療或防止或減輕脂肪代謝障礙的至少一種癥狀，包括但不限于血清中的甘油三酯水平、vldl水平和apob水平。在另一個實施方式中，式(1)的化合物通過改善選自hdl水平、apoa1水平、從c-肽衍生的β細(xì)胞功能的homa的至少一種狀態(tài)來治療或預(yù)防脂肪代謝障礙。

在一個實施方式中，本發(fā)明還提供了式(i)的化合物或它們的衍生物的合適的藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物基本上包含：

-藥學(xué)活性物質(zhì)；

-合適的緩沖劑；

-合適的穩(wěn)定劑；

-可選地包含一種或多種藥用賦形劑。

在藥物組合物中使用的合適的穩(wěn)定劑選自聚克立林鉀、氯化鉀、硬脂酰醇富馬酸鈉并且優(yōu)先選自硬脂酰醇富馬酸鈉。合適的緩沖劑選自乙酸鈉、氨溶液、碳酸銨、硼酸鈉、己二酸、甘氨酸、谷氨酸一鈉并且優(yōu)先選自氨溶液。

藥用賦形劑選自以下至少一種：載體、粘合劑、抗氧化劑、崩解劑、潤濕劑、潤滑劑、螯合劑、表面活性劑、等。

稀釋劑包括但不限于乳糖一水合物、乳糖、選自尤特奇(eudragit，藥用丙烯酸樹脂)的聚甲基丙烯酸酯、氯化鉀、磺丁基醚β-環(huán)糊精、氯化鈉、噴霧干燥乳糖，并且優(yōu)選磺丁基醚β-環(huán)糊精。載體包括但不限于乳糖、白糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸鈣和高嶺土、結(jié)晶纖維素、和硅酸。粘合劑包括但不限于選自聚羧乙烯的卡波姆、結(jié)冷膠、阿拉伯樹膠、氫化植物油、選自尤特奇的聚甲基丙烯酸酯、黃原膠、乳糖和玉米醇蛋白?？寡趸瘎┌ǖ幌抻诖瘟姿?、甲醛鈉、甲醛合次硫酸氫鈉、二氧化硫、酒石酸、麝香草酚和蛋氨酸。崩解劑包括但不限于碳酸氫鹽、幾丁質(zhì)、結(jié)冷膠、波拉克林鉀和多庫酯鈉。潤濕劑包括但不限于甘油、乳糖、多庫酯鈉和甘氨酸。使用的潤滑劑包括但不限于山崳酸甘油酯、氫化植物油、硬脂酰醇富馬酸鈉和肉豆蔻酸。螯合劑包括但不限于麥芽酚和噴替酸。表面活性劑包括但不限于選自烷基多葡糖苷、椰油酰胺dea、椰油酰胺mba、椰油酰胺tea、癸基麥芽糖苷和辛基葡糖苷的非離子型表面活性劑；選自花生酸和花生四烯酸的陰離子型表面活性劑；選自溴化十六烷基三甲基銨和氯化十六烷基吡啶的陽離子型表面活性劑。

在一個實施方式中，制劑對于治療或預(yù)防或減輕脂肪代謝障礙的癥狀有效。在一個優(yōu)選的實施方式中，所述制劑在治療或預(yù)防或減輕與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的癥狀中有效。

脂肪代謝障礙是脂肪代謝失調(diào)，其引起脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常。此外，脂肪增生包括頸背面脂肪墊的增大(通常被稱為"水牛背")、頸部周圍的擴(kuò)張5-10cm，發(fā)生于胸部的肥大，由腹部內(nèi)臟脂肪堆積導(dǎo)致的中央軀干肥胖、對稱和非對稱的脂肪過多癥。脂質(zhì)堆積的一種罕見模式涉及形成自胸部對稱并橫向生長至腋窩的帶狀組織脂肪過多癥，恥骨上脂肪墊(恥骨脂肪瘤)以及多發(fā)性血管脂肪瘤的發(fā)展。

皮下脂肪萎縮包括來自頰部的皮下脂肪(頰脂墊)的暫時性消瘦和缺失，其產(chǎn)生伴隨突出的鼻唇溝折痕的瘦弱外表，皮下組織從手臂、肩膀、大腿、和臀部處消減(四肢消瘦)，伴隨在這些部位中淺表靜脈的凸出

代謝異常包括膽固醇和甘油三酯水平的升高和降低的高密度脂蛋白(hdl)膽固醇水平、胰島素抗藥性、ii型糖尿病、和高乳酸血癥。

由于它們對脂肪代謝障礙的有益效果，本發(fā)明的化合物將對身體脂肪的再分配(皮下脂肪萎縮或肥大或異常分布)、血脂異常、葡萄糖內(nèi)穩(wěn)態(tài)、前炎癥病癥發(fā)揮有益效果，對發(fā)病率和死亡率產(chǎn)生影響，對生活質(zhì)量產(chǎn)生影響，對患者報告的結(jié)果如自我感覺等產(chǎn)生影響。

此外，沒有很好地理解這種綜合征的根本的確切機(jī)制，基于體外和人研究的若干假設(shè)可以解釋變化的發(fā)病機(jī)制。一些專家認(rèn)為，hiv1型(hiv-1)蛋白酶抑制劑(pi)和核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(nrti)，尤其是司他夫定和齊多夫定，牽涉如下：

(i)降低的視黃酸的產(chǎn)生和甘油三酯的攝?。簆i對hiv-1蛋白酶的催化位點(diǎn)具有高親和力，其與涉及脂質(zhì)代謝的兩種蛋白、細(xì)胞質(zhì)視黃酸結(jié)合蛋白1型(crabp-1)和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(ldlr-rp)共享60％序列同源性。抑制crabp-1會減少視黃酸的產(chǎn)生，從而導(dǎo)致減少的脂肪儲存和脂肪細(xì)胞凋亡伴隨著隨后將脂質(zhì)釋放進(jìn)入循環(huán)。抑制ldlr-rp導(dǎo)致高脂血癥，其繼發(fā)于從肝和內(nèi)皮去除乳糜微粒以及從循環(huán)去除甘油三酯的失敗。

(ii)抑制線粒體dna(mtdna)聚合酶γ：nrti抑制mtdna聚合酶γ，導(dǎo)致mtdna耗盡、呼吸鏈功能紊亂、并減少的能量生產(chǎn)，其反過來引起胰島素抗性和繼發(fā)性異常脂肪血癥。有趣的是，僅在正常氧水平下，耗盡mtdna—除了在用nrti處理以后，缺氧脂肪細(xì)胞并不接收甘油三酯并且耐mtdna引起的損傷。

(iii)抑制脂質(zhì)代謝：一些pi，尤其是利托那韋，抑制脂質(zhì)代謝中的關(guān)鍵酶細(xì)胞色素p4503a。

(iv)阻礙脂肪細(xì)胞的發(fā)育：沙奎那韋、利托那韋、和奈非那韋(均是pi)直接抑制脂肪細(xì)胞從干細(xì)胞的發(fā)育并增加在現(xiàn)有脂肪細(xì)胞中脂肪的代謝破壞。

在一個實施方式中，式(i)的化合物或包含式(i)的化合物的藥物組合物治療或防止或減輕脂肪代謝障礙的至少一種癥狀，包括但不限于，作為用于降低血糖水平的制劑和/或用于控制血糖水平的藥劑，用于控制血脂水平的藥劑，例如，作為用于降低和/或控制膽固醇的藥劑、抗氧化劑、食欲抑制劑、抗肥胖劑、抗生素劑/益生菌劑或抗炎劑。在另一個實施方式中，藥物組合物治療或防止或減輕脂肪代謝障礙的至少一種癥狀，包括但不限于在血清中的甘油三酯水平、vldl水平和apob水平。在另一個實施方式中，藥物組合物通過改善選自hdl水平、apoa1水平、從c-肽衍生的β細(xì)胞功能的homa的至少一個狀態(tài)來治療或預(yù)防脂肪代謝障礙。

在另一個實施方式中，可以單獨(dú)地或例如，作為輔助治療與至少一種其它治療藥劑組合使用根據(jù)式(i)的化合物?？梢耘c用于減弱脂肪代謝障礙的一種或多種癥狀的治療性藥劑一起共同給予根據(jù)式(i)的化合物，治療性藥劑包括但不限于，用于控制血糖水平的藥劑、用于控制血脂水平的藥劑例如，用于降低和/或控制膽固醇的藥劑、抗氧化劑、食欲抑制劑、抗肥胖劑、抗生素劑/益生菌劑或抗炎劑。這種聯(lián)合治療可以輔助抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療。在一個優(yōu)選的實施方式中，單獨(dú)或以組合形式給予式(i)的化合物用于在hiv患者中治療的脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常。

可以通過下文披露的方法以及技術(shù)人員已知的合適的修改，來制備其中m+表示k、mg的本發(fā)明的化合物。

實施例1

制備(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯-丙酸乙酯

在干燥的5l圓底燒瓶中，在氮?dú)夥障录尤?.1l甲苯。在室溫下向其中加入366.1g的(s)-α-2-乙氧基-3-(4-羥基苯基)丙酸乙酯。

利用迪安-斯達(dá)克(dean-stark)裝置并在加熱條件下攪拌反應(yīng)混合物以共沸地除去水。將反應(yīng)混合物冷卻至50℃。向其加入319g無水碳酸鉀，并在90-92℃下攪拌1小時。冷卻至65℃并加入500g的甲磺酸2-(2-甲基-5-(4-(甲硫基)苯基)-1h-吡咯-1-基)乙酯和22g溴化四丁基銨。將反應(yīng)混合物加熱至87-92℃并攪拌46小時。冷卻至70-75℃，加入1.5l甲苯，利用75g炭來炭化并冷卻至室溫。濾液以堿性溶液洗滌、以水洗滌、經(jīng)硫酸鈉干燥并在真空下濃縮以獲得(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯-丙酸乙酯。

產(chǎn)量：650g，hplc純度：84.10％；％產(chǎn)率76.0％。

實施例2

制備(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯丙酸鎂鹽

在干燥的250ml圓底燒瓶中加入80ml甲醇。在室溫并在氮?dú)夥障孪蚱浼尤?0g的(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯-丙酸乙酯。向其加入溶解在20ml水中的1.89g氫氧化鈉并在室溫下攪拌3小時以完成水解。在減壓下除去溶劑。加入150ml水以濃縮材料。通過溶劑洗滌來除去雜質(zhì)。向水層加入5g乙酸鎂四水合物(溶解于20ml水中)并攪拌15分鐘。使用二氯甲烷萃取粘性物質(zhì)，并隨后加入正庚烷以沉淀(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯丙酸鎂鹽。過濾固體，并干燥。

產(chǎn)量：10.3g；hplc純度：98.32％；手性純度：97.64％。

按照類似于在實施例1和2中描述的那些方法，制備了以下批次的(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯丙酸鎂鹽。

本發(fā)明進(jìn)一步披露了所述式(i)的化合物或它們的合適藥物組合物用于在hiv患者中治療脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常的用途。

實施例9

(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯丙酸鉀鹽

在干燥的250ml圓底燒瓶中加入72ml乙酸乙酯。在室溫下，向其中加入10g的(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯-丙酸的(s)-(-)α-1-苯基乙胺鹽，其后加入50ml水和4.8ml稀鹽酸(水1:1:35％hcl)并且在室溫下攪拌直到固體溶解。分離各層并用水洗滌有機(jī)層。經(jīng)硫酸鈉干燥并除去溶劑。獲得9.2g油性物質(zhì)。向其中加入50ml甲醇并在氮?dú)夥障聰嚢琛Ｏ蚱渲屑尤?.81g叔丁醇鉀并在室溫下攪拌15分鐘。除去溶劑并加入正己烷。再一次，除去正己烷并加入甲醇。在真空下除去溶劑。獲得吸濕材料。在真空下干燥它以獲得(s)-α-乙氧基-4-[2-[-甲基-5-[4-(甲硫基)苯基]-1h-吡咯-1-基]乙氧基]苯丙酸鉀鹽。

產(chǎn)量7.6g，(92.77％)，hplc純度98.60％，手性純度99.56％

實施例10

研究題目：前瞻性、多中心、開放標(biāo)簽、單組研究以評價4mg的式(i)的化合物在與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙中的高甘油三酯血癥方面的安全性和功效。

目的：這項研究的目的是評價4mg的式(i)的化合物在與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙中的高甘油三酯血癥方面的安全性和功效。

方法論：這是前瞻性、多中心、開放標(biāo)簽、單組研究以評估4mg的式(i)的化合物在與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙中的高甘油三酯血癥方面的安全性和功效。

在用haart治療至少18個月并滿足納入和排除標(biāo)準(zhǔn)以后，患有與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的高甘油三酯血癥的受試者在獲得知情同意書以后入選本研究。受試者口服接受4mg的式(i)的化合物片劑，每天一次，持續(xù)12周的時期。在此12周計劃期間，在第2、6、和12周評估安全參數(shù)以及在第6和12周評價功效。

患者數(shù)目：計劃：50，分析：50

測試產(chǎn)物：式(i)的化合物

劑量4mg

治療的持續(xù)時間：12周

給予方式：口服

批號：emk328

評估標(biāo)準(zhǔn)：功效：

主要功效終點(diǎn)是評估從基線至第6周和第12周tg水平方面的百分比變化。次要功效終點(diǎn)是針對homaβ和homair評估ldl、vldl、hdl、非hdl膽固醇、總膽固醇、apoa1、apob、和c肽和空腹胰島素。

安全性：

在所有調(diào)查(visit)中進(jìn)行不良事件(ae)的臨床檢查和記錄。在篩檢調(diào)查和在第12周時記錄心電圖。在篩檢調(diào)查時進(jìn)行尿妊娠試驗。

血液學(xué)檢查包括血紅蛋白、血細(xì)胞比容、紅細(xì)胞(rbc)計數(shù)、白細(xì)胞(wbc)計數(shù)(中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜伊紅細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞)和血小板計數(shù)。

生物化學(xué)試驗包括ast、alt、alp、總膽紅素、血清蛋白、總白蛋白和球蛋白、γ-gtt、bun、血清肌酸酐、血清尿酸、cpk、和尿r/m(包括微量白蛋白尿和酮尿)。

在登記調(diào)查(第0周)和在第2、第6、和第12周時，評價所有實驗室參數(shù)。

統(tǒng)計方法

對于功效終點(diǎn)，利用具有針對基線和治療的因子的方差分析(anova)模型的分析來評價治療效果。使用來自anova模型的最小二乘法(lsm)和95％置信區(qū)間(ci)來估計治療效果。統(tǒng)計顯著性被定義為雙側(cè)p值<0.05。利用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計方法來分析所有其它次要終點(diǎn)。

對于安全性分析，針對每個調(diào)查提供異常體檢和異常臨床實驗室參數(shù)的頻率表。針對每個調(diào)查，提供臨床實驗室參數(shù)和生命體征的總結(jié)統(tǒng)計?？偨Y(jié)了在研究期間使用的合并用藥的清單。

利用用于規(guī)范活動的醫(yī)學(xué)詞典(medicaldictionaryforregulatoryactivities)(meddra)(版本14)編碼不良事件。通過系統(tǒng)器官分類(soc)和通過用于治療緊急不良事件(teae)的meddra的優(yōu)選術(shù)語整體概述不良事件和sae。在清單中包括所有ae，其包括治療前后產(chǎn)生的ae。為導(dǎo)致研究停止的sae和ae提供單獨(dú)的清單。

研究設(shè)計

這是用于在與hiv相關(guān)的脂肪代謝障礙的高甘油三酯血癥方面評價4mg的式(i)的化合物的安全性和功效研究。這是用于在擬定群體中評估安全性和功效的證據(jù)概念研究的試探性證據(jù)。在血脂異常受試者中，來自ii期研究的式(i)的化合物的結(jié)果表明：4mg式(i)的化合物是耐受良好的，并且每天一次的劑量是有效的。i期研究表明，食物顯著影響式(i)的化合物的吸收，所以推薦優(yōu)選在空腹條件下使用藥物。基于這些觀測結(jié)果，選擇在空腹?fàn)顟B(tài)下每天一次4mg用于本研究。

研究群體的選擇

入選標(biāo)準(zhǔn)

在本研究中，滿足所有以下標(biāo)準(zhǔn)的受試者可登記：

1.18-65歲的男性和女性。

2.確診hiv1并使用haart至少18個月。

3.在包括在本研究中以前至少8周使用穩(wěn)定的art方案，并且在接下來的3個月中預(yù)計不會改變art方案。

4.臨床診斷為hiv脂肪代謝障礙(由醫(yī)生和患者確定的至少一種中度或重度脂肪代謝障礙特稱，除了獨(dú)立的腹部肥胖)的受試者

5.甘油三酯>200至500mg％。

6.cd4計數(shù)>50/mm³

7.已經(jīng)提交參與此試驗的知情同意書的受試者。

治療

給予的治療

這項研究進(jìn)行單組。在早晨，在早餐以前，受試者口服接受4mg的式(i)的化合物，每天一次，持續(xù)12周的時期。

一種或多種試驗藥物的確定(identity)

式(i)的化合物是羧酸的二價鎂鹽，形式為白色無定形粉末，其易溶于二甲亞砜、二氯甲烷，微溶于甲醇并且不溶于水。以4mg的活性組分的無包衣片劑提供藥物。

在研究中使用于自批號emk328的供料。在cgmp工廠中制造和包裝該研究藥物。

一個或多個主要療效變量

主要療效終點(diǎn)是確定從基線至第6周和第12周的tg水平的百分比變化。

次要療效變量

次要療效終點(diǎn)是確定從基線至第6周和第12周的針對homaβ的ldl、vldl、hdl、總膽固醇、非hdl膽固醇(測量值)、apoa1、apob、c肽和空腹胰島素以及homair水平的百分比變化。

在治療方案和測定樣本大小中計劃的統(tǒng)計方法

統(tǒng)計和分析計劃

對于式(i)的化合物4mg治療組總結(jié)人口統(tǒng)計特征和基線特征。對于連續(xù)測量值如年齡，將均值、中位數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)偏差(sd)和范圍制成表格。對于分類測量值如性別，則計算頻率。

療效分析

主要療效變量是，和基線相比，在治療期間的第6周和第12周時tg的減少。與基線的變化確定為對于治療期間(第6周/第12周)的平均值和基線之間的差異。

對于療效終點(diǎn)，使用具有針對基線和治療的因素的方差分析(anova)模型來評價治療效果。由anova模型使用最小二乘法(lsm)和95％置信區(qū)間(ci)來估計治療效果。統(tǒng)計顯著性被定義為雙側(cè)p值<0.05。利用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計方法來分析所有其它次要終點(diǎn)。

對于上述研究，進(jìn)行意向性治療(itt)分析和/或按方案(pp)分析。在試驗分析中，pp分析被認(rèn)為是明確的而itt分析則被認(rèn)為是支持性的。

個別患者數(shù)據(jù)的療效結(jié)果和表列結(jié)果

分析療效

在研究中，標(biāo)識為eht004的一位受試者，35歲男性，在調(diào)查1時報道具有異常低水平的hdl(3.95mg/l)和ldl(6.25mg/l)。雖然該受試者完成了研究并且療效是可評價的，但決定從療效分析中排除該受試者。因此，分析了總共49位受試者的療效。

主要終點(diǎn)

在式(i)的化合物4mg后的第6周和第12周，血清tg水平自基線的百分比變化是統(tǒng)計上顯著的(分別為-40.98±4.89和-45.11±3.60[各自的p值：<0.0001])(表1)。

次要終點(diǎn)

hdl膽固醇：

在給予4mg式(i)的化合物以后，hdl膽固醇水平會升高。在給予4mg式(i)的化合物以后的第6周和第12周，hdl膽固醇自基線的百分比變化是統(tǒng)計上顯著的(分別為29.92±5.73和34.56±6.13[各自的p值：<0.0001])(表2)。

胰島素抗性的c肽homa：

在用式(i)的化合物治療之后胰島素抗性提高。在給予4mg式(i)的化合物之后的第6周和第12周，homair自基線的百分比變化是統(tǒng)計上顯著的(分別為27.87±4.22和58.29±5.74[各自的p值：<0.0001])(表3)。

胰島素(空腹)：

在用式(i)的化合物進(jìn)行治療之后胰島素抗性提高。在給予4mg式(i)的化合物以后的第6周和第12周，胰島素自基線的百分比變化是統(tǒng)計上顯著的(分別為23.71±3.55和47.10±4.21[各自的p值：<0.0001])(表4)。

β細(xì)胞功能的胰島素homa：

在用式(i)的化合物進(jìn)行治療以后，增加了從胰島素衍生的β細(xì)胞功能的homa。在第6周和12周時，從胰島素衍生的β細(xì)胞功能的homa自基線的百分比變化是統(tǒng)計上顯著的(分別為52.50±14.94和45.64±6.22[p值分別為0.0010和<0.0001])(表5)。

療效結(jié)論

主要終點(diǎn)：

·在給予4mg式(i)的化合物之后的第6周和第12周，存在血清tg水平自基線的統(tǒng)計上的顯著降低(百分比變化分別為-40.98±4.89和-45.11±3.60[各自的p值：<0.0001])

次要終點(diǎn)：

·在給予4mg式(i)的化合物以后的第6周和第12周，沒有非hdl膽固醇水平自基線的統(tǒng)計上顯著的變化(p值分別為0.3963和0.4646)

·在給予4mg式(i)的化合物以后的第6周和第12周，存在hdl膽固醇水平自基線的統(tǒng)計上顯著的增加(百分比變化分別為29.92±5.73和34.56±6.13[各自的p值：<0.0001])。

·在給予4mg式(i)的化合物以后的第6周和第12周，存在從c肽衍生的β細(xì)胞功能的homa自基線的統(tǒng)計上顯著的增加(分別為68.25±25.58和71.67±16.20[p值分別為0.0104和<0.0001])。

·在用式(i)的化合物進(jìn)行治療以后的第6周和第12周，存在從胰島素衍生的胰島素抗性的homa自基線的統(tǒng)計上顯著的增加(百分比變化分別為29.10±3.94和42.65±3.79[各自的p值：<0.0001])。

因此，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物包括包含本發(fā)明的化合物的藥物組合物對于治療hiv患者的脂肪增生、皮下脂肪萎縮和代謝異常有效。