本發(fā)明屬于食品加工領(lǐng)域，特別是一種緩解體力疲勞保健酒及其制備方法。

背景技術(shù)：

疲勞可使工作效率降低，對事物反應(yīng)遲鈍。疲勞出現(xiàn)后若得不到及時休整，時間長了就會產(chǎn)生過勞進而導(dǎo)致健康受損。

疲勞的本質(zhì)只是一種生理性的改變，一般情況下，可以經(jīng)過適當(dāng)?shù)男菹⒑退幬镎{(diào)理便可以恢復(fù)或減輕。但傳統(tǒng)的西醫(yī)抗疲勞藥物副作用較大，用保健食品改善疲勞癥狀是最為恰當(dāng)?shù)倪x擇。因此，國內(nèi)外許多專家學(xué)者紛紛將目光轉(zhuǎn)移至改善這一病癥現(xiàn)象的領(lǐng)域。

目前市場上具有的品類繁多的瑪咖酒，但均屬于普通食品。生產(chǎn)工藝多采用傳統(tǒng)浸泡的方式，由于瑪咖本身具有獨特的刺激性味道，這些瑪咖酒的口感普遍較差，并且不能保證產(chǎn)品的功能。因此，發(fā)明立足研發(fā)一款集安全、優(yōu)良口感、明確保健功能于一體的保健酒。

通過專利文獻(xiàn)和非專利文獻(xiàn)檢索，及市場調(diào)研，還尚未發(fā)現(xiàn)有將瑪咖與枸杞子、西洋參、黃芪混合后得到保健酒的文獻(xiàn)報導(dǎo)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是發(fā)揮瑪咖與枸杞子、西洋參、黃芪的優(yōu)點，提供一種以瑪咖為主，添加中藥材枸杞子、西洋參、黃芪制成的具有緩解體力疲勞功效的保健酒。

本發(fā)明緩解體力疲勞保健酒，其特征在于：包括如下原料藥及白酒：

原料藥，按重量配比計：瑪咖1～5份，枸杞子0.2～0.5份，西洋參0.2～0.5份，黃芪0.2～0.5份；

白酒適量。

進一步優(yōu)選，本發(fā)明緩解體力疲勞保健酒，其特征在于：包括如下原料藥及白酒：

原料藥，按重量配比計：瑪咖1～5份，枸杞子0.2～0.5份，西洋參0.2～0.5份，黃芪0.2～0.5份；白酒93.5～98.4份。

本發(fā)明技術(shù)方案中，所述白酒為濃香型白酒。

緩解體力疲勞保健酒酒精度為30～38％vol。

本發(fā)明緩解體力疲勞保健酒的制備方法，包括如下步驟：

(1)稱取原料藥；按重量配比計：瑪咖1～5份，枸杞子0.2～0.5份，西洋參0.2～0.5份，黃芪0.2～0.5份；

(2)粉碎西洋參、瑪咖、黃芪，至少過20目篩；

(3)制備西洋參、瑪咖提取液：取步驟(2)所得西洋參、瑪咖采用白酒滲漉，得滲濾液，滲濾液冷藏過濾得瑪咖西洋參提取液；

(4)制備黃芪、枸杞子提取液：取枸杞子和步驟(2)所得黃芪，加10～20倍量水浸泡提取，過濾得黃芪、枸杞子提取液；

(5)步驟(3)所得西洋參、瑪咖提取液、步驟(4)所得黃芪、枸杞子提取液，加白酒調(diào)整酒精度至規(guī)定值即可。

其中，步驟(3)所述滲漉條件滿足以下至少任意一項：

步驟(3)加白酒1～1.5倍量的白酒潤濕；

步驟(3)所述加白酒潤濕時間為1～2h；優(yōu)選的，所述加白酒潤濕時間為1h；

步驟(3)所述白酒酒精度為40～60％vol；

步驟(3)滲漉時，物料裝填量為滲漉罐的1/3～2/3，徑高比1:2～1:3；

步驟(3)滲漉時，按照料液比1:3～1:4白酒浸漬1～2天后滲漉；

步驟(3)以5～15mL/min.kg速度收集滲漉液；

步驟(3)收集料液比1:6～1:10的滲漉液；

步驟(3)滲濾液冷藏的溫度為0～4℃；

步驟(3)滲濾液冷藏的時間為3～7天；

步驟(3)滲濾液冷藏后過濾采用微孔濾膜過濾；優(yōu)選采用0.2～1.0μm微孔濾膜過濾。

其中，步驟(4)制備黃芪、枸杞子提取液至少滿足以下任意一項：

步驟(4)所述浸泡提取為常壓浸提；

步驟(4)所述浸泡提取的浸泡提取溫度為60～80℃；

步驟(4)所述浸泡提取的浸泡提取次數(shù)為2～3次(優(yōu)選2次)；

步驟(4)所述浸泡提取的每次浸提時間2～5h；

步驟(4)所述浸泡提取過濾所得濾液濃縮。

其中，步驟(5)所述調(diào)整酒精度至30～38％vol。

具體的，本發(fā)明保健酒制備方法，按重量配比稱取各原料藥及白酒，采用如下步驟制備：

1.將瑪咖、西洋參粉碎，過20目篩；

2.稱取瑪咖和西洋參粉，混合均勻，加入1～1.5倍量的40～60％vol濃香型白酒潤濕1～2h，裝入滲漉罐，物料裝填量為滲漉罐的1/3～2/3，徑高比1:2～1:3，按照料液比1:3～1:4加入40～60％vol濃香型白酒密閉浸漬1～2天，開始滲漉，以5～15mL/min.kg速度收集料液比1:6～1:10的滲漉液；

3.將滲濾液于0～4℃冷藏室中冷藏3～7天，0.2～1.0μm微孔濾膜過濾得瑪咖西洋參提取液；

4.將黃芪粉碎，過20目篩；

5.稱取枸杞子和黃芪粉，混合均勻，加入10～20倍量的純化水，在60～80℃時常壓浸提，浸提2～3次，每次浸提2～5h，過濾，合并濾液，濃縮得枸杞子黃芪提取液；

6.將瑪咖西洋參提取液、枸杞子黃芪提取液，加白酒調(diào)整酒精度至規(guī)定值即可。

為了配合產(chǎn)品不同酒精度需求，可加入白酒調(diào)整酒精度。如將瑪咖西洋參提取液、枸杞子黃芪提取液加入到白酒中，調(diào)整酒精度為30～38％vol，并定容至1000L，過濾，灌裝，得到30～38％vol的緩解體力疲勞保健酒。

本發(fā)明采用各原料藥的原因如下：

瑪咖含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、還原糖、礦物質(zhì)、不飽和脂肪酸，其中亞麻酸和亞油酸對人體健康極為有利?，斂Ц煞鄹缓被?特別是支鏈氨基酸和牛磺酸)、礦物質(zhì)鈣、鎂、鋅等多種具有抗疲勞作用的化學(xué)成分。除了常規(guī)營養(yǎng)成分以外，在新陳代謝中還形成特有的具有生物活性的功效成分，如生物堿、瑪咖酰胺和瑪咖烯系列物、異硫氰酸酯、芥子油苷、黃烷醇等。高營養(yǎng)價值、合理的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)以及多種具有生物活性的次生代謝產(chǎn)物使瑪咖具備多種保健功能。傳統(tǒng)上可用于增強精力，提高生育力，改善性功能，治療更年期綜合征、風(fēng)濕癥、抑郁癥、貧血，另外還有抗癌和抗白血癥的功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，瑪咖具有抗疲勞、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種獨特功效。

枸杞子為茄科植物寧夏枸杞的干燥成熟果實，其味甘，性平。作為傳統(tǒng)的藥食兩源物質(zhì)，是我國傳統(tǒng)的名貴中藥材，素有“紅寶”美稱?；瘜W(xué)成分主要包括色素類、黃酮類和多糖類化合物，另外還有甜菜堿、維生素C、食若亭、多種氨基酸及多種微量元素，其主要有效成分是枸杞多糖。現(xiàn)已證實枸杞子具有調(diào)節(jié)機體免疫功能、能有效抑制腫瘤生長和細(xì)胞突變、具有抗疲勞、延緩衰老、抗脂肪肝、調(diào)節(jié)血脂和血糖、促進造血功能等方面的作用。枸杞子屬于天然中草藥，在我國有幾千年的藥用及食用歷史，長期使用無毒副作用。

西洋參為五加科植物西洋參的干燥根，味甘、微苦，性涼。西洋參中含十余種人參皂甙、少量揮發(fā)油、糖類、氨基酸、無機元素等，能調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮與抑制，以抑制較為突出；能抗疲勞、抗缺氧、增強機體適應(yīng)能力；有抗心律失常、抗心肌缺血、增強心肌收縮力的作用；有促進腎上腺皮質(zhì)激素分泌的作用；能增強機體免疫功能；有抗利尿及止血作用。

黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。性微溫，味甘。目前研究發(fā)現(xiàn)其含有皂苷、蔗糖、多糖、多種氨基酸、葉酸及硒、鋅、銅等多種微量元素，具有保護心肌細(xì)胞、強心、抗應(yīng)激、增強機體免疫力等作用。

疲勞大多屬于氣血不足、臟腑功能衰弱所致的虛證。補益是治療虛證的總原則，補法是補養(yǎng)人體氣、血、陰、陽的不足，促進衰憊的臟腑功能恢復(fù)，重歸于平衡協(xié)調(diào)。進補能使體弱者健康水平提高，體質(zhì)增強，促進虛弱勞損狀況趨向好轉(zhuǎn)或痊愈。黃芪是一種重要的傳統(tǒng)補益中藥，是用途最廣、用量最大的補氣藥，有人將其列為補氣首藥，同時黃芪還具有生津養(yǎng)血的功效。西洋參與人參在藥性方面有寒溫之別，西洋參最適宜于氣陰兩虛有熱的病人，其獨特之處在于不熱不燥，凡不適合人參治療和熱補的人均可用西洋參。“參芪”是中醫(yī)的經(jīng)典配伍，兩者均屬于補氣藥，西洋參功效補氣養(yǎng)陰，清熱生津，黃芪功效補氣健脾、升陽舉陷、益衛(wèi)固表、利尿消腫、托毒生肌，兩者合用能增強補氣的效果。枸杞子功效顯著，古藥書《本草匯言》所言：“枸杞能使氣可充(補氣)、血可補(補血)、陽可生(壯陽)、陰可長(滋陰)、火可降(降火)、風(fēng)可祛(治風(fēng)濕)，有十全之妙用也?！敝嗅t(yī)認(rèn)為氣與血是辯證關(guān)系，氣為血之帥，血又是氣之母，黃芪西洋參主要是補氣，枸杞子兼有補氣補血的功效。

中醫(yī)認(rèn)為人體的健康狀況與其“本”的強弱有密切關(guān)系，補虛關(guān)鍵在于培元固本。所謂培養(yǎng)人體之本，扶持正氣，主要在于補脾和補腎，歷代醫(yī)家認(rèn)為人體的勞損和衰老的治療總則在于補腎與健脾。配方中黃芪歸脾經(jīng)，西洋參和枸杞子歸腎經(jīng)，可見這三者配伍具有很好的補腎健脾功效。

瑪咖干粉富含氨基酸(特別是支鏈氨基酸和?；撬?、礦物質(zhì)鈣、鎂、鋅等多種具有抗疲勞作用的化學(xué)成分。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，瑪咖具有抗疲勞、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種獨特功效。研究發(fā)現(xiàn)瑪咖干粉能明顯延長小鼠游泳時間，降低血清尿素氮水平,可增加小鼠的肝糖原儲備，降低運動前后血乳酸變化值。

瑪咖、黃芪、西洋參、枸杞子均具有很好的緩解體力疲勞功效，本產(chǎn)品以瑪咖為主要功效原料，輔以黃芪、西洋參和枸杞子，協(xié)同強化緩解體力疲勞功能。

本發(fā)明的以天然產(chǎn)物為原料，口感純正，不含食品添加劑，無毒無副作用。

本發(fā)明生產(chǎn)工藝簡單，瑪咖西洋參采用常溫提取，充分發(fā)揮滲漉法的優(yōu)勢，既保證了功效成分(如：生物堿、皂苷)的穩(wěn)定，又獲得較高的提取率；枸杞子黃芪采用常規(guī)的溫水提取，能充分提取其中的功效成分：粗多糖。工藝研究相關(guān)實驗數(shù)據(jù)如下。配方中各原料按照功效成分的性質(zhì)，分類選擇不同的提取方式，保證其較高的提取率。

附圖說明

圖1原料粒度對總皂苷、總生物堿提取的影響。

圖2白酒度數(shù)對總皂苷、總生物堿提取的影響。

圖3滲漉速度對總皂苷、總生物堿提取的影響。

圖4滲濾液收集體積對總皂苷、總生物堿提取的影響。

圖5提取時間對粗多糖提取的影響。

圖6提取溫度對粗多糖提取的影響。

圖7料液比對粗多糖提取的影響。

圖8提取次數(shù)對粗多糖提取的影響。

具體實施方式

以下是本發(fā)明緩解體力疲勞保健酒的制備方法篩選實驗及功能實驗。

一、瑪咖西洋參提取單因素實驗

(1)原料粒度對總皂苷、總生物堿提取的影響

將瑪咖和西洋參分別粉碎成5種不同粒徑，分別是5mm、2.5mm、1.6mm(12目)、0.9mm(20目)、0.3mm(60目)。準(zhǔn)確稱取不同粒徑的瑪咖粉30g和西洋參粉3g，同粒徑的瑪咖粉和西洋參粉混合均勻，用料液比為1:1的60％vol白酒潤濕2h，裝滲漉柱，浸漬24h，以0.6mL/min左右的速度收集滲濾液198mL。檢測總皂苷、總生物堿的含量，計算提取率，結(jié)果見圖1。

由圖1可知，隨著原料粉碎粒度的降低，原料的表面積增加，與溶劑的接觸面積相應(yīng)增加，有利于功效成分的溶出，總皂苷、總生物堿的提取率逐漸升高。但是，如果原料過細(xì)，物料床層越密，阻礙滲漉操作。原料粒度在20目時，功效成分提取率達(dá)到較高的水平，又能保證滲漉物料的緊密度適中，方便進行滲漉。因此，滲漉時原料粒度選擇為20目。

(2)白酒度數(shù)對總皂苷、總生物堿提取的影響

準(zhǔn)確稱取粉碎至20目的瑪咖粉30g和西洋參粉3g，混合均勻，稱取5份，分別用33mL的30、40、50、60、68％vol白酒潤濕2h，裝滲漉柱，浸漬24h，以0.5mL/min左右的速度收集滲濾液198mL。檢測總皂苷、總生物堿的含量，計算提取率，結(jié)果見圖2。

由圖2可知，隨著白酒度數(shù)的升高，總皂苷、總生物堿均呈現(xiàn)先升高、逐漸穩(wěn)定、然后略微減低的過程。總皂苷提取率在白酒度數(shù)為50％vol時，達(dá)到最大值44.37％；總生物堿提取率在在白酒度數(shù)為60％vol時達(dá)到最大值58.87％。在白酒度數(shù)為50％vol時，總生物堿提取率也能夠達(dá)到57.93％。因此選擇40％vol、50％vol、60％vol為正交實驗的白酒度數(shù)。

(3)滲漉速度對總皂苷、總生物堿提取的影響

準(zhǔn)確稱取粉碎至20目的瑪咖粉30g和西洋參粉3g，混合均勻，稱取5份，用33mL 50％vol白酒潤濕2h，裝滲漉柱，浸漬24h，分別以0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL/min的速度收集滲漉液198mL。檢測總皂苷、總生物堿的含量，計算提取率，結(jié)果見圖3。

由圖3可知，滲漉速度對總皂苷、總生物堿提取率的影響較小，0.3mL/min時總皂苷、總生物堿提取率都相對較高時，故選擇0.2mL/min、0.3mL/min、0.4mL/min為正交實驗的滲漉速度。

(4)滲濾液收集體積對總皂苷、總生物堿提取的影響

準(zhǔn)確稱取粉碎至20目的瑪咖粉30g和西洋參粉3g，混合均勻，稱取5份，用33mL 50％vol白酒潤濕2h，裝滲漉柱，浸漬24h，滲漉速度0.3mL/min，分別收集滲漉液198、264、330、396、462mL(滲濾液體積依次為物料的6、8、10、12、14倍)。檢測總皂苷、總生物堿的含量，計算提取率，結(jié)果見圖4。

由圖4可知，滲濾液收集體積對功效成分的提取率影響很大，隨著滲濾液收集體積的不斷增加，功效成分的提取率升高，并逐漸達(dá)到穩(wěn)定。當(dāng)滲濾液收集體積達(dá)到10倍，功效成分已經(jīng)溶出了很大部分，總皂苷提取率達(dá)到81.83％、總生物堿提取率達(dá)到75.11％，再增加滲濾液收集體積，功效成分的提取率升高程度變緩。因此選擇8倍、10倍、12倍為正交實驗的滲漉液收集體積。

二、瑪咖西洋參提取正交實驗

在單因素實驗的基礎(chǔ)上，確定以白酒度數(shù)、滲漉速度、滲濾液收集體積作為正交實驗優(yōu)化的因素。3個因素各選擇三個較好水平，采用L9(34)正交表，進行正交實驗。三個較好水平分別為白酒度數(shù)：40、50、60％vol，滲漉速度：0.2、0.3、0.4mL/min，滲濾液收集體積：8、10、12倍，正交實驗的表頭設(shè)計見表1，正交實驗結(jié)果如表2所示。

表1正交實驗的表頭設(shè)計

表2總皂苷、總生物堿滲漉L9(34)正交實驗結(jié)果

原料滲漉提取總皂苷正交實驗的極差分析和方差分析見表3、表4。由極差分析表3可知，這3個因素影響總皂苷提取率的強弱依次為：滲漉體積(C)＞白酒度數(shù)(A)＞滲漉速度(B)；最優(yōu)條件是A₃B₃C₃，即：白酒度數(shù)60％vol、滲漉速度0.4mL/min、滲漉液收集體積為12倍。由方差分析表4可知，白酒度數(shù)(A)、滲漉體積(C)對總皂苷提取率的影響極顯著(P＜0.01)，而滲漉速度(B)對總皂苷提取率的影響不顯著(P＞0.10)。

原料滲漉提取總生物堿正交實驗的極差分析和方差分析見表5、表6。由極差分析表5可知，這3個因素影響總生物堿提取率的強弱依次為：滲漉體積(C)＞白酒度數(shù)(A)＞滲漉速度(B)；最優(yōu)條件是A₂B₁C₃，即：白酒度數(shù)50％vol、滲漉速度0.2mL/min、滲漉液收集體積為12倍。由方差分析表6可知，白酒度數(shù)(A)、滲漉體積(C)對總生物堿提取率的影響顯著(P＜0.10)，而滲漉速度(B)對總生物堿提取率的影響不顯著(P＞0.10)。

由正交實驗結(jié)果可知，總皂苷提取的最優(yōu)條件是A₃B₃C₃，總生物堿提取的最優(yōu)條件是A₂B₁C₃。3個因素中滲漉速度(B)對兩種成分提取的影響最小，為了提高生產(chǎn)的效率，選擇較快的滲漉速度，即B₃。白酒度數(shù)選擇為50％vol。滲濾液收集體積為10倍時，功效成分提取率已經(jīng)能滿足要求，為了降低溶劑用量，滲濾液收集體積選擇為10倍。所以最終提取條件是A₂B₃C₂，即：乙醇濃度50％、滲漉速度0.4mL/min、滲漉液收集體積為10倍，驗證實驗中此條件下總皂苷提取率為81.7％、總生物堿提取率為75.8％。

表3總皂苷滲漉正交實驗極差分析

表4總皂苷滲漉正交實驗方差分析

表5總生物堿滲漉正交實驗極差分析

表6總生物堿滲漉正交實驗方差分析

三、枸杞子黃芪提取單因素實驗

(1)提取時間對粗多糖提取率的影響

在料液比為1:15和提取溫度70℃下，提取兩次，每次提取時間分別在1h，2h，3h，4h時間下進行粗多糖的提取。檢測粗多糖含量，計算粗多糖提取率，結(jié)果見圖5。

由圖5可見，加熱時間的不斷增加，粗多糖提取率在1～3h之間呈直線上升，在3h以后提取率增長不明顯，過長的提取時間會增加能耗，因此選擇2h、3h、4h作為正交實驗的時間。

(2)提取溫度對粗多糖提取率的影響

在料液比為1:20，提取兩次，每次提取時間2h條件下，分別在60℃，70℃，80℃，90℃進行粗多糖的提取。檢測粗多糖含量，計算粗多糖提取率，結(jié)果見圖6。

由圖6可見，隨著提取溫度的不斷升高，提取率在不斷增大，在80℃以前增加幅度比較顯著，但是80℃以后下降，較高的溫度有可能對多糖的活性和結(jié)構(gòu)有一定的影響，還有高溫也會耗用大量的能源不利于大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)，選70℃、80℃、90℃做為提取粗多糖的正交實驗溫度。

(3)料液比對粗多糖提取率的影響

在提取溫度70℃和提取時間2h下，提取兩次，分別在1:10，1:15，1:20，1:25料液比下進行粗多糖的提取。檢測粗多糖含量，計算粗多糖提取率，結(jié)果見圖7。

由圖7可見，隨著料液比的增大，多糖的提取率幾乎直線向上增長，但是1:20后增長不明顯，考慮到太大的料液比不利于工業(yè)化生產(chǎn)。因此選擇料液比在1:15、1:20、1:25作為較正交實驗的料液比。

四、枸杞子黃芪提取正交實驗

在單因素實驗的基礎(chǔ)上，確定以提取溫度、料液比、提取時間作為正交實驗優(yōu)化的因素。3個因素各選擇三個較好水平，采用L9(3⁴)正交表，進行正交實驗。三個較好水平分別為提取溫度：70、80、90℃，料液比：1:15、1:20、1:25，提取時間：2、3、4h，正交實驗的表頭設(shè)計見表7，正交實驗結(jié)果如表8所示。

表7正交實驗的表頭設(shè)計

表8粗多糖水提L9(3⁴)正交實驗結(jié)果

表9粗多糖水提正交實驗方差分析

由表8可知，粗多糖的提取最佳條件為A₂B₂C₂：提取溫度80℃、提取時間3h、提取料液比1:20。在驗證實驗中，一次提取率累計為69.1％。方差分析表9可知，3個因素對粗多糖提取率的影響不顯著(P＞0.10)。

五、枸杞子黃芪提取次數(shù)對粗多糖提取率的影響

按照正交實驗得出的最優(yōu)條件，即在提取溫度80℃、提取時間3h、料液比為1:20條件下，提取3次，每次檢測粗多糖含量，計算粗多糖提取率。結(jié)果如圖8所示：第一次提取率最高達(dá)到了71.6％，第二次下降到10.2％，第三次為2.97％。第三次幾乎沒有提取價值，確定提取次數(shù)為兩次。

根據(jù)功效成分、穩(wěn)定性實驗檢測結(jié)果來看，本發(fā)明緩解體力疲勞保健酒中生物堿和皂苷穩(wěn)定性好，且檢測方法變異度較小。產(chǎn)品功效顯著，具有較大的市場發(fā)展?jié)摿Α?/p>

六、本發(fā)明緩解體力疲勞保健酒的抗疲勞功能實驗

1材料和方法

樣品：實驗使用3.5倍濃縮液，酒精度為15％(v/v)。實驗前基酒加蒸餾水配制成15％(v/v)基酒，再用15％(v/v)基酒作溶劑配制受試物，冷藏保存。

劑量選擇及受試物給予方式：實驗設(shè)4.76ml/kg.BW、9.52ml/kg.BW、14.29ml/kg.BW三個劑量組(相當(dāng)于人體推薦量的10、20、30倍)。取3.5倍濃縮液的受試物60ml、119ml、179ml，先依次加15％(v/v)的基酒至250ml混勻，冰柜保存，用完再配。每天按20ml/kg.BW經(jīng)口灌胃給予一次，至少連續(xù)給予30天。另設(shè)15％(v/v)基酒對照組及蒸餾水空白對照組。實驗分為一、二、三、四組，每組50只動物。

1.1負(fù)重游泳實驗：將實驗一組各劑量組的小鼠尾根部負(fù)荷5％體重的細(xì)保險絲，實驗時將小鼠放入水溫25±1.0℃，水深30cm的游泳箱中游泳，記錄小鼠從游泳開始至死亡的時間，計算小鼠的游泳時間。

1.2血清尿素測定：將實驗二組各劑量組的小鼠放入溫度30℃的水中不負(fù)重游泳90min，休息60min之后，拔眼球采血約0.5ml，取血清按試劑盒說明書操作，用AU400全自動生化分析儀及德國奧林巴斯(歐洲)診斷有限公司提供的試劑盒測定血清尿素含量。

1.3肝糖原測定：將實驗三組各劑量組的小鼠末次給受試物30min后，立即處死動物取肝臟經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，稱取約100mg肝臟，按《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的蒽酮法測定肝糖原的含量。

1.4血乳酸測定：將實驗四組各劑量組的小鼠，不負(fù)重在溫度30℃的水中游泳10min后停止。乳酸測定方法：于游泳前、游泳后0min及游泳后休息20min各采血20μl，分別加入50μl溶血劑振蕩混勻后，再用SBA-40C型生物傳感分析儀測定。測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)3.5即為血乳酸含量。

2實驗結(jié)果

2.1緩解體力疲勞保健酒對小鼠負(fù)重游泳時間的影響：

由表10可見，15％(v/v)基酒對照組的負(fù)重游泳時間與蒸餾水對照組比較，經(jīng)T檢驗差無顯著性異(P>0.05)。三個劑量組小鼠的負(fù)重游泳時間與15％(v/v)基酒對照組比較，經(jīng)方差分析，中、高劑量組能顯著延長小鼠負(fù)重游泳時間(P<0.05、P<0.05)。

表10緩解體力疲勞保健酒對小鼠負(fù)重游泳時間的影響

2.2緩解體力疲勞保健酒對小鼠運動后血清尿素的影響：

由表11可見，15％(v/v)基酒對照組小鼠運動后的血清尿素與蒸餾水對照組比較，經(jīng)T檢驗差異無顯著性(P>0.05)。三個劑量組小鼠運動后的血清尿素與15％(v/v)基酒對照組比較，經(jīng)方差分析，低、中劑量組的血清尿素顯著降低(P<0.05、P<0.05)。

表11緩解體力疲勞保健酒對小鼠運動后血清尿素的影響

2.3緩解體力疲勞保健酒對小鼠肝糖原含量的影響：

由表12可見，15％(v/v)基酒對照組小鼠的肝糖原含量與蒸餾水對照組比較，經(jīng)T檢驗差異無顯著性(P>0.05)。三個劑量組小鼠的肝糖原含量與15％(v/v)基酒對照組比較，經(jīng)方差分析，中、高劑量組肝糖原顯著升高(P<0.05、P<0.01)。

表12緩解體力疲勞保健酒對小鼠肝糖原的影響

2.4緩解體力疲勞保健酒對小鼠運動后血乳酸水平的影響：

由表13可見，15％(v/v)基酒對照組小鼠運動后的血乳酸曲線面積與蒸餾水對照組比較，經(jīng)T檢驗差異無顯著性(P>0.05)。三個劑量組的血乳酸曲線下面積與15％(v/v)基酒對照組比較，經(jīng)方差分析，三個劑量組的血乳酸曲線下面積與基酒對照組之間無顯著性差異(P>0.05)。

表13緩解體力疲勞保健酒對小鼠運動后血乳酸變化的影響

3小結(jié)

緩解體力疲勞保健酒至少連續(xù)30天經(jīng)口灌胃給予動物后，三個劑量組的負(fù)重游泳時間與15％(v/v)基酒對照組比較，中、高劑量組能顯著延長小鼠負(fù)重游泳時間，實驗結(jié)果為陽性；三個劑量組小鼠運動后的血乳酸曲線面積與15％(v/v)基酒對照組之間無顯著差異，實驗結(jié)果為陰性；三個劑量組的小鼠肝糖原含量與15％(v/v)基酒對照組比較，中、高劑量組能顯著升高小鼠肝糖原含量，實驗結(jié)果為陽性；三個劑量組的血清尿素含量與15％(v/v)基酒對照組比較，低、中劑量組的血清尿素顯著降低，實驗結(jié)果為陽性。由此可見，緩解體力疲勞保健酒對動物具有緩解體力疲勞功能。

下面結(jié)合實施例進一步描述本發(fā)明，本發(fā)明不僅限于所述實施例。

實施例一

1.將瑪咖、西洋參粉碎，過20目篩；

2.稱取瑪咖粉40kg和西洋參粉2kg，混合均勻，加入1倍量的60％vol濃香型白酒潤濕1h，裝入滲漉罐，物料裝填量為滲漉罐的2/3，徑高比1:3，按照料液比1:4加入60％vol濃香型白酒密閉浸漬2天，開始滲漉，以5mL/min.kg速度收集料液比1:8的滲漉液；

3.將滲濾液于4℃冷藏室中冷藏7天，0.6μm微孔濾膜過濾得瑪咖西洋參提取液；

4.將黃芪粉碎，過20目篩；

5.稱取枸杞子2kg和黃芪粉2kg，混合均勻，加入20倍量的純化水，在60℃時常壓浸提，浸提2次，每次浸提5h，過濾，合并濾液，濃縮得枸杞子黃芪提取液；

6.將瑪咖西洋參提取液、枸杞子黃芪提取液按加入到濃香型白酒中，調(diào)整酒精度為38％vol，并定容至1000L，過濾，灌裝，得到38％vol的緩解體力疲勞保健酒。

實施例二

1.將瑪咖、西洋參粉碎，過20目篩；

2.稱取瑪咖粉50kg和西洋參粉5kg，混合均勻，加入1倍量的60％vol濃香型白酒潤濕1h，裝入滲漉罐，物料裝填量為滲漉罐的2/3，徑高比1:3，按照料液比1:4加入60％vol濃香型白酒密閉浸漬2天，開始滲漉，以10mL/min.kg速度收集料液比1:10的滲漉液；

3.將滲濾液于4℃冷藏室中冷藏7天，0.6μm微孔濾膜過濾得瑪咖西洋參提取液；

4.將黃芪粉碎，過20目篩；

5.稱取枸杞子5kg和黃芪粉5kg，混合均勻，加入20倍量的純化水，在70℃時常壓浸提，浸提2次，每次浸提5h，過濾，合并濾液，濃縮得枸杞子黃芪提取液；

6.將瑪咖西洋參提取液、枸杞子黃芪提取液按加入到濃香型白酒中，調(diào)整酒精度為36％vol，并定容至1000L，過濾，灌裝，得到36％vol的緩解體力疲勞保健酒。

實施例三

1.將瑪咖、西洋參粉碎，過20目篩；

2.稱取瑪咖粉30kg和西洋參粉5kg，混合均勻，加入1.5倍量的60％vol濃香型白酒潤濕1h，裝入滲漉罐，物料裝填量為滲漉罐的2/3，徑高比1:3，按照料液比1:4加入60％vol濃香型白酒密閉浸漬2天，開始滲漉，以15mL/min.kg速度收集料液比1:10的滲漉液；

3.將滲濾液于4℃冷藏室中冷藏7天，0.4μm微孔濾膜過濾得瑪咖西洋參提取液；

4.將黃芪粉碎，過20目篩；

5.稱取枸杞子3kg和黃芪粉3kg，混合均勻，加入20倍量的純化水，在80℃時常壓浸提，浸提3次，每次浸提4h，過濾，合并濾液，濃縮得枸杞子黃芪提取液；

6.將瑪咖西洋參提取液、枸杞子黃芪提取液按加入到濃香型白酒中，調(diào)整酒精度為35％vol，并定容至1000L，過濾，灌裝，得到35％vol的緩解體力疲勞保健酒。

本發(fā)明為內(nèi)服保健酒，每日飲用量為100mL，長期飲用即可達(dá)良好效果。

以上實施例為本發(fā)明部分具體實施方式，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本領(lǐng)域的人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到的變化或替換，其均應(yīng)屬于本發(fā)明的權(quán)利要求保護范圍當(dāng)中。