本發(fā)明涉及一種從麻黃果中提取維生素C的方法，屬于植物提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
麻黃，又稱麻黃草，草麻黃，中麻黃，木賊麻黃，多年生草本植物，主要分布在我國(guó)的沙漠戈壁，一般為天然野生，面積分布廣闊，它是一種珍貴的中藥。麻黃性平溫和，具有解表祛風(fēng)，理血鎮(zhèn)痛，散熱利咽，升高血壓等功效，是治療感冒，咳嗽，肺炎，支氣管炎，支氣管哮喘，關(guān)節(jié)炎，痛風(fēng)的良藥。盡管麻黃的藥用價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值都是眾人周知的，但是麻黃果果實(shí)的利用價(jià)值就鮮為人知了。
文獻(xiàn)[張建中，敖特根，蘇日娜，麻黃果營(yíng)養(yǎng)成分及其利用價(jià)值的初步研究，(J)，內(nèi)蒙古林學(xué)院學(xué)報(bào)]公開了麻黃果主要營(yíng)養(yǎng)成分有氨基酸、微量元素及維生素C等。其中，麻黃果中維生素C含量高達(dá)385.6mg/100g，是沙棘(甘肅)的2倍以上，且高于鮮棗(陜西涇陽)，分別高出蘋果梨(甘肅)、鴨梨(北京)和櫻桃(山東嶗山)的19、27和47倍。因此，麻黃果是很好的維生素C來源。雖然這樣，但是有關(guān)麻黃果提取維生素C的研究還是非常有限的，這在某程度上限制了麻黃果的應(yīng)用與發(fā)展。因此，探索與研究麻黃果提取維生素C是非常價(jià)值的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提出了一種從麻黃果中提取維生素C的方法。
一種從麻黃果中提取維生素C的方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的麻黃果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成100～120目，并加入麻黃果果實(shí)重量6～8倍的60～70％乙醇攪拌，攪拌5～10min后用膠體磨研磨30～40min，然后調(diào)節(jié)料液溫度為40～50℃，pH為5～6，同時(shí)加入占麻黃果重量0.04～0.06％的復(fù)合酶酶解2～3h，最后將酶解液于90～100℃保持6～8min滅菌后，置于超聲頻率40～50kHz，溫度30～40℃下進(jìn)行超聲提取，提取15～20min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量6～9倍的70～90％乙醇攪拌，攪拌10～15min后用膠體磨研磨40～60min，并置于超聲頻率30～40kHz，溫度30～40℃下進(jìn)行超聲提取，提取15～20min，過濾，得到濾液2和濾渣2，備用；
3)在步驟2)所得的濾渣2中加入濾渣2重量6～8倍的水?dāng)嚢?，攪?0～25min后用膠體磨研磨40～60min，置于超聲頻率40～50kHz，溫度30～40℃下進(jìn)行超聲提取，提取10～15min，過濾，得到濾液3，備用；
4)合并濾液1、2、3，并將濾液置于4000～5000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心10～15min，過濾，得到麻黃果提取液1，備用；
5)將步驟4)所得的麻黃果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，過濾，得到麻黃果提取液2，備用；
6)先將聚乙二醇加熱50～60℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入明膠、殼聚糖和步驟5)所得的麻黃果提取液2攪拌均勻，最后于0～5℃冷藏1～2d，過濾除去沉淀，得到麻黃果提取液3，備用；
7)將步驟6)所得的麻黃果提取液3依次通過孔徑為0.1～1μm的微濾膜、孔徑為0.01～0.2μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到麻黃果提取液4，備用；
8)將步驟7)所得的麻黃果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用30～40％乙醇水溶液、50～60％乙醇水溶液洗柱，收集50～60％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到麻黃果維生素C。
進(jìn)一步，
步驟1)中，所述的復(fù)合酶是由3～5重量份纖維素酶、2～4重量份果膠酶和0.2～0.4重量份蛋白酶混合而成。
進(jìn)一步，
步驟5)中，所述的CO2萃取，萃取壓力為40～50MPa，萃取溫度為40～45℃，出口分離溫度為40～50℃，萃取時(shí)間100～120min。
進(jìn)一步，
步驟6)中，所述的聚乙二醇的添加量為麻黃果提取液2的0.06～0.08重量份、明膠為0.02～0.04重量份、殼聚糖為0.03～0.05重量份。
進(jìn)一步，
步驟8)中，將步驟7)所得的麻黃果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用35％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到麻黃果維生素C。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
1、本發(fā)明采用膠體磨研磨、復(fù)合酶技術(shù)、超聲提取技術(shù)、CO2萃取技術(shù)以及濾膜和聚酰胺柱純化技術(shù)等，不僅使麻黃果能有效地保留維生素C，而且還能提高麻黃果維生素C的提取率和效率。其中，多次膠體磨研磨，提高了細(xì)胞破碎率，且粒度均勻，從而提高提取效率；濾膜和聚酰胺柱純化技術(shù)，提高了除雜率，從而提高提取物純化率。
2、本發(fā)明采用整個(gè)麻黃果的果實(shí)來提取麻黃果，使麻黃果維生素C的含量更高，同時(shí)達(dá)到了合理利用原料的目的，避免浪費(fèi)。
3、本發(fā)明在麻黃果提取液中加入聚乙二醇、明膠和殼聚糖，并結(jié)合冷藏處理，減少了麻黃果維生素C等有效成分因氧化等因素而導(dǎo)致的損失，同時(shí)，也延長(zhǎng)了麻黃果維生素C的貯存期。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
一種從麻黃果中提取維生素C的方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的麻黃果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成120目，并加入麻黃果果實(shí)重量7倍的65％乙醇攪拌，攪拌8min后用膠體磨研磨35min，然后調(diào)節(jié)料液溫度為45℃，pH為5.5，同時(shí)加入占麻黃果重量0.05％的復(fù)合酶酶解2.5h，其中，所述的復(fù)合酶是由4重量份纖維素酶、3重量份果膠酶和0.3重量份蛋白酶混合而成，最后將酶解液于95℃保持7min滅菌后，置于超聲頻率45kHz，溫度35℃下進(jìn)行超聲提取，提取18min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量8倍的80％乙醇攪拌，攪拌12min后用膠體磨研磨50min，并置于超聲頻率35kHz，溫度35℃下進(jìn)行超聲提取，提取18min，過濾，得到濾液2和濾渣2，備用；
3)在步驟2)所得的濾渣2中加入濾渣2重量7倍的水?dāng)嚢?，攪?2min后用膠體磨研磨50min，置于超聲頻率45kHz，溫度35℃下進(jìn)行超聲提取，提取12min，過濾，得到濾液3，備用；
4)合并濾液1、2、3，并將濾液置于4500轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心12min，過濾，得到麻黃果提取液1，備用；
5)將步驟4)所得的麻黃果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為45MPa，萃取溫度為42℃，出口分離溫度為45℃，萃取時(shí)間110min，過濾，得到麻黃果提取液2，備用；
6)先將聚乙二醇加熱55℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入明膠、殼聚糖和步驟5)所得的麻黃果提取液2攪拌均勻，其中，所述的聚乙二醇的添加量為麻黃果提取液2的0.07重量份、明膠為0.03重量份、殼聚糖為0.04重量份，最后于2℃冷藏1.5d，過濾除去沉淀，得到麻黃果提取液3，備用；
7)將步驟6)所得的麻黃果提取液3依次通過孔徑為1μm的微濾膜、孔徑為0.2μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到麻黃果提取液4，備用；
8)將步驟7)所得的麻黃果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用35％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到麻黃果維生素C。
經(jīng)提取得到的麻黃果維生素C采用高效液相色譜法檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，麻黃果維生素C的含量為379mg/100g。
實(shí)施例2
一種從麻黃果中提取維生素C的方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的麻黃果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成100目，并加入麻黃果果實(shí)重量6倍的60％乙醇攪拌，攪拌5min后用膠體磨研磨30min，然后調(diào)節(jié)料液溫度為40℃，pH為5，同時(shí)加入占麻黃果重量0.04％的復(fù)合酶酶解2h，其中，所述的復(fù)合酶是由3重量份纖維素酶、2重量份果膠酶和0.2重量份蛋白酶混合而成，最后將酶解液于90℃保持6min滅菌后，置于超聲頻率40kHz，溫度30℃下進(jìn)行超聲提取，提取15min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量6倍的70％乙醇攪拌，攪拌10min后用膠體磨研磨40min，并置于超聲頻率30kHz，溫度30℃下進(jìn)行超聲提取，提取15min，過濾，得到濾液2和濾渣2，備用；
3)在步驟2)所得的濾渣2中加入濾渣2重量6倍的水?dāng)嚢瑁瑪嚢?0min后用膠體磨研磨40min，置于超聲頻率40kHz，溫度30℃下進(jìn)行超聲提取，提取10min，過濾，得到濾液3，備用；
4)合并濾液1、2、3，并將濾液置于4000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心10min，過濾，得到麻黃果提取液1，備用；
5)將步驟4)所得的麻黃果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為40MPa，萃取溫度為40℃，出口分離溫度為40℃，萃取時(shí)間100min，過濾，得到麻黃果提取液2，備用；
6)先將聚乙二醇加熱50℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入明膠、殼聚糖和步驟5)所得的麻黃果提取液2攪拌均勻，其中，所述的聚乙二醇的添加量為麻黃果提取液2的0.06重量份、明膠為0.02重量份、殼聚糖為0.03重量份，最后于0℃冷藏1d，過濾除去沉淀，得到麻黃果提取液3，備用；
7)將步驟6)所得的麻黃果提取液3依次通過孔徑為0.1μm的微濾膜、孔徑為0.01μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到麻黃果提取液4，備用；
8)將步驟7)所得的麻黃果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用30％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液洗柱，收集50％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到麻黃果維生素C。
經(jīng)提取得到的麻黃果維生素C采用高效液相色譜法檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，麻黃果維生素C的含量為375mg/100g。
實(shí)施例3
一種從麻黃果中提取維生素C的方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的麻黃果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成120目，并加入麻黃果果實(shí)重量8倍的70％乙醇攪拌，攪拌10min后用膠體磨研磨40min，然后調(diào)節(jié)料液溫度為50℃，pH為6，同時(shí)加入占麻黃果重量0.06％的復(fù)合酶酶解3h，其中，所述的復(fù)合酶是由5重量份纖維素酶、4重量份果膠酶和0.4重量份蛋白酶混合而成，最后將酶解液于100℃保持8min滅菌后，置于超聲頻率50kHz，溫度40℃下進(jìn)行超聲提取，提取20min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量9倍的90％乙醇攪拌，攪拌15min后用膠體磨研磨60min，并置于超聲頻率40kHz，溫度40℃下進(jìn)行超聲提取，提取20min，過濾，得到濾液2和濾渣2，備用；
3)在步驟2)所得的濾渣2中加入濾渣2重量8倍的水?dāng)嚢?，攪?5min后用膠體磨研磨60min，置于超聲頻率50kHz，溫度40℃下進(jìn)行超聲提取，提取15min，過濾，得到濾液3，備用；
4)合并濾液1、2、3，并將濾液置于5000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心15min，過濾，得到麻黃果提取液1，備用；
5)將步驟4)所得的麻黃果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為50MPa，萃取溫度為45℃，出口分離溫度為50℃，萃取時(shí)間120min，過濾，得到麻黃果提取液2，備用；
6)先將聚乙二醇加熱60℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入明膠、殼聚糖和步驟5)所得的麻黃果提取液2攪拌均勻，其中，所述的聚乙二醇的添加量為麻黃果提取液2的0.08重量份、明膠為0.04重量份、殼聚糖為0.05重量份，最后于5℃冷藏2d，過濾除去沉淀，得到麻黃果提取液3，備用；
7)將步驟6)所得的麻黃果提取液3依次通過孔徑為1μm的微濾膜、孔徑為0.2μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到麻黃果提取液4，備用；
8)將步驟7)所得的麻黃果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用40％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液洗柱，收集60％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到麻黃果維生素C。
經(jīng)提取得到的麻黃果維生素C采用高效液相色譜法檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，麻黃果維生素C的含量為376mg/100g。
當(dāng)然，上面只是本發(fā)明優(yōu)選的具體實(shí)施方式作了詳細(xì)描述，并非以此限制本發(fā)明的實(shí)施范圍，凡依本發(fā)明的原理、構(gòu)造以及結(jié)構(gòu)所作的等效變化，均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。