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選擇性分離核酸的方法及其套組與流程

文檔序號(hào):12167081閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種選擇性分離核酸的方法,其包含有下列步驟:

(a)混合樣本核酸與結(jié)合緩沖液以產(chǎn)生混合溶液,其中所述樣本核酸具有特定大小的核酸片段,所述混合溶液具有離液鹽,以及單價(jià)離子鹽或擁擠試劑至少其中之一;

(b)使所述混合溶液流過固相載體,藉由所述單價(jià)離子鹽濃度的高低來控制將欲保留的特定大小的核酸片段結(jié)合于所述固相載體,其中當(dāng)所述單價(jià)離子鹽濃度愈高則保留愈大的核酸片段及當(dāng)所述單價(jià)離子鹽濃度愈低則保留大范圍的核酸片段,其中所述大范圍的核酸片段包含大尺寸的核酸片段及小尺寸的核酸片段;

(c)使沖洗緩沖液流過所述固相載體以清除未與所述固相載體結(jié)合的物質(zhì);以及

(d)使水溶液流過所述固相載體以回收所述欲保留的特定片段大小的核酸片段。

2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(a)中的所述離液鹽為鹽酸胍、異硫氰酸胍、碘化鈉或過氯酸鈉。

3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(a)中的所述單價(jià)離子鹽為氯化鋰、醋酸鋰、醋酸鈉、醋酸鉀或醋酸銨。

4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述步驟(a)中的所述擁擠試劑為乙醇、異丙醇或聚乙二醇。

5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述固相載體為硅質(zhì)濾柱或硅質(zhì)磁珠。

6.一種選擇性分離核酸的方法,其包含有下列步驟:

(a)混合樣本核酸與第一結(jié)合緩沖液以產(chǎn)生第一混合溶液,其中所述樣本核酸具有特定大小的核酸片段,所述第一結(jié)合緩沖液具有離液鹽;

(b)使所述第一混合液流過第一固相載體,以取得一次篩選液,其中所述一次篩選液含有所述特定大小的核酸片段;

(c)混合所述一次篩選液與第二結(jié)合緩沖液以產(chǎn)生第二混合溶液,其中所述第二混合溶液具有所述離液鹽,以及單價(jià)離子鹽或擁擠試劑至少其中之一;

(d)使所述第二混合溶液流過第二固相載體,藉由所述單價(jià)離子鹽濃度的高低來控制將欲保留的所述特定大小的核酸片段結(jié)合于所述第二固相載體,當(dāng)所述單價(jià)離子鹽濃度愈高則保留愈大的核酸片段及當(dāng)所述單價(jià)離子鹽濃度愈低則保留大范圍的核酸片段,其中所述大范圍的核酸片段包含大尺寸的核酸片段及小尺寸的核酸片段;

(e)使沖洗緩沖液流過所述第二固相載體以清除未與所述第二固相載體結(jié)合的物質(zhì);以及

(f)使水溶液流過所述第二固相載體以回收所述欲保留的特定片段大小的核酸片段。

7.如權(quán)利要求6項(xiàng)所述的方法,其特征在于所述步驟(a)中的所述離液鹽為鹽酸胍、異硫氰酸胍、碘化鈉或過氯酸鈉。

8.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于所述步驟(c)中的所述單價(jià)離子鹽為氯化鋰、醋酸鋰、醋酸鈉、醋酸鉀或醋酸銨。

9.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于所述步驟(c)中的所述擁擠試劑為乙醇、異丙醇或聚乙二醇。

10.一種選擇性分離核酸之套組,包含結(jié)合緩沖液,具有離液鹽,以及單價(jià)離子鹽或擁擠試劑至少其中之一以及固相載體,其特征在于:

當(dāng)所述單價(jià)離子鹽濃度愈高則保留愈大的核酸片段及當(dāng)所述單價(jià)離子鹽濃度愈低則保留大范圍的核酸片段,其中所述大范圍的核酸片段包含大尺寸的核酸片段及小尺寸的核酸片段。

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