本發(fā)明涉及生物發(fā)酵制藥技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種高純度米爾貝霉素的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù):
抗生素米爾貝霉素是阿維菌素的結(jié)構(gòu)類似物,同屬十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物。與阿維菌素相比,米爾貝霉素C-13位缺少雙糖基團(tuán),并分別在C-5,C-22,C-23和C-25位上有所不同。由于它的活性高效、毒副作用低、安全可靠、易降解、以及它們?cè)隍?qū)線蟲(chóng)和除殺體內(nèi)外寄生蟲(chóng)均有優(yōu)良的效果,因而被廣泛應(yīng)用于抗寄生蟲(chóng)藥,其應(yīng)用價(jià)值和研究前景越來(lái)越受到世界的關(guān)注。米爾貝霉素是十六元大環(huán)內(nèi)酯混合物,自從在篩選的微生物發(fā)酵液中發(fā)現(xiàn)米爾貝霉素至今,已成功分離出了20種米爾貝霉素,它對(duì)各種螨類都有較高的防治效果,主要?dú)⒑r(nóng)業(yè)害蟲(chóng)和家畜寄生蟲(chóng),用量少且作用強(qiáng),最大的關(guān)鍵點(diǎn)是對(duì)人類沒(méi)有副作用。而目前對(duì)于一些米爾貝霉素的生產(chǎn)方法工藝復(fù)雜,并且吸附率和解吸率不高,使用上影響米爾貝霉素的生產(chǎn)效率。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題,本發(fā)明提出了一種高純度米爾貝霉素的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明提出的一種高純度米爾貝霉素的生產(chǎn)方法,其生產(chǎn)方法包括以下步驟:
S1:先將菌種發(fā)酵,提取發(fā)酵后得到含有米爾貝霉素的發(fā)酵液;
S2:將含有米爾貝霉素的發(fā)酵液固液分離,在菌渣中加入溶媒的水溶液進(jìn)行提取, 提取后固液分離在進(jìn)行過(guò)濾,得到提取液;
S3:在提取液中加入樹(shù)脂,并用溶媒和水配制的解吸液進(jìn)行解吸;
S4:吸附1.5h后,先用7BV的67%-73%乙醇溶液進(jìn)行洗滌,再用4BV的82%-93%乙醇溶液進(jìn)行洗脫,得到高純度的米爾貝霉素。
優(yōu)選的,所述樹(shù)脂為HZ816大孔樹(shù)脂。
優(yōu)選的,所述S4中,吸附1.5h后,先用7BV的68%-72%乙醇溶液進(jìn)行洗滌。
優(yōu)選的,所述S4中,吸附1.5h后,再用4BV的83%-92%乙醇溶液進(jìn)行洗脫。
優(yōu)選的,所述S2中,吸附前,米爾貝霉素的質(zhì)量濃度在6%-6.7%。
優(yōu)選的,所述S4中,吸附后,米爾貝霉素的質(zhì)量濃度在16.5%-17%。
本發(fā)明的有益效果是:設(shè)計(jì)合理,操作簡(jiǎn)單高效,降低了成本,利用HZ816大孔樹(shù)脂對(duì)發(fā)酵液中的米爾貝霉素進(jìn)行分離純化,解吸率高達(dá)80%左右,并且工藝簡(jiǎn)單穩(wěn)定,具有吸附率和解吸率高、洗脫劑安全低毒的特點(diǎn),具有較高的應(yīng)用價(jià)值。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步解說(shuō)。
實(shí)施例一
本實(shí)施例提出了一種高純度米爾貝霉素的生產(chǎn)方法,其生產(chǎn)方法
包括以下步驟:
S1:先將菌種發(fā)酵,提取發(fā)酵后得到含有米爾貝霉素的發(fā)酵液;
S2:將含有米爾貝霉素的發(fā)酵液固液分離,在菌渣中加入溶媒的水溶液進(jìn)行提取, 提取后固液分離在進(jìn)行過(guò)濾,得到提取液;
S3:在提取液中加入樹(shù)脂,并用溶媒和水配制的解吸液進(jìn)行解吸;
S4:吸附1.5h后,先用7BV的67%-73%乙醇溶液進(jìn)行洗滌,再用4BV的82%-93%乙醇溶液進(jìn)行洗脫,得到高純度的米爾貝霉素。
實(shí)施例二
本實(shí)施例提出了一種高純度米爾貝霉素的生產(chǎn)方法,其生產(chǎn)方法包括以下步驟:
S1:先將菌種發(fā)酵,提取發(fā)酵后得到含有米爾貝霉素的發(fā)酵液;
S2:將含有米爾貝霉素的發(fā)酵液固液分離,在菌渣中加入溶媒的水溶液進(jìn)行提取, 提取后固液分離在進(jìn)行過(guò)濾,得到提取液;
S3:在提取液中加入樹(shù)脂,并用溶媒和水配制的解吸液進(jìn)行解吸;
S4:吸附1.5h后,先用7BV的68%-72%乙醇溶液進(jìn)行洗滌,再用4BV的83%-92%乙醇溶液進(jìn)行洗脫,得到高純度的米爾貝霉素。
以上所述,僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi),根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變,都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。