技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種單質(zhì)粒系統(tǒng)的CRISPRi載體及其制備方法，dCas9載體的序列如SEQ?ID?NO.6所示，圖譜如附圖2所示，CRISPRi載體通過將含有sgRNA啟動子和sgRNA?scaffold的基因片段重組到經(jīng)酶切的dCas9載體中獲得。發(fā)明利用CRISPRi技術(shù)，將dCas9蛋白和sgRNA?scaffold構(gòu)建到一個質(zhì)粒系統(tǒng)中，實現(xiàn)在一個質(zhì)粒中同時表達(dá)sgRNA和dCas9蛋白。該系統(tǒng)僅需要一次構(gòu)建、一次轉(zhuǎn)化即可實現(xiàn)sgRNA和dCas9蛋白的表達(dá)，該法過程簡單、高效、快捷，大大簡化質(zhì)粒構(gòu)建流程，縮短實驗周期，提高工作效率。

技術(shù)研發(fā)人員：鐘云鵬;朱沛煌;李彥敏;楊平
受保護的技術(shù)使用者：蘇州泓迅生物科技有限公司
文檔號碼：201610839312
技術(shù)研發(fā)日：2016.09.22
技術(shù)公布日：2017.03.08