1.一種用于檢測4/91型傳染性支氣管炎病毒的特異性引物對,其特征在于,所述引物對的靶基因為傳染性支氣管炎病毒S1基因的高變區(qū)。
2.一種用于檢測4/91型傳染性支氣管炎病毒的特異性引物對,其特征在于,其核苷酸序列含有如SEQ ID NO.1-2所示的序列。
3.權(quán)利要求1或2所述特異性引物對在制備鑒別傳染性支氣管炎病毒血清型試劑盒中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求1或2所述特異性引物對在制備檢測4/91型傳染性支氣管炎病毒試劑盒中的應(yīng)用。
5.含有權(quán)利要求1或2所述特異性引物對的檢測試劑。
6.含有權(quán)利要求1或2所述特異性引物對的試劑盒。
7.如權(quán)利要求6所述的試劑盒,其特征在于,其工作程序為:94℃5min;94℃45s,58℃45s,72℃25s,30個循環(huán);72℃10min。
8.如權(quán)利要求6或7所述的試劑盒,其特征在于,對待測樣本進(jìn)行RT-PCR檢測后,擴(kuò)增產(chǎn)物若有377bp大小的條帶,則待測樣本中含有4/91型傳染性支氣管炎病毒。
9.一種檢測4/91型傳染性支氣管炎病毒的非診斷目的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)提取待測樣本的總RNA,反轉(zhuǎn)錄,得到cDNA;
(2)利用權(quán)利要求1或2所述特異性引物對對步驟(1)的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,根據(jù)擴(kuò)增結(jié)果判斷待測樣本中是否有4/91型傳染性支氣管炎病毒。
10.如權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,步驟(2)中陽性樣本擴(kuò)增的目的片段為377bp。